BMP2在C2C12细胞系中对MEF1调节作用的研究

摘要

该实验利用HEF1在鼠内的同源基因MEF1作为观测指标,认识BMP2和MEF1之间的关系,为进一步了解HEF1在骨形成过程中的作用提供一个简化的研究模型.该论文进行了以下工作:1.构建MEF1探针质粒.根据GenBank中提供的MEF1基因序列设计探针引物.从正常小鼠的脾组织中得到mRNA,利用RT-PCR,得到探针,连接到载体中,测序证实得到序列正确的探针.2.Northern杂交检测MEF1在C2C12细胞系中的表达水平变化.●培养经过BMP2刺激的C2C12细胞.用适量BMP2进行处理.分别在0时段,3小时,12小时,48小时提取细胞RNA.●利用提取的RNA制备Northern杂效用尼龙膜.用[α-<'32>P]dCTP标记的探针DNA与转移膜上的RNA进行杂交分析.结果证明在BMP2的刺激下,C2C12细胞系中MEF1的表达有了升高.总之,利用分子生物学技术和细胞培养技术,对MEF1在成骨细胞分化过程中的变化有了一个初步的判定.为将来进一步研究MEF1在成骨细胞分化过程中的实际作用研究打下了基础.

目录

前言

实验材料与方法

第一部分 构建MEF1探针质粒

第二部分 细胞培养及BMP2处理后细胞后mRNA的提取

第三部分 Northern blotting

结果

讨论

小结

参考文献

致谢