矮身材儿童生长激素受体外显子3基因多态性以及与rhGH疗效相关性分析

摘要

目的：研究生长激素受体(GHR)基因外显子3在矮小症患儿和健康儿童中的遗传多态性分布频率，比较两组人群的分布是否存在差异，并探讨重组人生长激素(rhGH)疗效与矮小症患儿该基因遗传多态性间的相关性。
　　 方法：选取143例矮小症患儿作为实验组，包括生长激素缺乏症(GHD)患儿58例，非生长激素缺乏症患儿85例，采用多重聚合酶链反应(PCR)的方法对GHR外显子3进行多态性分析，与同期年龄性别匹配的健康儿童170例(对照组)对比。从实验组选取70例接受为期至少3个月rhGH治疗的矮小症患儿，包括GHD患儿45例(剂量为0.1IU/Kg·d)，特发性矮小(ISS)患儿25例(剂量为0.15IU/Kg·d)，每晚临睡前皮下注射，在疗程中均未使用其他激素类药物。分别于治疗前及治疗后每隔3个月测定身高、体重及甲状腺功能、血糖等生化指标；以SPSS16.0统计软件分析三种基因型的分布频率以及外显子3多态性、患儿性别、疗程以及GH缺乏程度对rhGH疗效[以生长速率(GV)为衡量指标]的影响。采用Pearson相关分析方法分析rhGH疗效指标与各种可能的影响因素之间的关联。
　　 结果：1、实验组儿童的f1/f1、f1/d3及d3/d3分布频率分别为49.7％、40.6％及9.8％，f1、d3的等位基因频率分别为69.9％、30.1％；而对照组儿童的f1/f1、f1/d3及d3/d3分布频率分别为64.7％、28.8％及6.5％，f1、d3的等位基因频率分别为79.1％、20.9％。两组基因型和等位基因频率分布差异均有统计学意义(P<0.05)。
　　 2、基因型为f1/d3或d3/d3的GHD患儿rhGH治疗后生长速率(GV：11.36±2.49)明显高于基因型为f1/f1的患儿(GV：9.44±2.35)；基因型为f1/d3或d3/d3的ISS患儿rhGH治疗后生长速率(GV：11.18±2.44)亦明显高于基因型为f1/f1的患儿(GV：8.74±2.36)，不同基因型的患儿生长速率对比差异有统计学意义(P<0.05)。
　　 3、GH激发试验峰值<5ng/ml的患者中，不同基因型(f1/f1 vs f1/d3或d3/d3)的患儿rhGH治疗后生长速率(GV：9.11±1.47 vs12.31±3.11)对比存在显著差异(P<0.05)，基因型f1/d3或d3/d3组的生长速率高于基因型f1/f1组；而GH激发试验峰值为5-10ng/ml的患者中不同基因型(f1/f1 vs f1/d3或d3/d3)的患儿rhGH治疗后生长速率(GV：9.55±2.76 vs10.84±1.53)，f1/d3或d3/d3基因型患儿中不同GH缺乏程度(<5ng/l vs5-10ng/ml)的治疗后生长速率(GV：10.84±1.53 vs12.31±3.11)以及f1/f1基因型患儿中不同GH缺乏程度(<5ng/ml vs5-10ng/ml)的治疗后生长速率(GV：9.55±2.76 vs9.11±1.47)对比均未见显著差异(P>0.05)。
　　 4、女性患儿中不同基因型(f1/f1 vs f1/d3或d3/d3)rhGH治疗后生长速率(GV：7.86±2.05 vs12.13±3.67)对比差异有统计学意义(P<0.05)，基因型f1/d3或d3/d3组的生长速率高于基因型f1/f1组；而男性患儿中不同基因型(f1/f1 vs f1/d3或d3/d3)的生长速率(GV：10.19±2.07 vs11.22±1.69)对比未见显著差异(P>0.05)；基因型f1/f1的患儿rhGH治疗后不同性别(男vs女)生长速率(GV：10.19±2.07 vs7.86±2.05)对比差异有统计学意义(P<0.05)，男孩生长速率高于女孩；而基因型为f1/d3或d3/d3的患儿治疗后不同性别(男vs女)生长速率(GV：11.22±1.69 vs11.22±1.69)对比未见显著差异(P>0.05)。
　　 5、GHD患儿生长速率与GH激发试验峰值单因素相关分析P值小于0.05，回归系数为-0.765。
　　 6、20例矮小患儿生化指标甲状腺功能和血糖在rhGH治疗0、6、12个月后无明显变化(P>0.05)，而rhGH治疗前6个月和治疗12个月的生长速率(GV：12.45±2.03 vs10.19±2.07)对比差异有统计学意义(P<0.05)，治疗前6个月高于治疗12个月的生长速率。
　　 结论：1、本研究中实验组儿童GHR基因型为f1/d3或d3/d3的比例明显高于对照组，且d3等位基因频率亦高于对照组，推测GHR外显子3的缺失与矮小症的发病机制有一定关系。不同地区人群该基因型分布存在差异提示GHR基因存在种族差异性，也一定程度上解释了不同种族间生长激素治疗矮小症患者疗效的不同。
　　 2、rhGH治疗后基因型为f1/d3或d3/d3的患儿生长速率明显高于基因型为f1/f1的患儿提示rhGH的疗效与GHR基因型有相关性，d3-GHR基因型可作为rhGH治疗反应良好的预测因子之一。rhGH的疗效还与GH缺乏程度呈负相关。