碱性成纤维细胞生长因子治疗下肢缺血剂量的实验研究

摘要

目的：通过对30只兔下肢缺血模型的大体观察、DSA计数侧支血管数、微血管密度检测及微血管/肌纤维束比值测定，评价不同剂量rh-bFGF治疗兔后肢缺血的有效性，筛选rh-bFGF治疗兔下肢缺血的最佳剂量；通过肝、肾功能检测、动脉造影和病理学观察，评价不同剂量rh-bFGF治疗兔后肢缺血的安全性；为临床应用rh-bFGF治疗肢体动脉狭窄或闭塞性病变提供理论依据。 材料和方法：应用30只大耳白兔，采用切除左侧后肢股动脉及结扎其主要分支的方法建立下肢缺血模型。随机分为5组(每组6只)，A组(对照组)，经肌肉局部注射5mlTris缓冲液/只；B、C、D、E组为治疗组，B组，经肌肉局部注射rh-bFGF2.5μg+5mlTris缓冲液/只；C组，经肌肉局部注射rh-bFGF5μg+5mlTris缓冲液/只；D组，经肌肉局部注射rh-bFGF10μg+5mlTris缓冲液/只；E组，经肌肉局部注射rh-bFGF20μg+5mlTris缓冲液/只。各组在模型制作后第10天在术侧肢体股内侧肌群分5点注射给药，造模术后观察30天处死。各组于给药前、给药后10天、给药后20天抽取静脉血检测肝、肾功能：各组动物处死前均采用DSA技术观察肢体侧支血管形成，计数侧支血管数；处死动物后取股内侧肌肉制作标本，进行毛细血管密度、微血管/肌纤维束比值检测及病理学观察。 结果：1.大体观察：各组动物实验中均无死亡。模型制作后10天内动物左下肢有不同程度的跛行。模型制作10天以后A、B组跛行逐渐加重：C、D、E组用药后跛行逐渐缓解。各组手术创口愈合较好，无下肢溃疡坏疽。A组处死后取病理组织时发现一只愈合切口内有脓肿形成。2.下肢动脉造影：DSA影像显示各组左侧股动脉连续性中断，A组有少量纤细的侧支血管分布于大腿中段乏血管区，B、C组由同侧髂内动脉、股深动脉发出数支侧支血管，远端动脉未见显影，D、E组见缺血肢体有较多的侧支血管迂曲走行，缺血肢体远端动脉通过侧支循环显影，充盈速度较健侧稍慢；各组DSA均未见肿瘤样及畸形血管形成。D、E组侧支血管数均多于对照组及B、C组(P<0.05)，但D、E组间侧支血管数比值无统计学意义(P>0.05)；B、C组与对照组及B、C组间侧支血管数比较均无统计学意义(P>0.05)。3.微血管密度和微血管/肌纤维束比值：B、C组与对照组微血管密度和微血管/肌纤维束比值差异无统计学意义(P>0.05)；B、C组间微血管密度和微血管/肌纤维束比值无统计学意义(P>0.05)；D、E组微血管密度和微血管/肌纤维束比值较对照组增高(P<0.05)；D、E组缺血肢体的微血管密度和微血管/肌纤维束比值与B、C组比较差异有统计学意义(P<0.05)；但D、E组间微血管密度和微血管/肌纤维束比值无统计学意义(P>0.05)。4.病理学观察：A组骨骼肌纤维萎缩、变性，肌纤维间距增大，间质内血管稀少；B、C组骨骼肌纤维轻度萎缩，肌纤维间距增大，间质内见少量毛细血管；D、E组血管生成较多，管腔内可见红细胞，肌纤维未见明显萎缩；各组骨骼肌细胞在rh-bFGF。的影响下未见异常增殖或肿瘤样生长等表现。5.血肝、肾功能检测：各组给药前、给药后10天、给药后20天抽取静脉血检测血ALT、AST、BUN、Cr，各组内不同时间各项指标检测值比较差异无统计学意义(P>0.05)。 结论：1.rh-bFGF可有效促进兔缺血肢体血管新生、侧支循环建立；其疗效随着rh-bFGF剂量的增加而增强，在10μg时取得最好的治疗效果，20μg时疗效不再增加，10μg是rh-bFGF治疗肢体缺血的最佳剂量。2.应用实验剂量rh-bFGF治疗肢体缺血是安全的，对肝、肾功能无明显影响，不会造成血管平滑肌、骨骼肌细胞的异常增生和肿瘤样生长。

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综述 治疗性血管生成与下肢缺血性疾病

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