耐酸性α-淀粉酶产生菌株的选育和发酵产物初步分析

摘要

从醋醅中分离筛选到一株产耐酸性α-淀粉酶的野生菌ASA-1，经初步鉴定为假丝酵母属的水生假丝酵母。经三角瓶固态发酵实验证明其耐酸性α-淀粉酶活性为30.6U/g。以ASA-1为出发菌株，通过紫外诱变(UV)和硫酸二乙酯(DES)复合诱变，产生可遗传变异。以致死率为80％的剂量对ASA-1进行第一轮紫外诱变，从大量的突变菌株中筛选出多株正变菌株，在以致死率80％为剂量标准进行硫酸二乙酯(DES)-紫外(UV)复合诱变。从140多株突变株中筛选到一株耐酸性α-淀粉酶高产菌株，三角瓶固态发酵实验表明该突变菌株产酶能力与出发菌株相比提高了近4倍，该突变菌株编号为ASA-UD86。　　以突变菌株ASA-UD86为出发菌株，对其发酵条件进行优化，发现该菌株最适产酶条件为：培养基以麦麸为主要原料，按照麦麸：豆饼粉的比例为1：0.5加入豆饼粉补充氮源，培养基固态物与水的比例为1：1.2，自然pH值，培养温度为30℃。　　水生假丝酵母ASA-UD86的培养浸泡液经硫酸铵分段盐析得粗酶，经耐酸性α-淀粉酶同工酶电泳分析后发现，在水生假丝酵母ASA-UD86的发酵产物中有三种酶具有耐酸性α-淀粉酶活性。

目录

论文说明：图形目录

前言

材料与方法

1.实验材料

2.耐酸性淀粉酶酶活测定

3.耐酸性淀粉酶产生菌株的筛选与鉴定

4.复合诱变

5.发酵条件研究

6.发酵产物分析

结果

1.耐酸性α-淀粉酶产生菌株的筛选与鉴定

2.复合诱变

3.ASA-UD86菌株发酵条件优化

4.ASA-UD86菌株固态发酵产物分析

讨论

1.菌种筛选

2.诱变

3.培养条件优化

4.发酵产物分析

小结

参考文献

致谢

声明

文献综述微生物α-淀粉酶的研究进展

1.前言

2.α-淀粉酶来源

3.α-淀粉酶分子生物学

4.淀粉酶的生产

5.α-淀粉酶纯化和酶的特性

6.特殊α-淀粉酶

7.我国的淀粉深加工工业与耐酸性α-淀粉酶

8.展望

参考文献