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湿疹患者外周血IL-22和AhR的表达及其临床意义

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缩略语

前言

研究现状、成果

研究目的、方法

对象和方法

1.1病例来源

1.2健康对照组

1.3 诊断标准

1.4排除标准

1.5 观察指标

1.6主要试剂

1.7 实验器材

1.8 试剂的配置

1.9 实验器具的处理和准备

1.10 实验仪器

1.11 实验方法和步骤

1.12临床及实验室检查

1.13治疗方法

1.14统计学方法

结果

2.1总RNA纯度检测

2.2总RNA完整性检测

2.3 GAPDH、IL-22、AhR扩增产物的鉴定

2.4湿疹患者IL-22和AhR相对表达量及与部分指标相关性分析

讨论

3.1 Th1/Th2、Th17、Th22细胞与湿疹

3.2 IL-22在湿疹发病中的作用机制

3.3 AhR在湿疹发病中的作用机制

3.4 IL-22、AhR与湿疹

结论

参考文献

发表论文和参加科研情况说明

综述: Th22细胞及其细胞因子IL-22在炎症免疫性疾病中的研究进展

致谢

个人简历

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摘要

目的:
  湿疹是一种由各种因素综合作用下引起的炎症性皮肤病。研究发现,辅助性T细胞(T helper cells,Th)比例失衡及由此引发的相关的细胞因子表达量异常是湿疹发病的主要免疫学机制。检索国内外文献发现,白介素-22(interleukin22,IL-22)和芳香烃受体(Arylhydrocarbon Receptor, AhR)作为Th22细胞重要的相关细胞因子在炎症性疾病和自身免疫性疾病中都发挥着重要作用。因此本课题旨在研究IL-22和AhR在湿疹发病中的作用机理及二者的相关性。本实验初步探讨:1.IL-22 mRNA和AhR mRNA在湿疹患者与正常人外周血中的表达差异;2.不同性别的湿疹患者外周血中IL-22 mRNA和AhR mRNA的表达差异。3.IL-22 mRNA和AhR mRNA在不同分型湿疹患者外周血中的表达量及其差异;4.对湿疹患者治疗2周、4周后检测患者外周血中IL-22 mRNA和AhR mRNA表达量的变化;5.IL-22mRNA和AhR mRNA表达量之间的相关性,从而探讨这两个因子在湿疹发病中的相互作用;6.IL-22 mRNA和AhR mRNA在湿疹患者外周血中的表达量与湿疹皮损面积及严重度指数(Eczema area and severity index, EASI)的相关性。
  方法:
  本研究实验组来自就诊于天津市人民医院皮肤科门诊的湿疹患者,共60例,另健康对照组来自天津医科大学总医院同期健康体检者40例。采用实时荧光定量聚合酶链式反应( Real-time Fluorescence Quantitative Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction, RT-PCR)方法对60例湿疹患者和40例健康者外周血中IL-22 mRNA和AhR mRNA的表达量进行检测,按照EASI评分标准对60例湿疹患者皮损面积及严重度进行评分。利用统计学软件SPSS17.0处理实验数据,以P<0.05或P<0.01有统计学意义。
  结果:
  1.湿疹患者外周血中 IL-22、AhR mRNA的表达量明显高于健康对照组( IL-22⊿CT值分别为:2.57±0.53,5.91±0.78; AhR⊿CT值分别为:2.87±0.50,6.53±0.78),差异均有统计学意义(P<0.01)。
  2.不同性别的湿疹患者外周血中 IL-22、AhR mRNA的表达无明显差异(P>0.05)。
  3.急性期组、亚急性期组、慢性期组湿疹患者外周血中 IL-22 mRNA和 AhR mRNA的表达量依次递增(IL-22的⊿CT值分别为:2.79±0.47,2.63±0.49,2.28±0.51;AhR⊿CT值分别为:3.05±0.51,2.99±0.47,2.58±0.38),慢性期组分别与急性期组和亚急性期组比较差异有统计学意义(P<0.05),但急性期组与亚急性期组比较无差异(P>0.05)。
  4.湿疹患者治疗2周后外周血中IL-22、AhR mRNA的表达量较治疗前明显下降( IL-22⊿CT值分别为:3.77±0.58,2.61±0.55;AhR⊿CT值分别为:4.46±0.81,2.91±0.50),湿疹患者治疗4周后与治疗2周时相比较外周血中IL-22、AhRmRNA的表达量明显下降(IL-22⊿CT值分别为:5.05±0.79,3.78±0.62;AhR⊿CT值分别为5.66±0.95,4.46±0.84),差异均有统计学意义(P<0.01)。
  5.湿疹患者外周血中IL-22mRNA与AhR mRNA的表达量呈正相关性且具有统计学意义(r=0.433,P=0.001)。湿疹患者外周血中IL-22 mRNA和AhR mRNA的表达量与EASI评分之间呈正相关(IL-22⊿CT值与EASI评分:r=-0.302, P=0.019,结果有统计学意义;AhR⊿CT值与EASI评分:r=-0.117,P=0.374,结果无统计学意义)。
  结论:
  1.湿疹患者外周血中 IL-22mRNA和 AhR mRNA表达量均显著高于健康对照组,且IL-22mRNA的表达量与EASI评分之间呈正相关,说明IL-22和AhR参与了湿疹的发生发展,并且IL-22可以作为评价湿疹患者严重程度的指标。
  2.经治疗2周、4周后湿疹患者IL-22mRNA和AhR mRNA表达量明显降低,说明IL-22和AhR参与了湿疹的致病过程。IL-22和AhR是Th22细胞重要的相关细胞因子,由此推测 Th22细胞在湿疹的发生发展中也起到了重要的作用。

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