替代激活小胶质细胞通过BDNF信号通路促进神经发生的研究

摘要

神经发生在哺乳动物大脑中终生存在，新生神经元主要由侧脑室的室管膜下区（the subgranularzone）及海马齿状回的颗粒下层（the subgranularzone）产生,这两个区域存在着神经前体细胞（neural progenitor cells, NPCs）。小胶质细胞是中枢神经系统常驻的免疫细胞，是神经壁龛的重要组成部分，它对神经发生有广泛的调节作用。不同状态的小胶质细胞对神经发生的影响不同：静息状态的小胶质细胞主要通过吞噬作用修饰神经发生；同时，根据激活物的不同，小胶质细胞具有不同的激活状态，从而表现不同的功能。经典激活（M1）的小胶质细胞通常被认为表现为促炎性的，主要分泌IL-1β，IL-6，TNF-α等促炎性细胞因子，会对神经发生造成损伤。替代激活（M2）的小胶质细胞表现抗炎性的表型，具有神经保护作用，主要表现为分泌抗炎性细胞因子、神经营养因子，具有修复损伤的作用，这种表型的小胶质细胞具有促进神经发生的作用。但是替代激活的小胶质细胞的促神经发生作用的具体机制，目前还知之甚少。已有事实表明，在神经发育过程中，脑源性神经营养因子（BDNF）发挥了巨大的作用，并且替代激活的小胶质细胞也大量表达这种营养因子。我们的实验旨在探究替代激活的小胶质细胞是通过何种途径促进神经发生的。我们分别用Th1细胞的分泌的IFN-γ和Th2细胞分泌的IL-4刺激小胶质细胞，通过检测小胶质细胞分泌的细胞因子及表面标志分子鉴定小胶质细胞的表型，IFN-γ处理的小胶质细胞表现为经典激活表型（M1），IL-4刺激的小胶质细胞表现为替代激活表型（M2）；以及检测不同激活状态下的小胶质细胞表达BDNF的水平，发现M2型的小胶质细胞的BDNF表达水平大大提高，之后将不同表型的小胶质细胞与神经前体细胞（NPCs）共培养，检测NPCs细胞的分化和增殖情况，M2型的小胶质细胞能够促进神经发生，但是当将BDNF的信号通路阻断，小胶质细胞的促神经发生作用减少。这些结果表明了替代激活的小胶质细胞的促神经发生作用与BDNF信号通路相关。

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第一章 绪 论

1.1神经发生的研究进展

1.2 成年哺乳动物神经壁龛的研究

1.3小胶质细胞对神经发生的作用

1.4脑源性神经营养因子与神经发生的作用

1.5 本文的主要研究内容和结构安排

第二章N9小胶质细胞的激活状态的研究

2.1 前言

2.2 实验材料

2.3 实验方法

2.4 实验结果

2.5 讨论

第三章 原代小胶质细胞激活状态的研究

3.1 引言

3.2实验材料

3.3 实验方法

3.4 实验结果

3.5 讨论

第四章 小胶质细胞与神经前体细胞共培养

4.1 引言

4.2 实验材料

4.3 实验方法

4.4 实验结果

4.4 讨论

第五章 总结

致谢

参考文献

攻读硕士学位期间取得的成果