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高铜致雏鸡脑组织氧化损伤的机理研究

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1文献综述

1.1研究概况

1.2 实验目的

2材料与方法

2.1试验材料

2.1.1试验动物

2.1.2试验日粮

2.1.3主要试剂和仪器

2.2试验方法

2.2.1动物分组与饲养管理

2.2.2临床观察

2.2.3病理学观察

2.2.4脑铜、血铜含量检测

2.2.5脑组织抗氧化指标的测定

2.2.6血液生化指标的测定

2.2.7脑细胞凋亡检测

2.2.8脑组织凋亡基因bax和bcl-2的蛋白表达检测

2.2.9数据处理

3结果

3.1临床观察

3.2病理形态学变化

3.2.1剖检变化

3.2.2病理组织学变化

3.2.3超微病理学变化

3.3脑铜和血铜含量变化

3.4脑组织抗氧化指标变化

3.4.1脑组织胆碱酯酶活性变化

3.4.2脑组织单胺氧化酶活性变化

3.4.3脑组织过氧化氢酶活性变化

3.4.4脑组织铜锌超氧化物岐化酶(CuZn-SOD)活性变化

3.4.5脑组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性变化

3.4.6脑组织羟自由基活性变化

3.4.7脑组织一氧化氮合酶(NOS)活性变化

3.4.8脑组织一氧化氮(NO)含量变化

3.4.9脑组织丙二醛(MDA)含量变化

3.5血清酶活性及血液生化指标的变化

3.6脑组织凋亡变化

3.6.1脑组织细胞凋亡比例变化

3.6.2脑组织凋亡蛋白Bax和Bcl-2表达阳性率

4讨论

4.1高铜日粮下雏鸡的生长及发病观察

4.2高铜对雏鸡脑铜和血铜含量的影响

4.3高铜对雏鸡脑组织抗氧化功能的影响

4.4高铜对雏鸡脑组织凋亡的影响及其机理

5结论

参考文献

附图及说明

致谢

在读期间发表论文情况

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摘要

本文选用一日龄艾维菌肉鸡360只,随机分成6组,分别喂以对照日粮(cul0.89mg/kg)和高铜日粮(Cu100mg/kgⅠ组,Cu200mg/kgⅡ组,Cu400mg/kgⅢ组,Cu600mg/kgⅣ组,Cu800mg/kgⅤV组)六周,以流式细胞术和生化检测的方法研究日粮铜添加水平对雏鸡脑组织氧化损伤机理。高铜Ⅰ组、Ⅱ组雏鸡生长速度高于对照组(p>0.05);Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅴ组生长发育受阻(p>0.05或p<0.01),第三周时出现临床症状,高铜Ⅴ组出现死亡。与对照组比较,高铜Ⅴ组超微病理观察脑神经元细胞线粒体肿胀和神经髓鞘空泡状,小脑见凋亡的神经元细胞。高铜Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅴ组的血清铜含量和脑铜含量极显著高于对照组(p<0.01)。高铜Ⅰ组、Ⅱ组脑组织Cu-Zn-SOD和GSH-Px显著高于对照组(p<0.05或p<0.05),高铜Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅴ组Cu-Zn-SOD和GSH-Px较对照组显著降低;高铜Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅴ组脑组织MDA、NO、NOS、羟自由基和单胺氧化酶(MAO)活性显著高于对照组(p<0.01);高铜Ⅲ组、Ⅳ、Ⅴ组脑组织CAT和胆碱酯酶(CHE)活性较对照组显著降低(p<0.01)。高铜Ⅰ、Ⅱ组血清铜蓝蛋白(CP)、铜锌超氧化物岐化酶(Cu-Zn-SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性显著高于对照组(p<0.05),高铜Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅴ组CP、Cu-Zn-AOD和GSH-Px活性较对照组显著显著降低(p<0.01);高铜Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅴ组的血清丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)较对照组显著升高(p<0.01),高铜Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅴ组的血清过氧化氢酶(CAT)的活性较对照组显著降低(p<0.01)。高铜Ⅲ组、Ⅳ、Ⅴ组脑组织细胞凋亡百分数较对照组显著升高(p<0.01),高铜Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组脑组织Bax的阳性表达率都显著高于对照组(p<0.01),脑组织Bcl-2的阳性率表达率仅高铜Ⅳ组和Ⅴ组与对照组差异显著(p<0.05或p<0.01)。结果表明,日粮铜含量达400mg/kg以上时,脑组织抗氧化功能下降,氧化能力受损,脑细胞凋亡增加。

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