复方高渗盐液对低血容量性休克大鼠心肌细胞的影响

摘要

本实验通过建立大鼠失血休克模型，旨在探讨复方高渗盐溶液对休克大鼠心肌细胞膜ATP酶、心肌细胞Ca2+浓度和△ψm变化的影响，为临床创伤低血容量性休克复苏治疗提供相关依据。 方法:本研究分为两部分：心肌细胞膜ATP酶测定和细胞培养研究。1.心肌细胞膜ATP酶测定：选用Wistar成年大鼠96只，雌雄不限，随机分为两组，即高渗盐溶液组(HSH组)和生理盐水组(NS组)；采用双阶段放血方法制备大鼠休克模型，使平均动脉压(MAP)控制在(4.0±0.7)Kpa开始复苏；每组按不同时相(休克前、休克、复苏后30、60、90、120min)分成6组，每组8只进行实验，弃用实验中死亡的大鼠；在不同的时相末取心室肌标本二份，一份匀浆供心肌细胞膜ATP酶活性测定，另一份供电镜下心脏超微结构观察。2.细胞培养研究：选用Wistar成年大鼠84只，随机分成休克高渗复苏组(HSH组)和生理盐水复苏组(NS组)两组，制备休克模型后按不同时相(休克前、休克、复苏后5、15、30、60、90min)处死大鼠6只，取心室肌细胞培养传代，以Fluo-4/AM为游离钙荧光探针、JC-1荧光染色，应用流式细胞仪分别检测不同时相心肌细胞Ca2+浓度及△ψm。 结果:1.心肌细胞膜ATP酶测定：(1)HSH组与NS组在休克时与休克前基础值比较大鼠心肌细胞膜三种酶活性有显著差异(P＜0.01)，以Na+-K+-ATP酶和Ga2+-ATP酶下降明显。(2)HSH组在复苏R90、R120时与休克前基础值比较大鼠心肌细胞膜三种酶活性有统计学意义(P＜0.05)；复苏后各时间点与休克时比较都有显著差异(P＜0.01)。(3)NS组在复苏后各时间点与休克前基础值比较心肌细胞膜三种酶活性有显著性差异(P＜0.01)；复苏后R90、R120与休克时比较有显著差异(P＜0.01)。(4)HSH组与NS组在复苏后相应时间点两组比较均有显著性差异(P＜0.01)。(5)对于心肌超微结构损伤程度的改善，HSH组在复苏后60min明显好于休克时及NS组复苏后60min。2.细胞培养研究部分：(1)HSH组在休克、复苏R5、R15、R30各时间点的心肌细胞Ca2+浓度较休克前基础值明显升高，线粒体膜电位显著降低(P＜0.01)；在复苏R60、R90心肌细胞Ca2+浓度和线粒体膜电位与休克时比较有显著差异(P＜0.01)。(2)NS组在休克、复苏后各时间点同休克前基础值比较心肌细胞Ca2+浓度均明显升高，线粒体膜电位明显下降(P＜0.01)；而复苏后各个时间点与休克时比较无显著差异(P＞0.05)。(3)复苏R60、R90HSH组心肌细胞Ca2+浓度及线粒体膜电位较NS组差别显著(P＜0.01)。 结论:1.低血容量性休克可引起心肌细胞膜ATP酶的活性降低，细胞膜离子泵功能衰竭。2.低血容量性休克复苏使微循环再灌注加重心肌细胞内Ca2+超载，并造成部分心肌不可逆性损伤。3.复方高渗盐液不但能快速改善休克引起的血容量不足，而且能恢复心肌细胞膜离子泵功能，有效的降低心肌细胞Ca2+浓度，稳定线粒体膜电位。

目录

军医进修学院研究生学位论文原创性声明及军医进修学院研究生学位论文版权使用授权书

缩略语表

第一部分复方高渗盐液对低血容量性休克大鼠心肌离子泵的影响

第二部分复方高渗盐液对低血容量休克大鼠心肌细胞Ca2+浓度及线粒体膜电位影响

结论

复方高渗液与失血性休克复苏

附图

攻读学位期间发表文章

致谢