苯达莫司汀在中国人群中药代动力学、药效学研究及SLC22A1、CYP1A2、GSTA1基因单核酸多态性与其血药浓度相关性分析

摘要

目的：研究苯达莫司汀在中国人群（B细胞惰性淋巴瘤患者）中药代动力学、药效学特性，并分析与苯达莫司汀转运、代谢相关基因SLC22A1、CYP1A2、GSTA1的SNP对其血药浓度的影响。
　　方法：1.采用超高效液相串联质谱（UPLC-MS/MS）建立测定苯达莫司汀血药浓度方法，并进行方法学验证，包括考察方法的专一性、准确度、精密度、基质效应、回收率、样品稳定性、稀释效应。2.按入选、排除标准，筛选14位在天津医科大学肿瘤医院接受治疗的B细胞惰性淋巴瘤患者进行药代动力学研究。受试者按照120 mg/m2/d,第1天和第2天给药，以21天为一个周期。静脉滴注时长120分钟。用药第一天于静脉滴注前（0 h）和滴注开始后1 h、2 h，滴注完成后5 min、10 min、20 min、30 min、45 min、1 h、1.5 h、2 h、2.5 h、3 h、4 h、6 h、8 h从静脉采血4.0 ml。静脉血以肝素钠抗凝后，在3000 r/min，4℃条件下离心4 min，血浆置于-80℃冰箱中冷冻保存待测。UPLC-MS/MS法测定苯达莫司汀血药浓度，应用 DAS2.0软件计算药代动力学参数。3.按入选、排除标准，筛选21位受试者进行Ⅱ期研究（其中5位受试者用药一周期后，停止用药，退出临床试验），用药6周期后采用RECIST标准评价苯达莫司汀药效。同时，将给药方案调整为静脉滴注4h；在给药结束时、第二次给药前采集血样，测定苯达莫司汀血药浓度。4.使用QIAamp血液DNA提取试剂盒提取 DNA，采用 PCR-直接测序法检测 SLC22A1（ rs200684404， rs4646277，rs2282143，rs628031，rs35167514，rs622342）、CYP1A2（rs762551, rs2069514, rs2470890，rs2472304，rs12720461）、GSTA1（rs3957356，rs3957357）的多态性。采用SPSS19.0软件统计分析SNP与苯达莫司汀血药浓度之间的关系。
　　结果：1.建立了UPLC-MS/MS法测定苯达莫司汀血药浓度。其专一性、准确度、精密度、基质效应、回收率、样品稳定性、稀释效应均符合药代动力学研究要求。血浆苯达莫司汀浓度在5~1000ng·mL-1范围内线性关系良好(r2=0.9981)，定量下限为5 ng·mL-1，日内和日间精密度(RSD)均小于12.17％，准确度为91.39%~99.60%;提取回收率和基质效应分别为102.70%~104.77%和84.82%~91.77%。2.单次静脉滴注盐酸苯达莫司汀120 mg/m2/d，滴注时长120 min；主要药代动力学参数：Cmax为4822.571±3477.123 ng·mL-1；CL为25.75±15.198 L/h/m2； t1/2为0.388±0.157 h； AUC(0-∞)为6463.691±3859.084 ug/L*h。3.Ⅱ期16例受试者进行疗效评价结果：盐酸苯达莫司汀以120 mg/m2/d,第一天、第二天给药，以21天为一个周期，滴注时长为4 h,疗效CR为12.5%、PR为50.0%、SD为18.8%、PD为18.8%。4. SNP分型结果发现只有SLC22A1(rs683369、rs2282143、rs628031、rs622342)， CYP1A2(rs762551、rs2069514、rs2472304、 rs2470890)存在多态性。我们并未发现SNP与苯达莫司汀血药浓度存在相关性。
　　结论：1.已建立的检测苯达莫司汀血药浓度UPLC-MS/MS方法满足临床药代动力学要求。2.苯达莫司汀药代动力学研究结果表明其在体内快速消除，t1/2为0.388±0.157 h。3.在中国人群中试验表明，苯达莫司汀治疗B细胞惰性淋巴瘤有较好疗效。4.我们并未发现SNP与苯达莫司汀血药浓度之间存在相关性，可能原因是样本量太少造成的。

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缩略语/符号说明

前言

研究现状、成果

研究目的、方法

一、UPLC-MS/MS法测定苯达莫司汀血药浓度及药代动力学研究

1.1材料和方法

1.2血浆中苯达莫司汀测定的方法建立

1.3血浆中苯达莫司汀测定的方法学验证

1.4苯达莫司汀药代动力学研究

1.5 苯达莫司汀Ⅱ期受试者血药浓度测定

1.6讨论

1.7小结

二、苯达莫司汀药效学研究

2.1材料和方法

2.2讨论

2.3小结

三、转运、代谢相关基因SNP对苯达莫司汀血药浓度影响研究

3.1材料和方法

3.2结果

3.3讨论

3.4小结

结论

参考文献

发表论文和参加科研情况说明

附录

综述:苯达莫司汀药代动力学代谢相关基因的单核酸多态性研究进展

致谢

个人简历