酶法改性魔芋葡甘聚糖强化海藻酸-壳聚糖微囊缓释性能研究

摘要

该文探讨了β-甘露聚糖酶水解魔芋葡甘聚糖(KGM)的过程;研究了将不同时间水解产物用作海藻酸(ALG)-壳聚糖(CHI)体系添加剂,缓释牛血清白蛋白(BSA)与尼莫地平固体分散体的过程,探讨了不同水解时间魔芋葡甘聚糖与海藻酸、壳聚糖的相互作用.试验结果如下:在酶活200U/1,底物浓度小于10mg/ml下,测得米氏常数Km=8.27 mg/m1,最大反应速率Vmax=0.0221 mg/m1.min;在酶活225U/1,底物为10mg/ml,水解温度40°C下,反应初期粘度迅速下降,而还原糖变化较小,约1小时后反应停止.色谱分析表明,魔芋葡甘聚糖的部分水解产物的分子量分布呈近似正态分布,水解2min与水解5min的魔芋葡甘聚糖的平均分子量分别为1500000与700000左右.粘度测试表明,海藻酸与魔芋葡甘聚糖间有明显的增稠作用;红外测试表明,水解魔芋葡甘聚糖与海藻酸、壳聚糖的相互作用相对较强,魔芋葡甘聚糖的水解程度可用红外谱图表征;扫描电镜(SEM)观察表明,水解5min魔芋葡甘聚糖微囊内无相分离,微囊表面覆壳聚糖量较大;溶胀度测试表明,微囊在模拟肠液中有明显的溶胀度延迟现象,覆壳聚糖膜同时添加魔芋葡甘聚糖的体系,在模拟肠液中的溶胀度明显减少,有利于药物的缓释;海藻酸-酶解魔芋葡甘聚糖-壳聚糖微囊在模拟胃肠液中释放蛋白质的实验表明.适当降低魔芋葡甘聚糖分子量,增大魔芋葡甘聚糖浓度,并选择较高的壳聚糖分子量和壳聚糖浓度,同时适当降低凝胶离子浓度将会获得较好的缓释效果.在模拟肠液中,缓释效果最佳的体系为:ALG浓度2％w/v;KGM浓度为0.5％w/v,水解5min;CHI浓度为0.5％w/w,分子量为14110×10<'6>;凝胶离子浓度[Ca<'2+>]=0.2M.海藻酸-酶解魔芋葡甘聚糖-壳聚糖微囊在模拟胃肠液中释放尼莫地平固体分散体的实验也表明,适当降低魔芋葡甘聚糖的分子量与粘度,尼莫地平在模拟胃、肠液中的释药速率相对较低.

目录

文摘

英文文摘

独创性声明及学位论文版权使用授权书

前言

第一章文献综述

1.1魔芋葡甘聚糖简介

1.1.1魔芋葡甘聚糖的特性

1.1.2魔芋葡甘聚糖的提取与纯化

1.1.3魔芋葡甘聚糖的分析

1.1.4魔芋葡甘聚糖的应用

1.2魔芋葡甘聚糖的水解及水解产物的研究进展

1.2.1β-甘露聚糖酶水解魔芋葡甘聚糖生产低聚糖

1.2.2魔芋葡甘糖酶解低聚糖脂化制备类肝素药物

1.2.3不同分子量魔芋葡甘聚糖凝胶特性研究

1.2.4不同分子量魔芋葡甘聚糖与其它多糖的相互作用

1.3海藻酸微囊

1.3.1海藻酸的基本性质

1.3.2海藻酸微囊的应用

1.3.3改善海藻酸微囊性质的方法

1.4本文的主要工作

第二章β-甘露糖酶水解魔芋葡甘聚糖过程研究

2.1仪器与材料

2.1.1仪器与设备

2.1.2实验材料

2.2实验方法

2.2.1魔芋葡甘聚糖的提取与纯化

2.2.2 β-甘露聚糖酶活力测定

2.2.3动力学常数的确定

2.2.4 β-甘露聚糖酶部分水解魔芋葡甘聚糖

2.3结果与讨论

2.3.1魔芋葡甘聚糖浓度与粘度曲线

2.3.2糖浓度测定标准曲线

2.3.2β-甘露聚糖酶液酶活测定

2.3.3Km、Vmax的求取

2.3.4水解产物的理化参数的测试

2.4本章小结

第三章魔芋葡甘聚糖部分水解产物与海藻酸盐相互作用

3.1材料与方法

3.1.1试剂与设备

3.1.2实验材料

3.1.3微囊的制备

3.1.4魔芋葡甘聚糖部分水解产物与海藻酸盐的混合粘度的测定

3.1.5红外测试

3.1.6海藻酸盐微囊的扫描电镜(SEM)照片

3.1.7溶胀度的测定

3.2结果与讨论

3.2.1魔芋葡甘聚糖与海藻酸钠的增稠性

3.2.2红外测试

3.2.3海藻酸盐微囊的扫描电镜(SEM)照片

3.2.4微囊的溶胀测试

3.3本章小结

第四章魔芋葡甘聚糖部分水解产物对蛋白质在模拟胃肠液中释放的影响

4.1仪器与材料

4.1.1仪器与设备

4.1.2实验材料

4.2实验方法

4.2.1载蛋白质的海藻酸—魔芋葡甘聚糖微囊的制备

4.2.2载蛋白质的海藻酸—魔芋葡甘聚—壳聚糖的干态颗粒的制备

4.2.3载蛋白质干态微囊的释放

4.3结果与讨论

4.3.1魔芋葡甘聚糖部分水解产物对蛋白质释放的影响

4.3.2壳聚糖分子量与浓度对蛋白质释放的影响

4.3.3魔芋葡甘聚糖浓度对蛋白质释放的影响

4.3.4凝胶离子浓度对蛋白质释放的影响

4.3.5小结

第五章魔芋葡甘聚糖部分水解产物对尼莫地平在模拟胃肠液中释放的影响

5.1仪器与材料

5.1.1仪器与设备

5.1.2实验材料

5.2实验方法

5.2.1尼莫地平标准曲线的制作

5.2.2尼莫地平固体分散体的制备

5.2.3尼莫地平缓释微囊的制备

5.2.4尼莫地平缓释微囊的体外释放

5.3结果与讨论

5.3.1不同水解时间魔芋葡甘聚糖对未覆壳聚糖膜尼莫地平缓释微囊释放的影响

5.3.2不同水解时间魔芋葡甘聚糖对覆壳聚糖膜尼莫地平缓释微囊释放的影响

5.4本章小结

第六章结论与展望

6.1结论

6.3展望

参考文献

致谢