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第一章 前言
第一节 核磁共振技术简介
1.1.1 核磁共振基本原理
1.1.2 化学位移
第二节 顺磁核磁共振技术及应用简介
1.2.1 顺磁结构限制性约束条件
1.2.2 顺磁核磁共振应用简介
第二章 巯基-碳碳双键反应动力学研究及其在蛋白质顺磁标记中的应用
第一节 引言
2.1.1 蛋白质化学修饰中的类迈克尔加成反应
2.1.2 蛋白质顺磁标记常用方法简介
2.1.3 研究目的和内容
第二节 实验试剂和实验方法
2.2.1 实验试剂
2.2.2 探针合成
2.2.3 L1-L4和L-cysteine反应动力学数据采集
2.2.4 15N标记蛋白质样品的表达和纯化
2.2.5 蛋白质的共价链接
2.2.6 核磁数据采集
第三节 实验结果和讨论
2.3.1 L1和L-cysteine反应动力学
2.3.2 L2和L-cysteine反应动力学
2.3.3 二级反应速率常数(k2obs)和pH值的关系
2.3.4 L3和L4与L-cysteine反应动力学
2.3.5 动力学数据在蛋白质顺磁标记中的应用
第四节 本章小结
第三章 利用顺磁核磁共振研究HEWL和[Ln(DPA)3]3-在水溶液中的多位点结合行为及蛋白质主链和侧链在分子作用过程中的柔性比较
第一节 引言
3.1.1 蛋白质-配体相互作用的表征手段
3.1.2 研究蛋白质-配体相互作用常用的NMR技术
3.1.3 研究目的和内容
第二节 实验试剂和实验方法
3.2.1 实验试剂
3.2.2 配合物[Ln(DPA)3]3-的制备
3.2.3 蛋白质NMR样品的制备
3.2.4 核磁谱图采集
3.2.5△χ 张量的拟合
第三节 实验结果和讨论
3.3.1 使用PRE效应判断[Ln(DPA3)]3-和HEWL的作用位点
3.3.2 [Ln(DPA3)]3-和HEWL的解离常数Kd
3.3.3 贋接触位移(PCS)的测定
3.3.4 △χ张量的拟合及HEWL主链和侧链的柔性比较
第四节 本章小结
第四章 总结与展望
参考文献
致谢
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果