声明
摘要
第1章 绪论
1．1 肿瘤的危害
1．2 肿瘤病因研究概况
1．3 肿瘤中医病机研究概况
1．4 肿瘤中药治法研究概况
1．4．1 扶正培本法
1．4．2 清热解毒法
1．4．3 软坚散结法
1．4．4 理气开郁法
1．4．5 活血化瘀法
1．4．6 以毒攻毒法
1．5 细胞凋亡研究进展
1．5．1．凋亡基因的研究进展
1．5．2 中药诱导肿瘤细胞凋亡相关研究
1．6 峨参研究概况
1．6．1 峨参化学成分研究概况
1．6．2 峨参药理作用研究概况
1．7 前期研究成果
1．7．1 峨参化学成分研究
1．7．2 峨参提取物体外抗肿瘤活性研究
1．7．3 峨参内酯急性毒性研究
1．7．4 峨参内酯体内抗肿瘤活性研究
1．8 课题研究背景
1．8．1 课题来源
1．8．2 课题的研究意义
1．8．2 研究技术路线
第2章 峨参内酯衍生物体外抗肿瘤活性研究
2．1 4’-去甲峨参内酯的合成
2．2 4’-去甲基-4’-氧-环丁甲酰基去氧鬼臼毒素的合成
2．3 实验材料及仪器
2．3．1 实验材料
2．3．2 主要仪器及试剂
2．4 主要培养液及试剂配制方法
2．4．1 DMEM血清培养基的配制
2．4．2 PBS磷酸盐缓冲液的配制
2．4．3 0．25％胰蛋白酶溶液的配制
2．4．4 衍生物药液配制
2．4．5 MTT溶液的配制
2．5 峨参内酯衍生物4’-去甲基峨参内酯和4’-去甲基-4’-氧-环丁甲酰基-去氧鬼臼毒素对A549、HepG2、MG-63、HeLa细胞的体外抗肿瘤活性研究
2．5．1 细胞的冻存与复苏
2．5．2 细胞传代
2．5．3 细胞计数
2．5．4 MTT法测定细胞活性
2．5．5 统计学分析
2．6 结果
2．7 小结
第3章 4’-去甲峨参内酯急性毒性研究
3．1 实验材料
3．1．1 实验动物
3．1．2 实验药物
3．1．3 实验仪器
3．2 实验方法
3．2．1 预实验
3．2．2 预实验结果
3．2．3 正式实验
3．3 结果
3．3．1 给药组体重变化
3．3．2 一般症状观察
3．4 讨论
第4章 Western Blot法检测峨参内酯对STAT3、P53、NF-κBP65蛋白的表达的影响
4．1 BCA法测定样品蛋白含量
4．1．1 试验仪器和材料
4．1．2 细胞培养
4．1．3 收集蛋白
4．1．4 蛋白含量测定
4．1．5 BCA蛋白含量
4．2 SDS-PAGE电泳
4．2．1 实验试剂与仪器
4．2．2 灌胶与上样
4．2．3 电泳
4．2．4 转膜
4．2．5 免疫反应
4．2．6 化学发光及显影、定影
4．3 结果
4．3．1 峨参内酯对STAT3表达的影响
4．3．2 峨参内酯对P53表达的影响
4．3．3 峨参内酯对NF-κBP65表达的影响
4．4 小结
结论
致谢
附录：Western Blot相关试剂配制方法及贮存
参考文献
攻读硕士学位期间发表的论文及科研成果
