跨膜蛋白LRRC19的组织表达分布以及在免疫系统的功能

摘要

背景：LRR蛋白是富含亮氨酸重复序列基序的蛋白，广泛表达于各种生物体中，参与许多生理过程并发挥重要的作用。在免疫系统中，TLRs是研究最为清楚的一类LRR蛋白，人和小鼠中目前已经发现了13种TLRs，它们主要表达在各种髓系起源的固有免疫细胞以及肠道、呼吸道等相关组织的粘膜上皮。在这些部位，它们分别识别不同的PAMPs，发挥固有免疫介导的抗病原体的免疫应答反应，同时它们还可以激活获得性免疫，进而发挥更有效的免疫应答反应。
　　 目的：LRRC19是实验室鉴定的一个新跨膜蛋白，此课题目的是确定LRRC19在不同组织中的表达分布，以及初步探讨其在免疫系统的功能。
　　 方法：利用半定量PCR和原位杂交来确定LRRC19的组织表达分布；通过生物信息学分析小鼠中所有LRR蛋白，找出与LRRC19进化比较同源的已知功能的蛋白；通过尿道逆行感染模型研究正常条件下表达的LRRC19在肾脏的功能；利用流式分析确定LRRC19对免疫细胞群分化发育等的影响；ELISA检测细胞因子确定LRRC19对髓系细胞在PAMPs的刺激情况下释放细胞因子的影响；体外刺激脾细胞、流式分选不同细胞群，调查炎症条件下特异表达LRRC19的细胞群。
　　 结果：通过半定量PCR和原位杂交发现LRRC19主要表达在肾小管上皮细胞和肠粘膜；生物信息学分析显示LRRC19和TLRs在进化上比较同源；尿道感染模型证实LRRC19在肾脏具有抗感染的功能，能够调控炎症因子以及趋化因子的释放进而影响炎症细胞的侵润；通过ELISA检测细胞因子发现LRRC19的敲除对髓系细胞释放的细胞因子有很明显的影响，最后利用体外刺激脾细胞，发现LRRC19在免疫系统是一个诱导表达的基因，经流式分选最终确定炎症条件下LRRC19能在CD11b+的细胞群表达。