基于全二维气相色谱/飞行时间质谱的川白芷、川木香挥发性成分质量分析

摘要

中药药效物质基础和中药质量控制是中药研究的重要任务。现代分析技术在中药化学成分分析上起着重要作用，尤其是各种联用技术。GC×GC/TOF MS技术是分析中药挥发性成分较先进较适合的工具。口服是中药用药特点，中药经口服后，中药有效成分首先在胃肠道中经肠内菌群代谢转化，然后以原型或者代谢转化成分被吸收入血起药效作用。体内代谢过程是中药药效物质基础筛选最直接最重要的途径。本文以中药体内代谢过程为主线，通过肠内菌群代谢转化研究，体内代谢入血成分研究，筛选川白芷、川木香的药效物质基础，为质量控制提供参考。 目的： 采用GC/MS、GC×GC/TOF MS、HPLC等色谱技术分析川白芷挥发性成分。通过对川白芷挥发油、水煎液和川木香主要单体成分木香烃内酯、去氢木香内酯的肠内菌群代谢和入血成分分析，探讨川白芷、川木香的药效物质基础。 方法: 1、采用均匀设计优化川白芷挥发油的超临界萃取工艺，以GC/MS、GC×GC/TOF MS和HPLC色谱分析技术对川白芷挥发油成分进行分析。建立了川白芷挥发油的HPLC质量控制方法。 2、将川白芷挥发油、水煎液与大鼠肠内菌群体外温孵，HPLC分析代谢转化成分，探讨大鼠肠内菌群对川白芷挥发油、水煎液代谢转化情况。 3、建立甲醛致伤害性疼痛大鼠模型，观察川白芷挥发油、水煎液的镇痛作用。腹主动脉取血，HPLC检测血清代谢物，探讨川白芷挥发油、水煎液的镇痛物质基础。 4、采用硅胶柱色谱，制备薄层色谱等方法，分离川木香中的主要化学成分；结合1H-NMR、13C-NMR等分析方法确定化合物的结构。 5、采用大鼠肠内菌群体外温孵，HPLC分析代谢转化成分，探讨川木香挥发油、水煎液以及木香烃内酯、去氢木香内酯的体外代谢转化情况。 结果: 1、川白芷挥发油的超临界CO2萃取最佳工艺条件是：萃取压力17.8MPa，萃取温度54.3℃，萃取时间175.1min，在最佳条件下，平均萃取率为4.17％。GC×GC/TOF MS分析川白芷挥发油成分，定性出86种化合物。 2、川白芷挥发油、水煎剂对甲醛致伤害性疼痛大鼠都有镇痛作用。川白芷挥发油、水煎剂入血成分主要是水合氧化前胡素、佛手柑内酯等，这些化合物可能为川白芷挥发油、水煎液镇痛药效物质基础。 3、木香烃内酯、去氢木香内酯经大鼠肠内菌群代谢，HPLC分析，没有检测到代谢转化产物，木香烃内酯、去氢木香内酯可能以原型吸收入血并发挥药效作用。 结论: 川白芷挥发油超临界CO2萃取，在最佳工艺条件下的平均萃取率为4.17％；GC×GC/TOF MS分析定性出86种化合物；川白芷镇痛的药效物质基础是水合氧化前胡素、佛手柑内酯等；川木香主要药效成分木香烃内酯、去氢木香内酯在大鼠肠内菌群中不能被代谢转化，它们可能是以原型入血起药效作用。 创新点: 1、本文首次运用均匀设计优化川白芷挥发油超临界萃取工艺，用GC×GC/TOF MS对其成分进行分析。 2、本文通过川白芷挥发油、水煎液镇痛作用的对比研究，筛选出川白芷主要镇痛药效物质基础可能是水合氧化前胡素和佛手柑内酯等。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文缩写词对照表

声明

引 言

第一章 川白芷挥发油全二维气相色谱/飞行时间质谱分析和体内过程分析

第二章 川木香药效物质基础分析

结论和讨论

附图

参考文献

文献综述一肠内菌群代谢研究进展

文献综述二系统化学生物学在中药谱效关系研究中的应用展望

致 谢

在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果