为异种器官移植建立转基因猪构建CD59表达载体

摘要

该课题选用了CD59cDNA为目的基因编码序列,以抑制补体激活链级反应生成的膜攻击复合对供体血管内皮的攻击.因为血管内皮是HAR的触发部位,ICAM-2启动子能使目的基因在血管内皮上特异地表达,CD59的第一个内含子能起增强子的作用,所以选用了ICAM-2启动子、CD59的第一个内容含子能起增强子的作用,所以选用了ICAM-2启动子、CD59的第一个内含子的片段为目的基因的调控序列,以获得目的基因血管内皮细胞特异的高效表达.该课题的目的是构建有效的、特别是具有血管内皮特异的、高表达的人CD59表达载体.用于建立转人CD59基因猪的研究.构建好的目的表达载体pcDNA3-Intronl-ICAM-2-CD59cDN将经转染细胞鉴定,分析后,用于建立转入CD59基因猪的研究.

目录

摘 要

ABSTRACT

前 言

研究工作

一本课题研究中通用的实验方法和主要的实验仪器

二表达载体的构建

(一)人ICAM-2启动子克隆

(二)增强子的克隆

(三)启动子(ICAM-2与)含cDNA的载体相连

(四)含ICAM-2-CDNA载体与增强子相连

讨论

一关于异种器官移植

(一)异种器官移植的必要性和可行性

(二)猪-人异种器官移植存在的主要问题及解决思路

(三)用转基因方法解决HAR问题

二表达载体的设计

(一)目的基因CD59的选择

(二)启动子的选择

(三)增强子的选择

三关于构建后载体鉴定的讨论

结 论

综述

关于异种器官移植用转基因动物研究的几个问题

参考文献

缩略语

致 谢