参芎滴丸对局灶性大脑中动脉栓塞(MCAO)大鼠神经血管单元的影响及机制研究

摘要

目的:通过对急性缺血性卒中模型大鼠行为学评分、超微结构,水通道蛋白-4(AQP-4)、内皮细胞屏障抗原(EBA)、胶质源性纤维酸性蛋白(GFAP)的水平,纤溶酶原激活剂(t-PA)及纤溶酶原激活剂抑制剂-1(PAI-1)的研究,探讨参芎滴丸对MCAO大鼠的神经血管单元的影响。
　　方法:线栓法制备大脑中动脉栓塞模型大鼠。参芎滴丸的给药时间有预处理给药和造模后给药两种。其中参芎滴丸预处理给药研究分组:正常组、假手术①组、参芎滴丸预处理+MCAO组、MCAO①组,在造模前7天参芎滴丸灌胃,MCAO成功后24小时处死大鼠。参芎滴丸造模后给药研究分组:正常组、假手术②组、MCAO②组、MCAO+参芎滴丸组。参芎滴丸在MCAO后30分钟内给药,灌胃三天后处死。观察大鼠行为学评分、电镜的变化,免疫组化检测水通道蛋白-4(AQP-4)、内皮细胞屏障抗原(EBA)、胶质源性纤维酸性蛋白的水平(GFAP),酶联免疫法检测纤溶酶原激活剂(t-PA)及纤溶酶原激活剂抑制剂-1(PAI-1)。
　　结果:
　　与MCAO模型组对照,参芎滴丸预处理给药可以减少神经缺损评分(P<0.05),电镜下观察可以改善神经血管单元的结构,星形胶质细胞GFAP表达增多(P<0.05),t-PA升高(P<0.01),PAI-1降低(P<0.01),可以抑制AQP-4的表达(P<0.01),提高EBA的表达(P<0.05);
　　与MCAO模型组对照,参芎滴丸MCAO后给药可以减少神经缺损评分(P<0.05),电镜下观察可以改善神经血管单元的结构,升高t-PA(P<0.01)降低PAI-1(P<0.01),抑制AQP-4的表达(P<0.01),对于EBA、GFAP的表达有一定提高作用,P>0.05,无统计学差异。
　　结论:
　　1.参芎滴丸能够改善MCAO大鼠的神经缺损评分,电镜下观察可以改善神经血管单元的结构。
　　2.其保护作用可能是通过调节星形胶质细胞GFAP的表达,改善内皮细胞的内分泌功能、调节t-PA、PAI-1平衡,以及抑制AQP-4、提高EBA、改善血脑屏障等途径实现。

目录

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引言

实验材料

1. 药品与试剂

2. 仪器

3. 实验动物

4. 参芎滴丸

实验方法

1. 参芎滴丸

2. 大脑中动脉脑栓塞(middle cerebral artery occlusion, MCAO)模型、假手术的制备

3. MCAO的判断标准及纳入标准

4. 实验动物的分组及处理

5. 检测指标

6. 统计分析

实验结果

1. 参芎滴丸对MCAO大鼠神经症状学的影响

2. 参芎滴丸对 MCAO 大鼠神经血管单元（neurovascular unit, NVT）超微结构的影响

3. 参芎滴丸对MCAO大鼠星形胶质细胞GFAP的影响

4. 参芎滴丸对MCAO大鼠血浆t-PA及PAI-1影响

5. 参芎滴丸对MCAO大鼠EBA及AQP-4影响

讨论

1. 关于参芎滴丸的分组研究

2. 造模情况

3. 关于神经血管单元

4. 神经功能缺损评分和电镜观察

5. 参芎滴丸对MCAO大鼠星形胶质细胞GFAP的影响

6. 参芎滴丸对MCAO大鼠血浆t-PA及PAI-1的影响

7. 参芎滴丸对MCAO大鼠EBA及AQP-4的影响

全 文 总 结

本课题创新点

问题与展望

致谢

参考文献

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