多通道PLGA脊髓再生介导管道治疗大鼠脊髓半横断损伤

摘要

[目的]:观察神经干细胞和生物活性材料PLGA、壳聚糖和明胶的生物相容性，神经干细胞与PLGA、壳聚糖和明胶体外共培养的生长规律，探索神经干细胞与PLGA、壳聚糖和明胶构筑多通道脊髓再生介导管道的可行性及其对脊髓损伤的治疗作用。 [方法]:从胎龄14～16天的Wistar大鼠脑组织分离、培养获得神经干细胞；将PLGA、壳聚糖和明胶等生物活性材料贴附在玻片表面制作成膜，然后将神经干细胞与PLGA、壳聚糖和明胶膜体外共培养，观察神经干细胞与PLGA、壳聚糖和明胶的生物相容性及神经干细胞在这些生物活性材料上的生长规律；以PLGA为原材料，根据脊髓的解剖和生理特征，制作多通道脊髓再生支架，将其植入大鼠脊髓缺损腔内，观察其与脊髓组织的相容性和在体内的降解情况；将神经干细胞种植于此多通道脊髓再生支架内部和表面，构筑多通道PLGA脊髓再生介导管道。制作Wistar大鼠脊髓半横断损伤模型，将构筑的多通道PLGA脊髓再生介导管道植入脊髓损伤缺损处，观察术后大鼠脊髓结构和功能的变化。观察时间8周，每周对术侧后肢作BBB评分，数据以(-X)±SD形式表达，以SPSS统计软件作统计分析。 [结果]:成功地从胎龄14～16天的Wistar大鼠脑组织分离、培养出神经干细胞，能自我更新，具备多项分化能力，可分化为神经元和胶质细胞。神经干2细胞与PLGA、壳聚糖和明胶生物相容；神经干细胞在壳聚糖和明胶膜表面贴附分化良好，PLGA膜表面不贴附，但加促细胞贴附剂明胶或壳聚糖可以促使神经干细胞在PLGA膜表面贴附、分化；神经干细胞在PLGA或者壳聚糖膜表面的24小时贴附牢固，48小时开始分化。神经干细胞在多通道PLGA脊髓再生支架内贴附。PLGA脊髓再生介导管道植入脊髓半横断Wistar大鼠，术侧后肢运动功能与PLGA、NSCs和损伤对照组比较有统计显著差异性。 [结论]:神经干细胞和生物活性材料PLGA、壳聚糖和明胶的生物相容；在这三种材料中，以PLGA支架和神经干细胞构筑脊髓再生介导管道最为适宜，其最佳移植时为体外培养24～48小时之间，对大鼠损伤脊髓的结构重建和功能恢复有一定程度的治疗作用。

目录

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缩略语

前言

第一部分 大鼠胚胎神经干细胞的培养和鉴定

第二部分：神经干细胞与PLGA、壳聚糖和明胶构筑工程化组织的可行性分析

第三部分 多通道PLGA脊髓再生介导管道的制作及其与大鼠胚胎神经干细胞和脊髓的生物相容性

第四部分：大鼠胚胎神经干细胞种植的多通道PLGA脊髓再生介导管道治疗大鼠脊髓半横断损伤

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

附录一 综述中枢神经干细胞生物学与脊髓修复近况

附录二 在校期间发表论文

致谢