中国五地区亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌氨基糖苷类修饰酶及甲酰化酶基因型分布比较

摘要

目的：铜绿假单胞菌(PseudomonasAeruginosa，PA)是院内感染主要的病原菌，也见于多种社区感染。铜绿假单胞菌对多种抗菌药物耐药，治疗困难，死亡率高。氨基糖苷类抗菌药物是重要的抗假单胞菌药物，常与β-内酰胺类抗菌药物合用治疗铜绿假单胞菌感染。自20世纪60年代发现铜绿假单胞菌对氨基糖苷类抗菌药物耐药以来，铜绿假单胞菌对氨基糖苷类药物的耐药性已经成为全球性的问题。本研究旨在了解中国五地区(成都，杭州，北京，上海和广州)亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌对六种氨基糖苷类药物(阿米卡星，庆大霉素，异帕米星，妥布霉素，卡那霉素及奈替米星)的敏感性；了解五地区亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌中氨基糖苷类修饰酶及甲酰化酶的分布情况，并进行比较研究。 方法：从中国五个地区(成都，杭州，北京，上海和广州)收集了146株亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌(Imipenem-resistant Pseudomonasaeruginosa，IRPA)。使用琼脂稀释法检测了146株IRPA对阿米卡星，庆大霉素，异帕米星，妥布霉素，卡那霉素及奈替米星等6种氨基糖苷类药物的最低抑菌浓度(Minimum inhibitory concentrations，MICs)，了解药物敏感性及菌株的耐药表型。使用PCR法扩增氨基糖苷类修饰酶(Aminoglycosides modifying enzymes，AMEs)及甲酰化酶的编码基因，阳性PCR产物纯化后测序，与GenBank已登录的氨基糖苷类修饰酶及甲酰化酶编码基因进行比对。 结果：146株IRPA对Amk，Gm，Ise，lob，Km及Net的敏感率分别为27.9％，1.4％，9.5％，23.8％，O％和13.6％，且有明显的地区差异。16种AMEs中有6种基因型获得阳性的PCR结果，分别是aac(3)-Ⅱ、aac(6)-Ⅰ、aac(6)一Ⅱ、ant(2)-Ⅰ、ant(3)-Ⅰ和aph(3)-Ⅳ，它们的检出率依次为33.6％，15.8％，19.9％，28.8％，14.4％和4.8％；aac(3)-Ⅱ是最常见的基因型。AMEs分布存在明显的地区差异。五个地区共有5l株IRPA未检测出16种AMEs中的任何一种，分别为成都6株、杭州6株、北京14株、上海5株和广州20株。五个地区共有9株IRPA的耐药表型与AMEs基因型检测结果不符，分别为成都2株(5，10)、杭州4株(R18，R20，R32，R35)和北京3株(B1，B26，：B27)。其余137株RPA的耐药表型与AMEs基因型检测结果一致。在世界上首次于铜绿假单胞菌中检测到rmtB基因型。146株IRPA中检测到7株IRPA携带rmtB基因，分别是成都第1l、17和18号菌株，北京第B3和：B28号菌株，上海第S15号菌株，广州第G11号菌株。 结论：五个地区亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌对氨基糖苷类抗菌药物耐药情况严重。Amk，Tob，Net和Ise对亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌仍具有一定的敏感性。由氨基糖苷类修饰酶介导的耐药多为高水平耐药(MIc>256mg／L)。一个菌株由多个氨基糖苷类修饰酶基因介导耐药。氨基糖苷类修饰酶基因型在五地区间分布存在差异。IRPA耐药表型与耐药基因型检测结果基本相符。首次在铜绿假单胞菌中发现rmtB罐因型。

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综述铜绿假单胞菌对氨基糖苷类药物耐药机制的研究进展

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