益视片对大鼠视网膜光损伤细胞凋亡影响的实验研究

摘要

目的：通过观察大鼠视网膜光损伤中组织形态学改变及视细胞凋亡调节因子NF-κB、FasL、TNF-α、Caspase-3的改变，探讨益视片对视网膜光损伤的防护作用及其机理。方法：SD大鼠40只随机分为正常对照组、模型对照组、高剂量治疗组和低剂量治疗组，两治疗组于光照前4周连续灌胃给药后，在强度为1900±106.9Lux的绿色荧光灯下(λ=510～560nm)连续照射24小时，照射后再连续给药1周，模型对照组仅进行荧光灯24小时照射。实验结束，处死所有动物，进行大鼠视网膜组织形态学观察及凋亡调节因子NF-κB，FasL，TNF-α，Caspase-3的检测。结果：①组织形态学上，模型对照组视网膜外核层变薄，细胞减少，细胞排列较正常组稀疏，内外节排列紊乱，分界不清；高剂量治疗组视网膜形态有改善，低剂量治疗组较模型组无明显改善。②光损伤后，模型对照组视网膜的FasL，TNF-α，Caspase-3表达增强，NF-κB表达减弱，与正常对照组比较，差异有统计学意义(P＜0.01～0.05)。高剂量治疗组视网膜中FasL，TNF-α，Caspase-3表达减少，NF-κB表达增强，与模型对照组比较，差异有统计学意义(P＜0.01～0.05)。结论：本实验成功地建立了视网膜光损伤模型。实验结果提示高剂量治疗组益视片具有减轻视网膜光损伤，促进视功能的恢复，对视网膜光损伤有防护作用。其作用机理与增强NF-κB表达，减弱FasL，TNF-α和Caspase-3表达有关，从而抑制视网膜细胞凋亡。

目录

论文说明：缩略词表

1引言

2实验研究

2.1实验材料

2.1.1实验仪器

2.1.2试剂与药品

2.1.3实验动物

2.2实验方法

2.2.1分组方法

2.2.2造模方法

2.2.3给药方案

2.3视网膜切片染色方法

2.3.1 HE染色

2.3.2免疫组化检测NF-κ B、FasL、TNF-α，Caspase-3

2.4阳性结果判定

2.5各检测指标含义

2.6各指标检测方法

2.6.1视网膜外核层细胞数量检测

2.6.2视网膜外核层细胞NF-κ B，FasL，TNF-α，Caspase-3的检测

2.6.3视网膜外核层细胞NF-κ B核转位细胞的计数

2.7统计学分析方法

3实验结果和分析

3.1视网膜外核层组织形态学观察及检测的外核层细胞数

3.2益视片对大鼠视网膜NF-κ B表达的影响

3.3益视片对大鼠视网膜NF-κ B核转位的影响

3.4益视片对大鼠视网膜FasL表达的影响

3.5益视片对大鼠视网膜TNF-α表达的影响

3.6益视片对大鼠视网膜Caspase-3表达的影响

4 讨论

4.1视网膜光损伤动物模型的评价

4.2益视片相关古文献记载及现代研究

4.3益视片对视网膜光损伤的防护作用及机理探讨

4.3.1益视片对视网膜光损伤的防护作用

4.3.2益视片对视网膜光损伤的防护作用的机理探讨

5结论

6问题与展望

6.1问题

6.2展望

参考文献

综述 视网膜光损伤中相关凋亡基因的研究

1细胞凋亡与视网膜光损伤

2视网膜光损伤的相关凋亡基因

3展望

参考文献

致谢

附图

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