妊娠期需氧菌性阴道炎与妊娠结局及母婴B族链球菌感染的相关性研究

摘要

近年研究发现，引起阴道细菌感染的疾病有两类，一类由厌氧菌和兼性厌氧菌引起，临床上称为细菌性阴道病(BV)，另一类由需氧菌引起，临床上称需氧菌性阴道炎(AV)。关于BV的研究很多，而关于AV的研究国内报道较少，妊娠期AV以及对妊娠结局的影响国内尚未见报道，国外报道不多。B族链球菌(GBS)是AV常见致病菌，妊娠期GBS感染可导致严重的不良妊娠结局，但母婴GBS的血清型及基因型配对研究国内报道较少。因此，我们选取在我院产科门诊建册常规产检、诊断为需氧菌性阴道炎(AV)的孕妇150例为研究对象，分析阴道菌群分布情况及其与妊娠结局相关性，并对其母婴配对GBS菌株血清型及基因型进行了相关性分析。本研究分为两个部分：
　　 第一部分：妊娠期需氧菌性阴道炎对妊娠结局的影响。
　　 目的：探讨AV孕妇妊娠不同时期阴道菌群分布情况及其与妊娠结局相关性。
　　 方法：选取2010年7月～2012年7月在深圳市南山人民医院产科门诊建册常规产检、诊断为AV的孕妇150例为研究对象，分为三组，其中早孕组50例（孕周＜13周），中孕组50例(13周≤孕周＜28周)，晚孕组50例（孕周≥28周），并选取同期在我院产科门诊行健康检查的正常孕妇100例为对照组。取阴道分泌物，部分镜检，部分送微生物培养，AV阳性者根据患者意愿给予治疗。分析AV孕妇阴道菌群分布，并随访阴道分泌物、妊娠结局包括分娩孕周、分娩方式、胎膜破裂、绒毛膜羊膜炎、胎儿窘迫、产褥感染、产后出血、新生儿评分、新生儿体重及新生儿感染情况。
　　 结果：⑴AV孕妇以阴道分泌物性状改变就诊者占31.3％(47/150)，分泌物一般为黄色或黄绿色、稀薄、脓性。阴道菌群主要以GBS、大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌及粪肠球菌为主，其中GBS检出率为28.6％(43/150)，早孕组32％，中孕组28％，晚孕组26％。⑵150例AV孕妇胎膜早破(26％)、绒毛膜羊膜炎(10.7％)、产后出血(9.3％)的发生率均明显高于对照组的发生率（分别为13.0％、2.0％、3.0％）（P＜0.05）;各个孕期AV孕妇胎膜早破、绒毛膜羊膜炎、产后出血发生率差异无统计学意义(P＞0.05)。⑶AV孕妇所分娩的新生儿中，新生儿感染率为11.3％，高于对照组的2％(P＜0.05);而新生儿体重、Apgar评分明显低于对照组(P＜0.05）;共发生新生儿肺炎4例，其中AV孕妇分娩新生儿3例，均为GBS感染。⑷应用克林霉素磷酸酯阴道泡腾片治疗后，治疗组胎膜早破(20.6％)、绒毛膜羊膜炎(4.9％)、产后出血(5.9％)的发生率明显低于未治疗组孕妇的发生率（分别为37.5％、22.9％、14.6％）(P＜0.05)。而分娩方式、胎儿窘迫、早产、产褥感染发生率两组比较，差异均无统计学意义(P＞0.05)。⑸治疗组新生儿感染率为8.9％，明显低于未治疗组的16.7％（P＜0.05）;而新生儿体重、Apgar评分明显高于未治疗组（P＜0.05）。
　　 结论：AV感染孕妇主要症状为阴道分泌物呈黄色、黄绿色、稀薄、脓性，感染菌群主要以GBS、大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌及粪肠球菌为主，AV感染可导致胎膜早破、绒毛膜羊膜炎、产后出血、新生儿感染、窒息、低出生体重等不良妊娠结局，经治疗可改善妊娠结局。
　　 第二部分：母婴感染GBS血清型及基因型分析。
　　 目的：探讨母婴配对GBS菌株血清型和DNA指纹图谱是否一致。
　　 方法：选取第一部分AV中为GBS感染者及其新生儿口咽部分泌物培养GBS阳性者为研究对象，随机选取GBS菌株72株利用免疫双扩散法进行血清学分型，并将母婴菌株配对，研究其血清型是否一致，应用RAPD技术对18株不同血清型的菌株进行DNA指纹图谱研究，比较GBS菌株血清型和基因型是否一致。
　　 结果：⑴对43例GBS感染者进行药敏试验，GBS对青霉素G、氨苄青霉素、头孢唑啉、头孢替安及克林霉素敏感，敏感率均为97.7％，红霉素和头孢哌酮的耐药率较高，红霉素耐药率高达23.3％。⑵对72株GBS菌株进行了血清型分析，共分离出9个血清型，包括TypeⅠa、Ⅰ b、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ，其中Ⅱ型占23.6％，Ⅲ型占25％，是主要血清型，另外发现3株GBS为不可分型。⑶利用免疫双扩散法将12例新生儿GBS供试抗原与其母亲GBS抗血清进行配对检测，12例均产生沉淀线，相应的沉淀线完全融合，形成平滑的曲线。⑷应用RAPD技术对18株GBS基因型进行研究，所用7条随机引物中有4条呈现良好的多态性和稳定性，可产生差异显著的指纹图谱。18株GBS间的遗传距离为0.082～0.531，平均距离为0.35，其中第4株和第13株同为血清型TypeⅢ，但遗传距离最大，为0.358;第1株和第7株为不同血清型，而遗传距离最小，为0.011。不同血清型的GBS菌株具有相似的指纹图，而同一血清型的菌株指纹图存在差异。
　　 结论：①共分离出9个血清型，其中Ⅱ型和Ⅲ是主要血清型，另外发现3株GBS为不可分型，孕妇及其产婴儿GBS菌株具较高的相似性。②不同血清型的GBS菌株具有相似的指纹图，同一血清型的菌株指纹图存在差异。

目录

声明

摘要

缩略语／符号说明

前言

研究现状、成果

研究目的、方法

一、妊娠期需氧菌性阴道炎对妊娠结局的影响

1．1 对象与方法

1．1．1 研究对象

1．1．2 方法

1．1．3 诊断标准

1．1．4 治疗方法

1．1．5 治愈标准

1．1．6 随访

1．1．7 统计学方法

1．2 结果

1．2．1 不同孕期AV的临床症状

1．2．2 不同孕期AV孕妇阴道菌群的流行特征

1．2．3 不同孕期AV与正常孕妇妊娠结局的比较

1．2．3 治疗后的AV和未治疗的AV妊娠结局

1．3 讨论

1．3．1 妊娠期阴道菌群的变化

1．3．2 需氧菌性阴道炎(AV)

1．3．3 妊娠期AV阴道菌群分析

1．3．4 妊娠期AV对母婴的危害

1．4 小结

1．5 附图

二、母婴感染B族链球菌血清型及基因型分析

2．1 材料与方法

2．1．1 试验材料

2．1．2 方法

2．2 结果

2．2．1 7种常用抗生素对GBS的敏感性

2．2．2 抗血清效价的测定结果

2．2．3 母婴GBS血清分型

2．2．4 母婴配对GBS菌株血清型一致性分析情况

2．2．5 RAPD反应条件的优化和引物筛选结果

2．2．6 RAPD反应的可重复性

2．2．7 GBS多态性分析

2．2．8 相似系数、遗传距离以及亲缘关系树状图生成

2．3 讨论

2．3．1 GBS耐药性

2．3．2 GBS血清型

2．3．3 RAPD与GBS基因型

2．4 小结

全文结论

论文创新点

参考文献

发表论文和参加科研情况说明

综述(一) 妊娠期阴道细菌感染对妊娠结局的影响及诊治进展

综述(二) 围产期B族链球菌感染的研究新进展

致谢