尼麦角林的结构确证、原料药和注射剂的质量控制及其在大鼠体内的药代动力学研究

摘要

本文采用UV、IR、MS、NMR并结合理化性质对尼麦角林结构进行了确证，同时经热分析、元素分析、MS等证实，本品纯度符合原料药要求。自行研究合成尼麦角林代谢物1-MMDL，通过MS、1H-NMR证实其结构为10α-甲氧基-1，6-二甲基麦角林-8β-甲醇，HPLC峰面积归一化法测定其含量为99.7％，可作为本品体内代谢研究的对照品。 目前国内外药典尚未收载尼麦角林的质量标准，本文对尼麦角林原料药和注射用尼麦角林的质量控制方法进行了深入研究。采用非水滴定法测定尼麦角林对照品的含量；采用RP-HPLC法测定尼麦角林原料和注射剂的含量及进行有关物质检查，选择HypersilC18柱(250×4.6mm，10μm)，甲醇-30mmol·L-1NaH2PO4水溶液-三乙胺(60：40：0.8，磷酸调节pH3.5±0.1)为流动相，在287nm处测定。在此色谱条件下，尼麦角林在浓度为2.5～80μg·ml-1范围内，峰面积与其浓度线性关系良好(r=0.9999)，检测限为2ng(S/N=3)；原料药中间精密度试验RSD为0.58％(n=5)，重复性试验RSD为0.74％(n=6)，加样回收率为99.4％；注射剂中间精密度试验尺SD为0.85％(n=5)，重复性试验RSD为0.78％(n=6)，加样回收率为99.3％。有关物质检查原料药限量为2.0％，注射剂限量为3.0％。依据所建标准对40℃加速六个月以及常温下放置18个月的中试样品进行了稳定性考察。本研究工作为尼麦角林原料及其注射剂的质量控制提供了准确可行的分析方法。 本文进行了注射用尼麦角林在大鼠体内的药代动力学研究。建立了甲醇沉淀蛋白的血浆样品预处理方法，采用HypersilC18柱(250×4.6mm，10μm)，0.03mol·L-1NaH2PO4水溶液-甲醇-三乙胺(69：31：0.8，磷酸调节pH3.5±0.1)为流动相的HPLC法，在228m处测定大鼠血浆中尼麦角林代谢物1-MMDL的浓度。在此色谱条件下，1-MMDL在0.2～4.0mg·L-1范围内，浓度与峰面积线性关系良好(r=0.9920)，检测限为5.0ng(S/N＞3)。1-MMDL的空白加样回收率、样品加样回收率均＞95％，日内和日间精密度的RSD均＜5.0％，本法可用于注射用尼麦角林在大鼠体内的药代动力学研究。 应用所建方法进行了8只大鼠单剂量注射尼麦角林后的药代动力学研究。试验表明，尼麦角林进入大鼠体内后迅速被血浆酯酶水解为1-MMDL等代谢产物，由于原型药物尼麦角林在血浆中无法检测，故本文以其主要代谢物之一1-MMDL为对象进行研究。其中1-MMDL在大鼠体内过程符合二室模型，其主要药代动力学参数为：药时曲线下面积(AUC)为4.5932±2.4243mg·L-1·h；峰浓度(Cmax)为1.3615±0.4161mg·L-1；达峰时间(Tmax)为0.7813±0.0884h；吸收半衰期(t1/2,ka)为0.1791±0.0875h；分布半衰期(t1/2,α)为1.1819±0.5435h；消除半衰期(t1/2.β)为8.2076±5.6882h；清除率(CL/F)为3.0290±1.3137L.h-1·kg-1；表观分布容积(V/F)为32.8106±26.4521(L·kg-1)。大鼠单剂量腹腔注射尼麦角林后，代谢物1-MMDL迅速生成，但其分布和消除速度较慢。本研究结果可为本品临床合理用药提供参考，并为尼麦角林的相关剂型研究提供药物体内研究资料。

目录

前言

实验方法与结果：第一部分尼麦角林结构确证及代谢物1-MMDL的合成

1仪器与试药

2尼麦角林结构确证

2.1熔点

2.2热分析

2.3元素分析

2.4紫外光谱

2.5红外光谱

2.6质谱

2.7核磁共振谱

2.8结论

3代谢物1-MMDL的合成研究

3.1试验目的

3.2 TLC预实验

3.3 1-MMDL合成方法

3.4 1-MMDL的鉴定

3.5结论

实验方法与结果：第二部分尼麦角林原料药及注射剂的质量控制研究

一、尼麦角林原料药

1仪器与试药

2性状

3鉴别

4检查

5含量测定

6稳定性研究

二、注射用尼麦角林

1仪器与试药

2性状

3鉴别

4检查

5含量测定

6稳定性研究

第三部分注射用尼麦角林在大鼠体内的药代动力学研究

1仪器与试药

2血浆中1-MMDL的HPLC测定方法的建立

2.1波长的选择

2.2色谱条件的选择

2.3对照品溶液的配制

2.4血浆样品预处理方法的选择

2.5血浆样品测定方法

3分析方法的验证

3.1专属性考察

3.2线性关系、检测限及定量限

3.3回收试验

3.4精密度试验

3.5样品稳定性考察

4注射用尼麦角林在家兔体内的药代动力学研究

4.1试验材料

4.2试验方法

4.3血浆样品测定

4.4测定结果

4.5数据处理

讨论

总结

参考文献

综述：老年痴呆的发病机制及药物治疗策略

1发病机理

2药物治疗进展

3尼麦角林的药理及临床应用

4尼麦角林的分析方法

参考文献

致谢

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