声明
摘要
缩略语表
综述
1.猪传染性胸膜肺炎疫苗研究进展
1.1 概述
1.2 疫苗研究
2.外膜囊泡递呈异源抗原研究进展
2.1 外膜囊泡研究背景
2.2 外膜囊泡递呈蛋白抗原
2.3 外膜囊泡递呈多糖抗原
研究目的意义
第一章 基因工程重组外膜囊泡的构建及验证
1材料
1.1 实验菌株与质粒
1.2 主要试剂耗材
1.3 主要仪器
2方法
2.1 重组质粒构建的引物设计
2.2 APP基因组DNA和c/yA模板质粒的提取
2.3 c/yA和ga/T片段的扩增
2.5 重组表达质粒向大肠杆菌JC8031的电转化
2.6 重组蛋白在JC8031中的表达鉴定
2.7 重组外膜囊泡的分离与鉴定
3结果
3.1 目的片段的扩增
3.2 重组表达质粒的酶切鉴定
3.3 SDS-PAGE及质谱检测融合蛋白
3.4 Western blotting检测融合蛋白表达
3.5 重组外膜囊泡的分离与鉴定
4分析讨论
4.1 关于外膜囊泡的分离与纯化
4.2 关于外膜囊泡的产量
5小结
第二章 重组外膜囊泡GalT-OMVs的免疫保护效力评价
1材料
1.1 实验菌株与质粒
1.2 主要试剂
1.3 实验仪器与耗材
1.4 实验动物
2方法
2.1 小鼠免疫程序
2.2 血清IgG效价测定
2.3 攻毒保护试验
2.4 脾脏淋巴细胞增殖试验
2.5 细胞因子测定
2.6 组织病理学分析
2.7 免疫组化分析
3结果
3.1 小鼠血清特异性IgG效价测定
3.2 免疫保护结果
3.3 脾脏淋巴细胞增殖
3.4 淋巴细胞培养上清中细胞因子含量
3.5 组织病理学分析结果
3.6 免疫组织化学分析结果
4分析讨论
4.1 关于外膜囊泡的应用
4.2 关于外膜囊泡疫苗的安全性
5小结
结论
参考文献
致谢
作者简历
附录