布氏白僵菌高原优良菌株筛选与应用研究

摘要

本文对从野外获得的5株菌株进行了生物学特性比较，从设计组合中筛选出最优良菌株及最佳平板培养基。以最优良菌株为实验菌株进行寄主范围测定，并进行了液体种予发酵及固体发酵培养基配方和培养条件的初步筛选。试验结果如下：
　　 1.以野外获得的5株布氏白僵菌菌株为试验材料，通过对菌株生长量、产孢量、在不同温湿度下孢子萌发能力、抗紫外线能力等的测定结果，对它们在多种生长条件下的性状进行了比较，筛选出最优良的菌株Bbr05以及最适宜菌株生长的平板培养基配方：马铃薯200g，葡萄糖20g，蛋白胨10g，琼脂20g。5株菌株均采自高海拔地区，表现出和低海拔地区分离菌株的不同特性，能适应低温、干旱等更恶劣的自然环境。
　　 2.通过对原生寄主蛴螬及同翅目、鳞翅目、鞘翅目的其他4种昆虫的杀虫效果比较发现，高原布氏白僵菌对鞘翅目、鳞翅目、同翅目昆虫均有效果。布氏白僵菌具有寄主专化性的特点，Bbr05菌株对大栗鳃金龟蒙古亚种幼虫的侵染率达到94.4％。对其他各目昆虫的防治效果表现为：甘蓝蚜＞菜青虫＞松褐天牛幼虫＞黄粉虫幼虫。
　　 3.以产孢量为指标，研究不同液体培养基对布氏白僵菌生长的影响。结果显示：在试验的三组培养基配方中，配方组二处理2及配方组三处理5为较适宜的液体培养基，其中处理2培养基最为经济适用，处理5最适宜布氏白僵菌菌株Bbr05生长。其组成为：5％麸皮浸出液，2％蔗糖，0.4％的黄粉虫幼虫组织液，0.05％KH2PO4，0.02％MgSO4，最大产孢量为：25.17×108个/ml。通过对同种培养基不同时间产孢量的比较，得到培养72h是最佳培养时间。试验结果表明：不同基质对布氏白僵菌产孢量影响显著，营养成分复杂的基质更利于布氏白僵菌孢子的产生，加入适当的动物性蛋白，能明显提高液体发酵的产孢量。试验首次采用黄粉虫蛹粉及幼虫组织液作氮源，获得了很高的孢子产量，对以动物蛋白作为氮源的培养基开发，有较好的参考价值。
　　 4.从4种固体培养基质中筛选出相对较优布氏白僵菌固态发酵培养基配方：70％棉籽壳，25％麦麸，5％玉米粉。最大产孢量为：40×108个/ml。产孢量大于9.8×108个/ml优化组合方案为：培养温度20.2-21.8℃，培养基厚度2.9-3.47cm，液体菌种接种量14.5-15.5％。棉籽壳良好的保水性能满足布氏白僵菌发酵过程中菌丝生长需要的水分，同时保证了发酵过程中的通气性要求。

目录

文摘

英文文摘

前言

1 文献综述

1.1 白僵菌的分类

1.2 布氏白僵菌的生物学特性及致病性研究

1.2.1 白僵菌的形态特征

1.2.2 白僵菌生长发育的营养要求

1.2.3 白僵菌生长发育的环境要求

1.2.4 白僵菌的致病性研究

1.3 布氏白僵菌的生产及应用研究

1.3.1 布氏白僵菌的生产

1.3.2 布氏白僵菌的应用研究

2 选题意义和目的

3 材料方法

3.1 试验材料

3.1.1 供试菌株

3.1.2 供试昆虫

3.1.3 培养基来源

3.2 仪器与主要试剂

3.2.1 器具与主要仪器

3.2.2 主要试剂

3.3 试验技术路线

3.4 试验方法

3.4.1 病原菌的分离纯化

3.4.2 优良菌株及平板培养基筛选

3.4.3 寄主范围测定

3.4.4 发酵培养

3.5 数据处理方法

4 结果与分析

4.1 优良菌株及一级培养条件筛选试验

4.1.1 5菌株的菌落生长形态

4.1.2 不同菌株在不同培养基上的平均生长速度、产孢量比较

4.1.3 不同温度、湿度下的孢子萌发率

4.1.4 不同菌株的抗紫外线能力比较

4.2 室内寄主范围测定试验

4.2.1 Bbr05菌株对金龟子幼虫的室内毒力测定

4.2.2 Bbr05菌株对菜青虫、蚜虫的杀虫作用

4.2.3 Bbr05菌株对黄粉虫幼虫的杀虫作用

4.2.4 Bbr05菌株对松褐天牛幼虫的杀虫作用

4.3 二级液体培养基及培养时间的筛选

4.3.1 液体种子培养基配方的初步筛选

4.3.2 液体种子培养基配方筛选二

4.3.3 液体种子培养基配方筛选三

4.4 固体发酵培养基及培养条件筛选

4.4.1 固体发酵培养基筛选

4.4.2 固体发酵培养条件筛选

5 结论与讨论

5.1 布氏白僵菌优良菌株及一级培养条件筛选

5.2 高原布氏白僵菌室内寄主范围的测定

5.3 二级液体种子培养基及培养时间筛选

5.4 固体发酵培养基及培养条件筛选

5.5 试验的创新新性与存在的不足

参考文献

附图

致谢