西杂牛PPARγ2、PGC-1α、MEF2C基因表达量及其与肌内脂肪含量、嫩度的相关分析

摘要

肌内脂肪含量影响肌肉嫩度、多汁性、风味以及外观形态等，肌纤维类型和脂肪含量与肌肉的嫩度相关。PPARy2、PGC-lα和MEF2C基因影响肌内脂肪含量和肌纤维类型，进而影响牛肉品质。
　　 本研究以不同发育阶段的西杂牛为试验材料，测定了6月龄、12月龄、24月龄和36月龄阶段牛的背最长肌的肌内脂肪含量和剪切力，采用荧光定量PCR方法研究了PPARγ2、PGC-lα和MEF2C基因的表达趋势，并分析了3个基因的表达水平、肌内脂肪含量和剪切力相互间的相关性，主要结果如下：
　　 随着年龄的增加，西杂牛背最长肌的肌内脂肪含量和剪切力都逐渐增加，肌内脂肪含量与剪切力呈负相关，除6月龄外，其他年龄阶段相关显著（P＜0.05）。
　　 PGC-lα广泛分布于腹部脂肪、肾、背部脂肪、心脏、肝、脾、比目鱼肌、腓肠肌、背最长肌和半腱肌中，在不同年龄段和不同组织中的表达趋势不同。PPARγ2在各年龄段的不同脂肪中的相对表达量都极显著(P＜0.01)高于不同类型肌肉：在四种肌肉、两种脂肪中表达模式均是随着年龄的增加呈持续上升的趋势，36月龄时表达量急剧上升。MEF2C在四种肌肉表达量低。
　　 相关分析表明：PGC-1α、PPARγ2和MEF2C基因的表达量与6月龄、12月龄、24月龄和36月龄的背最长肌的肌内脂肪含量和剪切力的相关性均不显著(P＞0.05)。

目录

文摘

英文文摘

1 文献综述

1.1 脂肪、肌内脂肪含量、嫩度及其与牛肉品质的关系

1.1.1 脂肪细胞的发育调控

1.1.2 肌内脂肪

1.1.3 嫩度

1.1.3 肌内脂肪含量、嫩度及其与牛肉品质的相互关系

1.2 过氧化物酶体增殖物激活受体γ2（PPARy2）

1.2.1 核受体

1.2.2 过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARs)

1.2.3 PPARy

1.3 过氧化物酶体增殖受体γ辅激活因子lα(PGC-lα)

1.3.1 PGC-lα的概念

1.3.2 PGC-lα的分布

1.3.3 PGC-lα的结构

1.3.4 PGC-lα与线粒体增生

1.3.5 PGC-lα与糖代谢调控

1.3.6 PGC-lα与脂肪酸氧化调控

1.3.7 PGC-lα与脂肪细胞分化

1.3.8 PGC-lα与肌纤维类型的转化调控

1.4 肌细胞增强子2C(MEF2C)

1.4.1 MEF2的结构和组织分布

1.4.2 MEF2的功能与肌肉发生

1.4.3 MEF2的靶基因

1.4.4 MEF2C

1.5 本研究的目的意义和内容

2 材料与方半

2.1 试验材料

2.1.1 试验材料的采集

2.1.2 试验仪器设备

2.1.3 试验主要试剂及配制

2.1.4 常规试验用品及耗材

2.2 试验方法

2.2.1 嫩度测定

2.2.2 肌内脂肪含量测定

2.2.3 组织中总RNA的提取及纯化

2.2.4 RNA反转录

2.2.5 引物设计与合成稀释

2.2.6 定量PCR

2.3 数据分析

2.4 技术路线

3 结果与分析

3.1 RNA提取效果检测及荧光定量标准曲线的建立

3.1.1 RNA提取效果检测

3.2.2 荧光定量标准曲线的建立

3.2 PGC-lα、PPARy2、MEF2C基因的表达量变化趋势

3.2.1 PGC-lα基因的表达量变化

3.2.2 PPARy2的表达量变化

3.2.3 MEF2C的表达量变化

3.3 不同月龄背最长肌肌内脂肪含量、嫩度的变化及相关性

3.3.1 肌内脂肪含量的变化

3.3.2 嫩度的变化规律

3.3.3 肌内脂肪含量与嫩度的相关性分析

3.4 PGC-lα、PPARy2、MEF2C表达量与肌内脂肪含量、嫩度的相关性

3.4.1 PGC-lα表达量与肌内脂肪含量、嫩度的相关性

3.4.2 PPARy2的表达量变化与肌内脂肪含量和嫩度的相关性分析

3.4.3 MEF2C的相对表达量与嫩度的相关性分析

4 讨论

4.1 肌内脂肪含量和嫩度的变化规律及相关性

4.1.1 肌内脂肪含量的变化规律

4.1.2 嫩度的变化规律

4.1.3 肌内脂肪含量和嫩度的相关性

4.2 RNA抽提和定量PCR

4.3 PGC-lα基因的表达趋势及其与肌内脂肪含量、嫩度相关性

4.3.1 PGC-lα基因在不同组织中的差异表达趋势

4.3.2 PGC-lα基因表达量在肌肉中的发育性变化

4.3.3 PGC-lα基因表达量在脂肪中的发育性变化

4.3.4 PGC-lα基因的表达变化与肌内脂肪含量、嫩度的相关性

4.4 PPARy2基因的表达趋势及其与肌内脂肪含量、嫩度相关性

4.4.1 PPARy2基因在肌肉脂肪组织中的差异表达趋势

4.4.2 PPARy2基因表达量在肌肉中的发育性变化

4.4.3 PPARy2基因表达量在脂肪中的发育性交化

4.4.4 PPARy2基因的表达变化与肌内脂肪含量、嫩度的相关性

4.5 MEF2C基因的表达趋势及其与嫩度的相关性

5 结论

参考文献

致谢

攻读硕士期间发表的论文