FXYD5蛋白质在肝门部胆管癌组织中的表达及其临床意义

摘要

小分子离子通道蛋白已成为近期研究的热点，FXYD蛋白质家族是近年发现的小分子离子通道相关跨膜糖蛋白，家族中共有7个成员，其中FXYD5文献报导为肿瘤相关蛋白，在数个肿瘤细胞上(胃癌、胰腺癌、甲状腺癌和宫颈癌细胞)有阳性表达，并显示FXYD5的表达水平与肿瘤病人的预后相关，与肿瘤的组织学分级、淋巴结转移、血行转移及病人生存时间显著相关。胆管癌，尤其是肝门部胆管癌在近年呈上升趋势，对其治疗和预后尚缺乏科学的评估。本课题组在国家自然科学基金(项目批号：NO.30170922，NO.39970724)的资助下，对FXYD蛋白家族中FXYD6的基因全长进行了克隆，并对功能分区进行了定位，为该家族中其它成员的研究打下了基础。在胆管癌组织有无FXYD5蛋白表达，表达水平如何，表达水平与病人的临床病理表现及肿瘤生物学特征有无相关性?与病人的预后有无相关性?，能否做为估计预后的一个临床指标?本试验就此些问题通过Westerblot和免疫组化(1HC)方法检测了该蛋白质在肝门部胆管癌组织中的表达。对3个肝门部胆管癌标本和3个正常胆管标本进行了蛋白印迹分析，结果显示胆管癌和正常胆管中均有FXYD5表达。对86例临床病历资料和病理资料齐全的标本，进行了免疫组化半定量分析。FXYD5抗体购自Abcam公司，常规S-P法免疫组化染色。结果显示：86个标本中，FXYD5低阳性表达(0-25％，1+)为29例；中阳性表达(26-50％，2+)为31例；高阳性表达(＞50％，3+)为26例。将FXYD5与86例病人的临床病理指标年龄、性别、肿瘤侵犯范围，淋巴结转移情况，远处转移情况，肿瘤组织学分级，神经浸润和切缘是否阳性进行了统计分析，设P值＜0.05为有显著差异。经统计分析，结果显示：第一，FXYD5表达水平与淋巴结转移，肿瘤组织学分级和切缘是否阳性呈显著相关，具有显著的统计学差异，P值分别为＜0.0001、0.00011和0.04。第二，FXYD5低、中、高三个表达水平与86例病人的总体生存时间有显著相关性，x2=6.931，P=0.031。用Wilcoxon两两检验，低表达者累积生存时间优于高表达者，有显著性差异，x2=4.776，P=0.029。在九个临床病理参数的单因素分析中，FXYD5、淋巴结转移、肿瘤组织学分级，神经浸润是影响预后的四个因素。对上述四个阳性因素进行多因素Cox风险比例模型分析，淋巴结转移和神经浸润最终进入模型，成为影响预后的独立因素，FXYD5虽然因为变量的相互作用没有进入模型，但是它与淋巴结转移显著相关，与手术切缘阳性显著相关，表达水平高低影响累积生存时间，初步认为FXYD5可以作为估计病人预后的一个指标，低表达者预后优于高表达者。

目录

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前 言

第一部分 新鲜胆管及肝门部胆管癌组织中FXYD5的定性分析(Westernblot方法)

第二部分 肝门部胆管癌组织中FXYD5的半定量分析石腊标本组织中FXYD5的表达（免疫组织化学法IHC）

讨论

结语

附图

参考文献

文献综述 FXYD蛋白质家族中FXYD5的研究进展

攻读学位期间发表论著情况

致谢