脑红蛋白基因在缺氧缺血性脑损伤多脏器中的表达及其机制的探讨

摘要

新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)多由围产期严重的窒息缺氧造成，HIE患儿多留有不同程度的后遗症。近年来，因窒息缺氧导致的HIE及伴随的多系统器官损伤日益受到重视。2000年新发现的脑红蛋白(NGB)是继脊椎动物血红蛋白与肌红蛋白之后所发现的第三类携氧球蛋白，具有可逆性结合、运输及贮存氧的主要生物学功能，在缺氧缺血性损伤时发挥缺氧诱导的神经保护因子作用。本文通过制备新生猪缺氧缺血性脑病模型，造成一定程度的缺氧缺血性脑损伤(HIBD)，利用半定量逆转录-聚合酶链式反应技术(RT-PCR)检测了模型后不同时间的新生猪脑、肾上腺、心脏、肾脏及肝脏NGBmRNA的表达变化情况。 目的1.成功建立新生猪缺氧缺血性脑病模型，观察其神经行为改变及组织损伤情况。 2.观察HIBD后不同时间的脑组织NGBmRNA的表达变化。 3.检测对照组新生猪多脏器组织中有无NGBmRNA的表达。 4.观察HIBD后不同时间的多脏器组织NGBmRNA的表达变化。 方法1.利用改良的Rice法，以新生猪为实验动物制备缺氧缺血性脑病模型。 2.利用半定量RT-PCR技术，分别检测对照组新生猪及HIBD后0、15、30、60、120、360min时脑、肾上腺、心脏、肾脏及肝脏NGBmRNA的表达情况。 结果1.HIBD组新生猪死亡率5.26％，存活者中100％出现神经行为异常，缺血侧脑组织病理检查(大体形态、显微结构、超微结构)发现较为一致的病理变化，在HIBD后360min最为显著。海马出现病理变化较皮层早。 2.新生猪HIBD后0min(即刻)脑组织中NGBmRNA表达仅轻微升高，15min时继续升高，30min时NGBmRNA快速增加达到高峰，至60min时已迅速降低，以后至360min时仍保持在此低水平。 3.对照组新生猪的心脏、肾脏、肾上腺、肝脏等脏器组织中亦有NGBmRNA的表达，不同组织中NGBmRNA表达有差异，表达量依次为肾脏＜心脏＜肝脏＜肾上腺＜脑。 4.新生猪HIE模型后各脏器组织中NGBmRNA的表达均有升高或升高趋势，呈不同的时相性变化。 结论1.较成功地制备了新生猪缺氧缺血性脑病模型。 2.新生猪HIBD后30min内脑组织NGBmRNA表达迅速升高，并呈时相性变化，NGB可能在缺氧缺血性脑损伤的适应性调节过程中起重要作用，是一种缺氧诱导的内源性神经保护机制。 3.除脑组织外，在其他组织如肾上腺、心脏、肝脏及肾脏组织中亦有NGBmRNA的表达。提示NGB基因可能并非神经系统特异性表达。 4.新生猪HIE模型时，以上脏器组织中NGBmRNA表达有不同程度升高，呈不同的时相性变化，提示NGB可能与多种组织的氧供应有关，并在多种组织的缺氧适应性调节过程中起作用。

目录

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缩略词表

第一部分：新生猪缺氧缺血性脑病动物模型的建立

前言

材料和方法

结果

讨论

结论

第一部分参考文献

第二部分：新生猪缺氧缺血性脑病模型脑组织中NGB基因的表达

前言

材料和方法

结果

讨论

结论

第二部分参考文献

第三部分：新生猪缺氧缺血性脑病模型其他组织中NGB基因的表达

前言

材料和方法

结果

讨论

结论

第三部分参考文献

综述一：脑红蛋白的研究进展

综述二：脑特异性蛋白质及其对神经系统疾病的临床意义

论文照片及说明

第一部分 光镜检查结果1

第一部分 光镜检查结果2

第二部分电镜检查结果

个人简历

攻读学位期间发表文章

致谢