蒲灵化瘀止痛方对子宫腺肌病模型小鼠在位及异位内膜中MMP-2和TIMP-2表达的影响和意义

摘要

目的:
　　通过观察子宫腺肌病(adenomysisiAM)模型小鼠运用蒲灵化瘀止痛方治疗前后的子宫组织形态学差异，以及在位和异位内膜中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其抑制物-2(TIMP-2)的变化，探讨蒲灵化瘀止痛方治疗子宫腺肌病的作用机理，为临床治疗用药和进一步研究提供理论基础和实验依据。
　　方法:
　　将健康雌性未孕7周龄ICR小鼠作为研究对象，随机分为7组（空白组、模型组、蒲灵化瘀止痛方高、中、低剂量组、中药对照组、西药对照组），对除空白组以外的其余6组小鼠行经腹同种异体垂体宫腔移植术，建立AM小鼠模型，饲养3月待模型建立后再连续给药12周，处死小鼠，取小鼠子宫标本，HE染色，观察各组小鼠子宫组织形态学变化;免疫组化SP法染色，进行在位和异位子宫内膜MMP-2、TIMP-2的免疫组化测定，进行统计处理。
　　结果:
　　①与空白组比较，模型组在位内膜中MMP-2的表达增高，TIMP-2的表达降低，MMP-2/TIMP-2比值增高，且有显著统计学差异（P＜0.05）。
　　②与模型组比较，蒲灵化瘀止痛方高、中、低剂量组、中药对照组和西药对照组模型小鼠在位和异位内膜中MMP-2的表达均降低，其中高剂量组降低明显，具有显著统计学差异(P＜0.05)。与中药对照组比较，高剂量组在位内膜中MMP-2的表达降低，差异具有统计学意义(P＜0.05);异位内膜中MMP-2的表达无统计学差异（P＞0.05）。与西药对照组比较，高剂量组在位和异位内膜中MMP-2的表达均无统计学差异（P＞0.05）。
　　③与模型组比较，蒲灵化瘀止痛方高、中、低剂量组、中药对照组和西药对照组模型小鼠在位内膜中TIMP-2的表达均有升高趋势，但无统计学差异(P＞0.05)。各组间比较，异位内膜中TIMP-2的表达差异无统计学意义(P＞0.05)。
　　④与模型组比较，蒲灵化瘀止痛方高、中、低剂量组、中药对照组和西药对照组模型小鼠在位内膜中MMP-2/TIMP-2比值均有下调趋势，其中高剂量组下调显著，具有统计学差异(P＜0.05);异位内膜中MMP-2/TIMP-2比值无统计学意义（P＞0.05）。
　　结论:①AM模型小鼠在位内膜中MMP-2表达升高，TIMP-2表达降低，MMP-2/TIMP-2比值升高，可能使子宫内膜侵袭能力增强，促进子宫腺肌病的发生发展。
　　②蒲灵化瘀止痛方高剂量能显著降低AM模型小鼠在位及异位内膜中MMP-2的表达。
　　③蒲灵化瘀止痛方高剂量有升高AM模型小鼠在位内膜中TIMP-2表达的趋势;对异位内膜中TIMP-2表达的影响无统计学意义。
　　④蒲灵化瘀止痛方高剂量可明显下调在位内膜中MMP-2/TIMP-2比值;有下调异位内膜中MMP-2/TIMP-2比值的趋势。
　　⑤蒲灵化瘀止痛方可能通过抑制MMP-2的表达，下调MMP-2/TIMP-2比值，降低在位子宫内膜侵袭能力，从而影响子宫腺肌病的发生发展，对子宫腺肌病起到治疗作用。

目录

摘要

缩略词表

引言

1 实验材料

1．1 实验动物

1．2 实验药品和试剂

1．2．1 实验药品

1．2．1 实验试剂

1．3 实验设备与仪器

2 实验方法

2．1 动物造模的建立

2．2 实验分组与给药方法

2．3 标本采集与处理

2．4 检测方法

2．4．1 组织形态学观察

2．4．2 金属基质蛋白酶-2(MMP-2)及其抑制物(TIMP-2)的检测

3 实验结果

3．1 肉眼观察

3．2 各组小鼠子宫组织形态学变化

3．3 MMP-2、TIMP-2的免疫组化结果

3．3．1 MMP-2、TIMP-2在AM子宫内膜中的分布

3．3．2 各组小鼠在位内膜MMP-2积分光密度的比较

3．3．3 各组小鼠异位内膜MMP-2积分光密度的比较

3．3．4 各组小鼠在位内膜TIMP-2积分光密度的比较

3．3．5 各组小鼠异位内膜TIMP-2积分光密度的比较

3．3．6 在位内膜与异位内膜MMP-2表达的比较

3．3．7 在位内膜和异位内膜TIMP-2表达的比较

3．3．8 各组小鼠在位内膜MMP-2／TIMP-2比值的比较

3．3．9 各组小鼠异位内膜MMP-2／TIMP-2比值的比较

4 讨论

4．1 关于AM动物模型的确立

4．1．1 造模动物选择

4．1．2 造模方法选择

4．2 祖国医学对子宫腺肌病的认识

4．3 关于蒲灵化瘀止痛方的分析

4．3．1 蒲灵化瘀止痛方的组成和功效主治

4．3．2 蒲灵化瘀止痛方药物的相关药理研究

4．4 MMP-2、TIMP-2的概述及其与子宫腺肌病的相关性研究

4．4．1 基质金属蛋白酶(MMPs)及其抑制物(TIMPs)的概述

4．4．2 MMP-2、TIMP-2与子宫腺肌病的相关性

5 结论

6 问题与展望

致谢

参考文献

综述一：子宫腺肌病的中医药治疗进展

综述二：子宫腺肌病病因、诊断及治疗的研究进展

附图

在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果

在读期间参加的学术会议

在读期间参加的课题研究及新药临床观察

声明