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细粒棘球绦虫原头蚴侵染RAW264.7细胞不同时间段基因差异表达分析

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引言

第一章 绪论

细粒棘球绦虫及其免疫学研究进展

1. E.g的生物学特性

2. E.g免疫学研究进展

2.1 先天性免疫

2.2 获得性免疫

2.3 不同Th细胞类型及细胞因子在CE中的作用

3. E.g的免疫逃避机制

4. 囊型棘球蚴病(CE)

5. 巨噬细胞在CE中的作用

6.NO在抗寄生虫感染过程中的作用机制

7. E.g免疫和疫苗的研究现状

7.1 E.g的抗原与代谢

7.2 实验性免疫治疗和预防

第二章 试验内容

试验一 细粒棘球绦虫原头蚴的体外培养及观察

1. 材料

1.1实验材料

1.2主要仪器与试剂

1.3主要试剂

2. 试验方法

2.1 细粒棘球绦虫原头蚴体外培养体系建立

2.2 原头蚴的培养

2.3 原头蚴体外培养观察

3. 结果

3.1 原头蚴的染色及活性观察

3.2 原头蚴体外培养不同时间段的发育形态观察

4. 讨论

5. 小结

试验二 PSC侵染RAW264.7细胞NO的变化规律研究

1.材料

1.1虫株

1.2主要试剂及耗材

1.3主要仪器设备

2. 方法

2.2原头蚴培养

2.3侵染实验

2.4 NO含量的测定

2.5 数据处理

3. 结果

3.1 PBS对RAW264.7细胞NO分泌及细胞活性影响结果

3.2 PSC对RAW264.7细胞NO分泌及细胞活性影响结果

3.3 HC对RAW264.7细胞 NO分泌及细胞活性影响结果

3.4 HF对小鼠巨噬细胞NO分泌及细胞活性影响结果

3.5 相同时间各实验组对小鼠巨噬细胞NO分泌影响结果

4. 讨论

5. 小结

试验三 PSC侵染RAW264.7细胞因子的变化规律研究

1材料

1.2原头蚴收集

1.3小鼠巨噬细胞RAW264.7培养

2 方法

2.3 实时荧光定量PCR法检测细胞因子mRNA

2.4数据处理

3 结果

3.1 ELISA测定细胞因子含量结果

3.2 qPCR测定细胞因子含量结果

3.3 原头蚴侵染巨噬细胞不同时间段虫体和细胞的形态变化

4. 讨论

5. 小结

试验四 PSC侵染RAW264.7基因差异表达分析

1. 材料

1.1 虫株

1.2 主要试剂及耗材

1.3 主要仪器设备

2. 方法

2.2 总RNA提取

2.3 转录组测序文库构建

2.4 文库质量检测

2.5 差异基因表达分析

2.6 GO和KEGG富集分析差异表达基因

2.7 实时定量PCR

2.8 原位杂交

2.9 统计分析

3. 结果

3.1 转录组测序数据分析

3.2 差异基因表达(DEGs)分析

3.3 GO和KEGG富集分析DEGs

3.4 差异基因中与免疫相关基因的分析

3.5 定量实时PCR

3.6原位杂交

4.讨论

5. 小结

全文结论

创新点

参考文献

致 谢

作者简介

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