马铃薯茎尖脱毒、愈伤组织诱导及分化技术优化研究

摘要

马铃薯是无性繁殖作物，在连年的栽培过程中，由于病毒或类病毒的浸染，导致马铃薯质量退化并逐年减产，通过茎尖分生组织培养可获得脱毒快繁的试管苗，从而生产优质脱毒原原种是解决这个问题的根本手段。本实验首先以不同马铃薯品种（系）为供试材料进行茎尖脱毒技术体系优化研究，拟达到提高脱毒率和快繁率的目的。马铃薯愈伤组织诱导及分化是进行马铃薯组织培养研究的基础，其体系的建立，可为进一步深入到细胞水平、分子水平的研究及创新种质资源奠定基础。本研究对不同马铃薯品种的叶片和茎段进行愈伤组织诱导及分化研究，拟达到建立和优化愈伤组织诱导及分化体系的目的。主要结果如下： ⑴采用热处理茎尖脱毒技术比常规茎尖脱毒技术明显提高了茎尖成活率、成苗率及脱毒率，平均提高了7．2％、25％和23．9％，且对不同的品种成活率、成苗率及脱毒率的影响表现出基因型差异，成活率以米拉最高，为82．5％，成苗率及脱毒率最高的是荷兰15号，分别为70．0％和61．9％。 ⑵来源于试管苗的茎尖优于来源于田间幼苗的茎尖，其成活率、成苗率和脱毒率分别提高20．0％、27．5％和50．5％。 ⑶对11个品种的常规茎尖脱毒比较实验结果表明：品种间茎尖成活率、成苗率和脱毒率表现出明显的基因型差异。筛选到成活率、成苗率和脱毒率最高的品种分别是米拉、克新15号和大西洋。 ⑷筛选到三个生产主推品种茎尖脱毒成苗率高的培养基配方。品种中农Ⅷ-2和米拉：MS+0．05 mg/LNAA+0．2 mg/L6-BA+0．3 mg/LGA3；品种坝薯10号：MS+0．05mg/L NAA+0．2 mg/L6-BA+0．1 mg/LGA3。 ⑸筛选到4个优良品种（系）的叶片愈伤组织诱导最佳培养基配方。品种川芋5号：MS+1．5 mg/L6-BA+0．1 mg/LNAA+0．2 mg/L2，4-D；品种川芋早：MS+2．5 mg/L6-BA+0．2 mg/LNAA+0．2 mg/L2，4-D；品种凉薯97：MS+0．5 mg/L6-BA+0．4 mg/LNAA+0．2 mg/L2，4-D；品系22-2：MS+1．5 mg/L6-BA+0．4 mg/LNAA+1．0 mg/L2，4-D。筛选到2个优良品种的茎段愈伤组织诱导最佳培养基配方。品种川芋5号：MS+1．5 mg/L6-BA+0．2 mg/L NAA；品种川芋早：M S+1．5 mg/L6-BA+0．1 mg/LNAA+0．2 mg/L2，4-D。 ⑹对愈伤组织根芽分化的研究表明：川芋5号、川芋早、凉薯97号和22-2的叶片愈伤组织均在不同程度上有根分化，且有根分化的愈伤组织无芽分化。川芋5号和川芋早叶片愈伤组织有少量芽的分化，最大分化率分别为14．6％和18．7％，22-2和凉薯97无芽分化现象。川芋早茎段愈伤组织最大根分化率为31．3％，无芽的分化：川芋5号茎段愈伤组织根分化少且分化率较低，最大值只有6．3％，仅在4、6号培养基中有芽的分化。 ⑺在诱导培养基中添加0．01 mg/L PP333（多效唑）可使叶片和茎段形成较优质的愈伤组织，且在茎段愈伤组织上成功诱导出芽和根的分化，其分化率最高分别为22．8％和14．8％；对叶片诱导愈伤组织而言，各PP333浓度处理均无芽的分化，而随浓度的增加，根的分化也逐渐受到抑制。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩写词及其英汉对照全称

声明

1 前言

2 文献综述

2.1 马铃薯茎尖脱毒技术研究进展

2.1.1 影响茎尖成活的因素

2.1.2 影响病毒去除效率的因素

2.2 马铃薯愈伤组织诱导及分化的研究进展

2.2.1 基因型对愈伤诱导及分化的影响

2.2.2 外植体对愈伤诱导及分化的影响

2.2.3 培养基激素种类及配比对愈伤诱导及分化的影响

2.3 PP333对愈伤组织诱导及分化的影响

3 实验材料和方法

3.1 马铃薯茎尖脱毒培养技术优化研究

3.1.1 供试材料

3.1.2 方法

3.2 马铃薯脱毒试管苗愈伤组织诱导及分化研究

3.2.1 供试材料

3.2.2 方法

4 结果与分析

4.1 马铃薯茎尖脱毒培养技术研究

4.1.1 热处理对茎尖成活率、成苗率及脱毒率的影响

4.1.2 不同茎尖来源对成活率、成苗率及脱毒效果的影响

4.1.3 不同品种(系)茎尖成活率、成苗率及脱毒效果的差异比较

4.1.4 不同激素配比对茎尖分化成苗的影响

4.2 马铃薯脱毒试管苗愈伤组织诱导及分化效应研究

4.2.1 不同激素配比对叶片愈伤组织诱导的影响

4.2.2 不同激素配比对茎段愈伤组织诱导的影响

4.2.3 根芽分化

4.2.4 PP333 对愈伤组织诱导及分化的影响

5 结论与讨论

5.1 热处理和不同茎尖来源对茎尖分化成苗的影响

5.2 不同品种(系)和激素配比对茎尖分化成苗的影响

5.3 激素配比对不同品种(系)愈伤组织诱导及根芽分化的影响

5.4 PP333 对愈伤组织诱导及分化的影响

6小结

7 下一步需要解决的问题

参考文献

附录：版图

致谢

研究生期间发表的论文