正常和X线辐射损伤小鼠睾丸中Ghrelin表达及其意义

摘要

目的:观察ghrelin在正常成年小鼠睾丸中的表达，以及在X射线辐射损伤后16h小鼠睾丸中的表达和变化，探讨ghrelin在正常小鼠睾丸中精子发生、精子形成以及小鼠睾丸辐射损伤修复中的作用。 方法:采用直线加速仪，剂量为1.0Gy的X射线对成年小鼠进行全身单次照射，于照射后16h取睾丸组织制备标本；应用免疫组织化学ABC法检测ghrelin在正常小鼠及辐射损伤小鼠睾丸中的表达。阳性切片再经Harrys苏木精复染。阴性对照用1：100稀释的非免疫兔血清代替一抗体进行孵育，其余步骤、条件均相同。 结果: 1、正常成年小鼠睾丸中ghrelin免疫反应主要集中在睾丸的间质细胞，免疫反应阳性产物存在于细胞浆中，呈强阳性，DAB染色呈棕褐色，细胞核无染色；生精小管中各级生精细胞免疫染色呈阴性。 2、全身照射处理16h后，小鼠睾丸内的生精小管结构基本完整，但ghrelin的免疫反应结果出现了变化：ghrelin在间质细胞中无免疫阳性反应，而在绝大多数生精小管内各级生精细胞的细胞核中出现了阳性反应，特别是在精原细胞和初级精母细胞中有强阳性反应，呈深棕褐色，而精子细胞呈棕黄色；生精细胞的胞浆内无明确阳性染色。各级生精细胞中ghrelin的表达具有明显的生精周期特异性，ghrelin定位于生精小管周边的精原细胞、部分初级精母细胞和特定生精周期的精子细胞，且主要表达于发育变化比较明显的时段：A型精原细胞到早期粗线期精母细胞以及圆形精子细胞到变形精子细胞的过程。 结论:在正常成年小鼠睾丸中，ghrelin主要表达在睾丸的间质细胞，提示ghrelin可能参与了睾丸间质细胞的功能调节。在X-线照射急性损伤后，ghrelin在小鼠睾丸内生精细胞的表达变化方式，提示ghrelin参与了生精上皮X-线辐射急性损伤过程，推测ghrelin可能在精子发生和精子形成的过程起到重要的作用。

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