母猪妊娠期日粮添加甲基供体或双酚A对后代肠道发育及功能的影响

摘要

母体营养可以通过表观遗传修饰途径例如改变DNA甲基化水平，持续影响后代生长发育。本试验以能够诱导基因发生DNA低甲基化的双酚A(Bisphenol A，BPA)作为负对照，研究母猪妊娠期日粮添加甲基供体(Methyl donor, MET)对后代肠道发育及功能的影响，并在此基础上考察了甲基供体是否能抵消双酚A对肠道发育及功能的作用。选择体重（221.14±2.57 kg）、胎次(3-5)接近的60头LY母猪，配种后随机分为4组(n=15)，妊娠期各组分别提供日粮如下:1）CON组，基础日粮;2）BPA组，基础日粮+双酚A;3）MET组，基础日粮+甲基供体;4) MET+BPA组，基础日粮+甲基供体+双酚A。试验母猪从妊娠第一天开始供给相应试验日粮，直至分娩。分娩后所有母猪自由采食同一饲粮，28天断奶。分娩时每组选择12头分别来自不同母猪并且接近窝平均体重的仔猪进行屠宰取样;断奶时以同样的选猪原则从每组中选择6头仔猪进行屠宰取样。
　　试验结果如下：
　　1、母猪妊娠期日粮添加甲基供体对新生仔猪平均体重与出生窝重无显著影响，但显著增加了断奶仔猪平均体重及断奶窝重(P＜0.05)。双酚A显著增加了新生仔猪平均体重及出生窝重(P＜0.05），但断奶平均体重及断奶窝重未受到双酚A显著影响。对于活产仔数、新生仔猪平均体重与断奶仔猪平均体重，甲基供体与双酚A有显著的互作效应(P＜0.05）。
　　2、母猪妊娠期日粮添加甲基供体显著降低了新生与断奶仔猪单位体重小肠长度(P＜0.05），但显著增加了单位长度小肠重量(P＜0.05）。双酚A的添加有降低新生仔猪单位体重小肠长度的趋势(P=0.06）。
　　3、母猪妊娠期日粮添加甲基供体显著增加了新生和断奶仔猪空肠与回肠的绒毛高度/隐窝深度(P＜0.05）。双酚A显著降低了新生和断奶仔猪空肠绒毛高度/隐窝深度（P＜0.05）。同时，对于新生仔猪空肠和断奶仔猪回肠绒毛高度/隐窝深度，甲基供体与双酚A有显著的互作效应（P＜0.05）。
　　4、母猪妊娠期日粮添加甲基供体显著增加了新生和断奶仔猪空肠乳糖酶的活性(P＜0.05)，同时显著增加断奶仔猪十二指肠和空肠蔗糖酶活性(P＜0.05），并且显著上调了新生与断奶仔猪空肠乳糖酶的基因表达(P＜0.05）。双酚A显著降低了新生仔猪空肠蔗糖酶活性（P＜0.05），对断奶仔猪空肠蔗糖酶活性有降低的趋势(P=0.07)。对于新生与断奶仔猪空肠乳糖酶活性,甲基供体与双酚A有显著的互作效应(P＜0.05）。
　　5、母猪妊娠期日粮添加甲基供体显著上调了新生与断奶仔猪空肠Pept1和Sglt1基因的相对表达量(P＜0.05）。双酚A显著下调了新生和断奶仔猪空肠Pept1基因的相对表达量(P＜0.05）。同时，与BPA组相比，MET+BPA组新生与断奶仔猪空肠Pept1基因的相对表达量显著增加(P＜0.05）。
　　6、母猪妊娠期日粮添加甲基供体显著增加了新生仔猪空肠Pept1基因启动子的DNA甲基化水平(P＜0.05），双酚A显著降低了新生仔猪空肠Pept1基因启动子的DNA甲基化水平（P＜0.05），MET+BPA组与CON组无显著差异。
　　7、母猪妊娠期日粮添加甲基供体显著增加新生仔猪空肠DNMT1、DNMT3a和MTHFR基因的相对表达量(P＜0.05)。双酚A显著降低了新生仔猪空肠DNMT3a基因的相对表达量(P＜0.05）。所有甲基化相关酶的基因表达在MET+BPA组与CON组均无显著差异。
　　综上所述，母猪妊娠期日粮添加甲基供体能通过改善新生与断奶仔猪肠道形态，上调肠道酶活与营养物质转运载体基因表达进而提高肠道的消化吸收功能促进仔猪的生长发育。相对而言母猪妊娠期日粮添加双酚A损伤了后代肠道发育及功能，但甲基供体能够抵消双酚A对肠道的损伤进而改善后代生长发育。

目录

声明

摘要

本文缩略语表

前言

第一章 文献综述

1 母体营养

1．1 母体营养对后代生长发育的影响

1．2 母体营养对后代生长发育调控的可能途径

2 表观遗传修饰—DNA甲基化

2．1 表观遗传修饰

2．2 DNA甲基化

2．3 甲基供体

2．4 双酚A

3 肠道

3．1 肠道发育

3．2 肠道形态结构

3．3 肠道二糖酶与碱性磷酸酶

3．4 肠道营养物质转运载体

4 甲基供体或双酚A对肠道的影响

第二章 研究目的与意义

1 研究目的

2 研究意义

第三章 试验内容

1 材料与方法

1．1 试验设计

1．2 试验饲粮及组成

1．3 甲基供体与双酚A添加原则

1．4 饲养管理

1．5 样品采集

2 指标测定与方法

2．1 肠道指数

2．2 肠道形态

2．3 肠道酶活

2．4 空肠养分转运载体及甲基化相关酶基因表达

2．5 空肠基因启动子DNA甲基化

3 数据统计分析

4 试验结果

4．1 母猪妊娠期日粮添加甲基供体或双酚A对母猪繁殖性能的影响

4．2 母猪妊娠期日粮添加甲基供体或对双酚A后代肠道指数的影响

4．3 母猪妊娠期日粮添加甲基供体或双酚A对后代肠道形态的影响

4．4 母猪妊娠期日粮添加甲基供体或双酚A对后代肠道消化酶的影响

4．5 母猪妊娠期日粮添加甲基供体或双酚A对后代空肠转运载体基因表达的影响

4．6 母猪妊娠期日粮添加甲基供体或双酚A对新生仔猪空肠基因DNA甲基化的影响

4．7 母猪妊娠期日粮添加甲基供体或双酚A对新生仔猪空肠DNA甲基化相关酶基因表达的影响

5 讨论

5．1 母猪妊娠期日粮添加甲基供体或双酚A对母猪繁殖性能的影响

5．2 母猪妊娠期日粮添加甲基供体或双酚A对后代肠道指数与形态的影响

5．3 母猪妊娠期日粮添加甲基供体或双酚A对后代肠道消化酶的影响

5．4 母猪妊娠期日粮添加甲基供体或双酚A对后代空肠养分转运载体基因的影响

5．5 母猪妊娠期日粮添加甲基供体或双酚A对新生仔猪空肠基因DNA甲基化的影响

5．6 母猪妊娠期日粮添加甲基供体或双酚A对新生仔猪空肠DNA甲基化相关酶基因表达的影响

结论

参考文献

致谢