小分子杂环化合物对淀粉样蛋白(Aβ40)聚集过程影响的研究

摘要

淀粉样蛋白的聚集沉淀会引起许多疾病。虽然已经有许多小分子被发现能够抑制或促进淀粉样蛋白的聚集，但它们的作用机理及其影响蛋白质聚集的过程尚不清晰，从而制约了蛋白质聚集抑制剂的开发。因此，本文以阿尔茨海默症的致病蛋白质β-淀粉样蛋白（Aβ40）为目标蛋白，考察了小分子杂环化合物---硫磺素T（ThT）和表没儿茶素没食子酸酯（EGCG）对Aβ40聚集过程的影响，以期为今后抑制剂的开发提供理论和实验基础。
　　首先利用多种分析检测手段研究了ThT及其浓度对Aβ40聚集的影响。荧光动力学实验结果显示，ThT能在较低浓度下促进Aβ40聚集，但随着ThT浓度升高，这种促进作用会逐渐变弱；利用等温滴定微量量热实验对Aβ40单体与ThT相互作用的各个热力学参数分析发现，ThT与Aβ40是通过静电和疏水相互作用发生较弱的结合；同时，圆二色、透射电镜和种子实验的结果显示，Aβ40最终形成纤维的二级结构、形态结构以及表面性质不会因加入ThT而改变，也就是说ThT只能影响Aβ40的一次成核作用，对纤维的结构以及二次成核作用没有显著影响。
　　在EGCG影响Aβ40聚集方面，与ThT的结果相类似，EGCG在浓度较低时也有促进Aβ40聚集的作用；且EGCG与Aβ40间也是氢键和疏水相互作用，但此相互作用较ThT与Aβ40之间略强；同时，EGCG能够延缓Aβ40二级结构的转换，且随着 EGCG浓度的升高，纤维的交联程度越来越低，并逐渐向球状寡聚体转换；特别是，EGCG能够明显抑制纤维种子的二次成核作用。这些结果说明，虽然较低浓度EGCG也能促进Aβ40的聚集和纤维形成，但其却可通过纤维重塑作用改变纤维的形态和纤维的表面性质，使纤维的二次成核作用受到抑制，从而发挥其抑制剂的作用。

目录

声明

第一章 文献综述

1.1 引言

1.2 蛋白质的折叠与聚集

1.3 小分子杂环化合物在Aβ研究中的应用

1.4 Aβ聚集及其与小分子杂环化合物相互作用分析的检测手段

1.5 本研究的内容和意义

第二章 ThT对Aβ40聚集过程的影响

2.1 引言

2.2 材料和方法

2.3 结果与讨论

2.4 小结

第三章 EGCG对Aβ40聚集过程的影响

3.1 引言

3.2 材料和方法

3.3 结果与讨论

3.4 小结

第四章 结论与展望

4.1 结论

4.2主要创新点

4.3 展望

参考文献

发表论文和参加科研情况说明

致谢