荧光定量PCR检测DPV弱毒免疫鸭消化道和呼吸道大肠杆菌、葡萄球菌、乳酸杆菌及其数量变化规律的研究

摘要

对大肠杆菌属、葡萄球菌属、乳酸杆菌属的实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测方法进行研究，并对经DPV弱毒免疫的樱桃谷鸭消化道(食道全段、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、直肠)和呼吸道内这三种菌群进行定量研究，获如下结果： 1.建立了大肠杆菌属、葡萄球菌属和乳酸杆菌属的FQ-PCR方法，其灵敏度分别达到23.4cells/μL、2.24cells/μL和6.98cells/μL，具有良好特异性，可对鸭消化道和呼吸道内大肠杆菌、葡萄球菌和乳酸杆菌进行定量检测。 2.DPV弱毒口服免疫鸭及其同居鸭消化道和呼吸道内菌群变化 (1)大肠杆菌属菌群在食道和气管含量(logcop/整段)范围分别为＜6.31～11.09和7.58～＞11.31，肠道内容物含量(logcop/g)范围＜6.31～10.83，与对照鸭相比，波动性变化显著，总体含量上升，随着肠段的后延大肠杆菌属菌群量有上升趋势。 (2)葡萄球菌属菌群在食道和气管内含量(logcop/整段)范围分别为0.00～11.01和0.00～11.28，肠道内容物含量(logcop/g)范围0.00～11.16，与对照鸭无明显差异。 (3)乳酸杆菌在食道和气管内含量(logcop/整段)范围分别为0.00～11.09和0.00～11.09，肠道内容物含量(logcop/g)范围0.00～10.61，与对照鸭无明显差异，随日龄的增长回肠、盲肠、直肠的菌群含量都有明显上升的趋势，与对照鸭的变化趋势相反。 3.DPV弱毒滴鼻免疫鸭及其同居鸭消化道和呼吸道内菌群变化 (1)大肠杆菌属菌群在食道和气管内含量(logcop/整段)范围分别为8.24～11.00和8.72～11.12，肠道内容物含量(logcop/g)范围＜6.31～10.83，与对照鸭检测量相比，菌群含量升高，波动性变化显著。 (2)葡萄球菌属菌群在食道和气管内含量(logcop/整段)范围分别为0.00～11.94和0.00～11.82，肠道内容物含量(logcop/g)范围0.00～11.16，与对照鸭检测量相比，波动性变化幅度大，滴鼻鸭气管的菌群检出率明显高于对照鸭，回肠、盲肠、直肠的检出率也有所升高，同居鸭食道、直肠检出量明显高于对照鸭。 (3)乳酸杆菌在食道和气管内含量(logcop/整段)范围分别为0.00～＞11.39和0.00～10.80，肠道内容物含量(logcop/g)范围0.00～10.39，与对照鸭检测量相比，波动性变化显著，滴鼻鸭随日龄食道、回肠含量有上升的趋势，与对照鸭的变化趋势相反。 4.DPV弱毒皮下注射免疫鸭及其同居鸭消化道和呼吸道内菌群变化 (1)鸭大肠杆菌属菌群在食道和气管内含量(logcop/整段)范围分别为＜6.31～11.31和6.77～11.03，肠道内容物含量(logcop/g)范围＜6.31～10.71。含量比对照鸭量高，波动性变化显著。 (2)葡萄球菌属菌群在食道和气管内含量(logcop/整段)范围分别为0.00～11.94和0.00～11.94，肠道内容物含量(logcop/g)范围0.00～11.16。 (3)乳杆菌菌群在食道和气管内含量(logcop/整段)范围分别为0.00～10.48和0.00～11.09，肠道内容物含量(logcop/g)范围0.00～11.16，与对照鸭差异不显著。

目录

论文独创性声明及关于论文使用授权的声明

前言

1材料与方法

2结果

3讨论

4结论

参考文献

致谢

攻读学位期间发表的学术论文目录