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黄果柑炭疽病病原菌的鉴定及其防治研究

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摘要

前言

1 文献综述

1.1 柑橘炭疽病的病状

1.1.1 叶片

1.1.2 枝梢

1.1.3 成熟果实

1.1.4 花、果梗

1.2 研究现状

2 研究的目的与意义

3 材料与方法

3.1 材料

3.1.1 病原菌

3.1.2 供试果实

3.1.3 供试培养基

3.1.4 供试药剂

3.2 试验方法

3.2.1 病害症状的观察及发病率调查

3.2.2 病原菌的分离、鉴定及致病性测定

3.2.3 病原菌生物学特性测定

3.2.4 室内毒力测定

3.2.5 田间防治

4 结果与分析

4.1 病害症状观察发及病率调查

4.1.1 病害症状观察

4.1.2 发病率调查

4.2 病原菌的分离及鉴定

4.2.1 病原菌的分离、纯化

4.2.2 致病性测定

4.2.2 病原菌的形态学鉴定

4.2.3 病原菌的分子鉴定

4.3 生物学特性研究

4.3.1 培养基对菌落生长及产孢量的影响

4.3.2 pH值对菌落生长、产孢量及孢子萌发的影响

4.3.3 不同氮源对菌落生长、产孢量及孢子萌发的影响

4.3.4 不同碳源对菌落生长、产孢量及孢子萌发的影响

4.3.5 温度对菌落生长的影响

4.3.6 光照对菌落生长的影响

4.3.7 病原菌的致死温度测定

4.4 不同药剂对黄果柑炭疽病菌的抑菌效果

4.5 田间防治

5 讨论

5.1 病原菌的分离及鉴定

5.2 病原菌的生物学特性

5.3 室内药剂毒力测定

5.4 田间防治

6 小结

参考文献

致谢

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摘要

本研究以黄果柑(Citrus cultivar cv.Huangguogan)为试验材料,分离获得42株黄果柑炭疽病病原菌。选取其中8株作为代表菌株进行致病性测定,通过形态学及分子鉴定,初步确定了引起黄果柑果实表皮病害的病原菌为胶胞炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)。以G-6为研究对象,测定其生物学特性、室内药剂毒力,并通过田间防治研究,为黄果柑该种病害的鉴定及其防治提供了一定的参考价值。主要研究结果如下:
  1病原菌的分离、鉴定及致病性测定
  以选取的8株病原菌菌株为代表,进行致病性测定,结果显示:接种的8株病原菌株均有病斑产生,并结合病原菌的形态特征和rDNA-ITS序列分析,确定引起黄果柑炭疽病的病原菌为胶孢炭疽菌(C.gloeosporioides)。
  2病原菌的生物学特性
  病原菌生长最适温度为25~30℃,全光照条件最有利于菌丝的生长,菌丝致死温度为58℃处理10min。病原菌菌丝在马铃薯培养基(PDA)上生长最快,日均生长速率达到12.1mm/d,培养基表面产生橘红色的分生孢子堆,产孢量为2.23×107 spores·mL-1。pH值对于菌丝生长影响不明显,在pH5-pH11范围内均能正常生长并产生分生孢子。7种不同的碳源对于病原菌有显著的影响,其中以葡萄糖、淀粉、乳糖为碳源的培养基中生长最佳,菌丝生长速率分别为:10.22mm/d、9.91 mm/d、9.85 mm/d。7种不同氮源中以蛋白胨为氮源培养基菌丝生长最快,其次为硝酸钠为氮源的培养基,菌丝生长速率分别为:13.38 mm/d、12.60 mm/d。不同碳源中产孢量以葡萄糖、甘油最好,产孢量分别达到2.50×105 spores·mL-1、2.17×105 spores·mL-1,不同氮源中产孢量以蛋白胨、牛肉膏最好,产孢量分别达到1.19×108 spores·mL-l、4.83×107 spores·mL-1。对于孢子萌发率,以葡萄糖、蔗糖为碳源的培养基中孢子萌发率最好。而不同氮源中孢子萌发率均小于清水对照,表明不同氮源对于孢子萌发率均有抑制作用。
  3药剂室内毒力测定
  供试的7种杀菌剂中,60%唑醚·代森联(WG)对病原菌菌丝有较好的抑制作用,同样10%苯醚甲环唑(WG)对病原菌的抑制作用比较强,EC50值分别为17.95μg/mL和68.74μg/mL,其次是25%吡唑醚菌酯(EC),EC50值为186.24μg/mL。
  4田间防治
  以20%凯润(EC)2000倍液对于黄果柑炭疽病的防治效果最好,防治效果达到了72%,其次为60%百泰(WG)1500倍液、10%世高(WG)2000倍液和10%苯醚甲环唑(WG)1000倍液,防治效果分别为:60%、65.8%、50%。
  从室内毒力测定及田间防治药效的比较得出,室内毒力测定为田间防治提供了一定的理论基础与指导作用,但是与实际田间防治药效之间还存在一定的差异,这与田间自然环境、田间气候等诸多因素有关。因此,药剂选择应以田间实际效果为主。

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