三种天然植物化学物的抗诱变性研究

摘要

叶绿素、番茄红素、染料木素是膳食成分中较常见的几种天然植物化学物。由于其具有多种生物学活性，现已大量用于药品、保健食品开发。有研究提示这几种物质可能具有一定的抗诱变活性。本研究的目的是用人的类淋巴母细胞TK6的TK基因突变试验和彗星试验评价这几种植物化学物的抗诱变性，一方面为其进一步的开发利用提供毒理学依据，并为TK基因突变试验在药品、保健食品原料安全性评价中的推广应用积累资料；另一方面探讨TK基因突变试验用于抗诱变性评价的可能，以拓展TK基因突变试验的应用范围。 在TK基因突变试验中，不加S9的情况下，分别以lO、20、40、80iμg／ml的叶绿素，5、10、20、40μg／ml的番茄红素和0.625、1.25、2.5、5μg／ml的染料木素与阳性致突变物丝裂霉素C(MMC)同时处理TK6细胞3h，采用微孔板法进行细胞毒性、平板接种效率和突变频率测定。结果显示，随受试物剂量的增加，叶绿素和番茄红素对诱变性的拮抗作用增大，当叶绿素剂量达到40μg/ml以上、番茄红素剂量达到20μg/ml以上时，TK位点的总突变频率与MMC对照组比较有显著性降低(P<0.05)，而染料木素仅在0.625μg／ml的剂量时可明显降低MMC诱导的。TK6细胞tl位点突变频率。 在彗星试验中，分别以10、20、40、80μg/ml叶绿素，5、10、20、40μg／ml番茄红素和0.625、1.25、2.5、5μg／ml染料木素与阳性致突变物重铬酸钾(K<,2>Cr<,2>0<,7>)同时处理TK6细胞1h，在叶绿素达到80μg/ml和番茄红素达到20μg/ml时，TK6细胞的拖尾率和拖尾细胞尾长与抗诱变阳性对照组比较无显著性差异(P>0.05)，而与K<,2>Cr<,2>0<,7>对照组比较有显著性差异(P<0.05)，表明在此剂量下叶绿素和番茄红素能抑制K<,2>Cr<,2>0<,7>诱导的。tK6细胞DNA单链断裂，有明显的抗诱变作用。在染料木素各剂量组均未见TK6细胞的拖尾率和拖尾细胞尾长与K<,2>Cr<,2>0<,7>组相比有显著性差异，表明染料木素在本试验条件下无明显的抑制K<,2>Cr<,2>O<,7>诱导TK6细胞DNA单链断裂的作用。 本研究表明，在同时处理方式下，较大剂量的叶绿素、番茄红素有明显的抗MMC诱导的tk基因突变的作用，即可明显降低MMC诱导的TK6细胞tk位点突变频率。低剂量的染料木素能否拮抗MMC对TK6细胞的致突变作用，还有待进一步研究。TK基因突变试验对这三种植物化学物抗诱变性的成功检测，提示该试验在抗诱变研究领域有较好的应用前景，其方法简便可行且结果可靠，具有推广和应用价值。

目录

摘要

前言

第一部分用人类的淋巴母细胞TK6的TK基因突变试评价叶绿素、番茄红素和染料木素的抗诱变性1材料与方法

第一部分用人类的淋巴母细胞TK6的TK基因突变试评价叶绿素、番茄红素和染料木素的抗诱变性2结果

第一部分用人类的淋巴母细胞TK6的TK基因突变试评价叶绿素、番茄红素和染料木素的抗诱变性3讨论

第二部分用单细胞凝胶电泳（彗星试验）评价叶绿素、番茄红素和染料木素的抗诱变性1材料与方法

第二部分用单细胞凝胶电泳（彗星试验）评价叶绿素、番茄红素和染料木素的抗诱变性2结果

第二部分用单细胞凝胶电泳（彗星试验）评价叶绿素、番茄红素和染料木素的抗诱变性3讨论

全文总结

参考文献

综述TK基因突变试验与天然植物化学物的研究进展

致谢

声明