右美托咪定对大鼠心肺复苏后脑损伤的保护作用研究

摘要

心肺复苏后脑损伤是心脏骤停患者致残和死亡的最主要原因之一。由于大脑的独特易损性，所以它对缺血/再灌注损伤的耐受性极为有限，因此缺血性脑损伤仍然是心跳骤停后产生恶劣预后的重要因素，其病理生理主要包括两方面：缺血后细胞内稳态失衡促凋亡及再灌注后促炎性反应。右美托咪定已被证实具有神经保护作用，可以减轻脑组织损伤，但其是否对心肺复苏后脑损伤产生保护作用尚不清楚。 研究目的：本研究旨在探讨右美托咪定后处理对大鼠心肺复苏后脑功能的影响及可能机制。 研究方法：本实验采用呼气末夹闭气管导管合并静脉给予顺式阿曲库铵模拟窒息制备大鼠心跳骤停-心肺复苏模型。选择雄性SD大鼠30只，随机分为3组：假手术组（Sham组，n=6）、对照组（Control组，n=12）、右美托咪定后处理组（Dex组，n=12）；Sham组大鼠仅行气管插管及动静脉穿刺，Control组和Dex组进行6min窒息造模；Dex组大鼠在自主循环恢复后使用微量注射泵静脉输注25μg/kg盐酸右美托咪定注射液，Control组在自主循环恢复后输注等量生理盐水。分别对各组大鼠在自主循环恢复后24h、48h、72h进行神经功能缺损评分，在5d时进行转杆测试；采用ELISA法在2h、24h、48h检测各组大鼠血清中的IL-1β、TNF-α表达水平；自主循环恢复5天后，取大鼠脑皮层，使用Tunel染色计算各组大鼠脑细胞凋亡指数，Western Blot检测各组大鼠脑皮层组织中Caspase-3和NF-κB蛋白的表达水平。 研究结果：1.与Control组比较，Dex组大鼠在心肺复苏后五天内的累计生存率明显升高，其中Control组五天累积生存率为50%，Dex组为66.7%；2.自主循环恢复后24h、48h、72h，对大鼠进行Geocadin神经功能缺损评分，结果发现：与Sham组比较，Control组各时间点神经功能缺损评分均降低（p＜0.01），然而与Control组相比，Dex组神经功能缺损评分在各时间点均升高（p＜0.05）；3.转杆测试结果显示：Dex组大鼠较Control组在转杆上的爬行时间、爬行距离、平均速度均增加（p＜0.05），而Dex组与Sham组无统计学差异；4.与Control组比较，Dex组大鼠2h血清中TNF-α水平显著降低（p＜0.05），24h和48h三组之间无显著性差异，而Dex组与Sham组无显著性差异；5.与Control组比较，Dex组2h、24h和48h各时间点大鼠血清中的IL-1β的表达明显减少（p＜0.05），而Dex组与Sham组相比则无统计学差异；6.与Control组比较，Dex组大鼠心脏骤停/心肺复苏诱导的脑细胞凋亡指数显著降低（p＜0.001），而Dex组与Sham组无显著性差异；7.与Control组比较，Dex组大鼠脑组织中Caspase-3的表达明显减少（p＜0.05），而Dex组与Sham组无统计学差异；8.与Control组比较，Dex组大鼠脑组织中NF-κB的表达明显减少（p＜0.05），而Dex组与Sham组无统计学差异。 研究结论：右美托咪定后处理可以减少大鼠心肺复苏后脑细胞凋亡，降低中枢神经系统炎症反应，改善大鼠自主循环恢复后五天的生存率、神经功能评分以及运动损伤，减轻大鼠心肺复苏后脑损伤。

目录

声明

主要中英文缩略语对照

第一章 绪 论

1.1 研究工作的背景与意义

1.2国内外研究历史与现状

1.2.1 心肺复苏后脑损伤的发病机理

1.2.2 右美托咪定的神经保护作用及其相关机制的研究进展

1.3 本文的主要贡献与创新

1.4 本论文的结构安排

第二章 右美托咪定后处理对大鼠心肺复苏后脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究

2.1 材料

1.2.1 实验动物

1.2.2 主要实验试剂

1.2.3 主要实验耗材

1.2.4 主要实验仪器

2.2 实验方法

2.2.1 大鼠窒息性心脏骤停/心肺复苏模型的制备

2.2.2 动物的随机分组及给药方式

2.2.3 研究方案

2.2.4 生存分析以及神经功能评估

2.2.5 转杆实验

2.2.6 ELISA法检测大鼠血清炎性因子表达

2.2.7 TUNEL染色检测细胞凋亡

2.2.8 Western Blotting

2.2.9 统计学方法分析

2.3.1 右美托咪定后处理对大鼠ROSC后五天生存率的影响

2.3.2 右美托咪定后处理对大鼠ROSC后血流动力学的影响

2.3.3 右美托咪定后处理对大鼠ROSC后NDS评分的影响

2.3.4 右美托咪定后处理对大鼠ROSC后运动功能的影响

2.3.5 右美托咪定后处理对大鼠ROSC后血清中炎性因子表达的变化

2.3.6 右美托咪定后处理对大鼠ROSC后神经元凋亡的影响

2.3.7 右美托咪定后处理对大鼠ROSC后脑皮层Caspase-3表达的变化

2.3.8 右美托咪定后处理对大鼠ROSC后脑皮层中NF-κB表达的变化

2.4 本章小结

第三章 全文总结与展望

3.1 全文总结

3.2 后续工作展望

致谢

参考文献

攻读硕士学位期间取得的成果