犬细小病毒四川株的分离鉴定与VP2结构蛋白基因变异性研究

摘要

本文采用F81细胞从四川地区送检的5份肠炎犬病料中分离出2株细小病毒，经形态学、理化学、生物学和分子病毒学等鉴定，结果这2株病毒均能在F81细胞上生长，产生细胞肿胀、变圆、破碎、脱落等细胞病变；病毒粒子呈立体对称，直径为20-24nm，无囊膜，抗氯仿，耐酸，耐热，能被5-IUDR抑制，可凝集猪、马、猫的红细胞，不能凝集人、鸡、豚鼠、兔的红细胞，HA试验能被抗CPV的特异性抗体所抑制，用犬细小病毒(CPV)特异性引物对2株病毒进行PCR扩增，能够扩增出CPV特异性片段，并且所分离病毒能够感染犬。鉴定结果证明这2株病毒均为CPV，CPV在我国四川地区犬群中仍广泛存在。 对所分离的2株CPV进行基因型分析。采用PCR 方法扩增了2株犬细小病毒(CPV)VP2全基因和部份基因片段，通过序列测定和DNAStar软件分析，结果我国四川地区的CPV分离株也存在基因变异现象，发现在CPV-2a、CPV-2b基础上进一步进化产生的新的变异株。但其确切的生物学意义尚不清楚。我国四川地区的CPV与所报道国外参考毒株的核酸的同源性超过96％，没有形成明显的中国CPV分支，进化方式与文献报道的进化方式一致。该研究是首次从分子水平上，针对我国西部地区犬细小病毒的变异情况进行调查，初步了解了我国四川地区CPV的进化及其流行状况，为有效的防制CPV提供了实验数据。 通过对四川地区CPV分离株的变异研究发现，CPV进化和变异的趋势与国外基本一致。通过基因进化树的分析表明，国内外的CPV起源于共同的祖先。

目录

论文说明：英文缩略词表

声明

前言

文献综述：犬细小病毒研究进展

第二章试验内容

实验一、四川地区犬细小病毒分离与鉴定

1材料与方法

2结果

3.讨论

4小结

实验二 犬细小病毒VP2基因的克隆、测序

1材料与方法

2结果

3.讨论

4小结

参考文献

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致谢

附录