多穗柯根皮苷的提取工艺优化及抗氧化、降血糖作用研究

摘要

多穗柯又称甜茶。根皮苷是一种从多穗柯中提取出来的活性产物，具有非常广泛的药理活性。本论文深入研究了多穗柯中的天然活性产物，为高效利用多穗柯植物资源提供更多理论依据。本研究分为以下五个部分:
　　1.多穗柯根皮苷的提取工艺研究
　　采用超声波辅助提取法从多穗柯叶中提取根皮苷，通过响应面法优化得到最佳提取条件为:乙醇浓度64％，固液比为1∶37，提取时间为38min，浸泡时间35h，最终根皮苷的得率为3.83％。
　　2.多穗柯根皮苷的分离纯化工艺及抗氧化活性研究
　　通过静态及动态试验考察大孔树脂纯化根皮苷的最佳条件并用三种方法来考察根皮苷的体外抗氧化活性。结果表明，D-101型大孔树脂的最佳分离条件为:上样量180mL，上样浓度2mg/mL，上样速度2BV/h，解吸液用量4BV，解吸液浓度75％乙醇，洗脱速度2BV/h。在此条件下根皮苷纯度由27.62％增加到72.37％。多穗柯根皮苷有良好的还原能力，对羟自由基的IC50为345μg/mL，提示根皮苷具有良好的抗氧化活性。
　　3.SD大鼠高血糖模型的建立及稳定性
　　通过高糖高脂饲料喂养联合腹腔注射不同剂量链脲佐菌素(STZ)的方法诱导SD大鼠，建立高血糖大鼠模型。造模后持续观察28天考察模型稳定性。结果显示，腹腔注射40mg/kg的STZ为建立大鼠高血糖模型的最佳剂量。
　　4.根皮苷对高血糖大鼠的预防作用
　　将SD大鼠分为模型对照组，根皮苷低、中、高剂量组，空白对照组和阳性对照组（人参总皂苷）。连续灌胃相应药物28d后，腹腔注射STZ造模。观察根皮苷对高血糖大鼠的预防作用。结果表明，根皮苷能降低大鼠的血脂、血糖水平，减少代谢指标，保护大鼠的肝脏和胰腺。说明口服根皮苷能够对STZ所致的高血糖起到预防和延缓的作用。
　　5.根皮苷对高血糖大鼠的治疗作用
　　将高血糖大鼠分为根皮苷低、中、高剂量组，阳性对照组（二甲双胍）和模型对照组，另设一空白对照组。各组大鼠连续灌胃28天相应药物，观察根皮苷对高血糖大鼠的治疗作用。结果表明，根皮苷能降低高血糖大鼠的血脂、血糖水平，改善“三多一少”的临床症状，对肝脏和胰腺具有保护作用。表明根皮苷对高血糖大鼠有一定的治疗作用。

目录

声明

摘要

缩略词表

第一章文献综述

1 多穗柯概况

2 根皮苷研究进展

3 天然植物的提取方法

3．1热水提取法

3．2有机溶剂提取法

3．3超声提取法

3．4微波辅助提取法

3．5超临界流体萃取法

3．6脉冲电场提取法

3．7酶辅助提取法

4 天然植物的分离纯化方法

4．1大孔树脂吸附法

4．2聚酰胺层析柱分离

4．3离子交换树脂法

4．4高效离心分配色谱法

4．5高速逆流色谱法

5 天然产物降血糖的研究进展

6 黄酮类抗氧化剂的研究进展

7 本文的研究目的及意义

第二章多穗柯中根皮苷的提取工艺优化

2．1根皮苷HPLC方法的建立

2．2多穗柯中不同部位根皮苷含量的测定

2．3多穗柯根皮苷的超声提取工艺优化

3 结果与分析

3．1根皮苷HPLC方法的建立

3．2多穗柯中不同部位根皮苷含量的测定

3．3多穗柯根皮苷的提取工艺优化

4 讨论

5 本章小结

第三章多穗柯根皮苷的分离纯化工艺及抗氧化活性研究

1 材料与仪器

1．1材料

1．2主要试剂及配制

1．3主要仪器及设备

2 方法

2．1根皮苷粗提物的絮凝吸附

2．2大孔树脂型号的选择

2．3大孔树脂纯化多穗柯根皮苷条件优化

2．4聚酰胺层析柱纯化多穗柯根皮苷

2．5根皮苷的抗氧化活性研究

2．6数据处理

3 结果与分析

3．1根皮苷粗提物的絮凝吸附

3．2大孔树脂型号的选择

3．3大孔树脂纯化多穗柯根皮苷条件优化

3．4多穗柯根皮苷经聚酰胺纯化后纯度测定

3．5根皮苷的体外抗氧化活性研究

4 讨论

5 本章小结

第四章SD大鼠的高血糖模型建立

1 材料与仪器

1．1实验动物

1．2主要试剂及配制

1．3主要仪器及设备

2 方法

2．1实验动物分组及处理

2．2大鼠一般状态观察

2．3大鼠空腹血糖值的检测及模型成功率

2．4大鼠病理学观察

2．5统计学分析

3 结果

3．1各组大鼠一般状态观察及体重变化

3．2各组大鼠空腹血糖的变化

3．3大鼠病理变化观察

4 讨论

5 本章小结

第五章根皮苷对高血糖大鼠的预防作用研究

1 试剂与仪器

1．1实验动物

1．2主要试剂及配制

1．3主要仪器及设备

2 方法

2．1动物分组及给药

2．2大鼠一般状态观察

2．3空腹血糖及血脂水平的检测

2．4大鼠病理学观察

2．5统计学分析

3 结果

3．1根皮苷对大鼠体重的影响

3．2大鼠一般状态观察

3．3各组大鼠空腹血糖水平

3．4各组大鼠的血脂水平

3．5各组大鼠病理学观察

4 讨论

5 本章小结

第六章根皮苷对糖尿病大鼠的治疗作用研究

1 试剂与仪器

1．1实验动物

1．2主要试剂及配制

1．3主要仪器及设备

2 方法

2．1动物模型的建立、分组及给药

2．2大鼠一般状态观察

2．3空腹血糖及血脂水平的检测

2．4大鼠病理学观察

2．5统计学分析

3 实验结果

3．1各组大鼠的体重变化

3．2大鼠一般状态观察

3．3各组大鼠的空腹血糖水平

3．4各组大鼠的血脂水平

3．5大鼠病理变化观察

4 讨论

5 本章小结

结论与创新

参考文献

致谢

作者简历