七味姜黄方对小鼠急性酒精中毒的干预研究

摘要

目的:
　　在中医理论指导下，研究七味姜黄方对56°白酒所致的急性酒精中毒小鼠模型进行干预，观察其解酒、防醉作用，并初步探讨其作用机制。
　　方法:
　　SPF级昆明种小鼠随机分为:空白组(Control)、模型组(Model)、安体普天然植物提取物复合片(alcoholmetabolismsupplementdescription，RU-21)组，七味姜黄方(QWJH)组4组。除空白组给予等容积生理盐水外，其余给予56°白酒灌胃建立急性酒精中毒的小鼠模型。造模前30min预防性给予RU-21、七味姜黄方进行干预，空白组、模型组给予等容积的生理盐水。观察小鼠的醉酒情况，血中乙醇浓度，血清ALT（alanineaminotransferase，丙氨酸氨基转氨酶）、AST（aspartateaminotransferase，天冬氨酸氨基转移酶）、ALP（alkalinephosphatase，碱性磷酸酶）的活性，用ELISA法检测肝组织匀浆中TNF-α（tumornecrosisfactoralpha，肿瘤坏死因子-α）、IL-8（interleukin-8，白细胞介素-8）、ADH（alcoholdehydrogenase，乙醇脱氢酶）、ALDH（aldehydedehydrogenase，乙醛脱氢酶）、P450(cytochromeP450，细胞色素P450)、SOD（superoxidedismutase，超氧化物歧化酶）、MDA(malondialdehyde，丙二醛)的活性，检测脑组织匀浆中β-EP(β-endorphine，β-内啡肽)、LENK（leucine-enkephalin，亮脑啡肽）的活性，光学显微镜下观察肝脏病理改变。观察七味姜黄方对急性酒精中毒模型小鼠的解酒作用，初步探讨其解酒、保肝的作用机制。
　　结果:
　　1.七味姜黄方组因酒精中毒导致“醉酒”的时间(min)较模型组、RU-21组显著延长，3组分别为304.5±23.27、19.23±6.29、137.1±17.65，P＜0.01，同时，七味姜黄方组小鼠由“醉酒”状态到“醒酒”状态的时间较模型组、RU-21组显著缩短，3组分别为265.50±27.2、661.43±38.56、351.9±35.93，P＜0.01。
　　2.七味姜黄方组小鼠24h生存率较模型组显著提高，分别为100％、66％，两者比较有显著性差异X2=11.452，P=0.003，P＜0.01。
　　3.七味姜黄方组各个时相(0.5h、1h、1.5h、2h、3h、6h)的血中乙醇浓度(mg/mL)均较模型组、RU-21组低，其浓度分别为31.47±0.67、32.64±0.6、35.77±0.66、37.76±1.11、27.52±1.58、23.81±1.03,P＜0.01。
　　4.七味姜黄方组小鼠肝组织匀浆ADH(U/ml)、ALDH(nmol/ml)、P450(nmol/ml)、SOD(U/ml)活性均较模型组高，其浓度分别为1.628±0.174、0.8398±0.06、0.6356±0.25、151.97±7.72,P均＜0.05。
　　5.七味姜黄方组小鼠脑组织匀浆β-EP(U/ml)、LENK(nmol/ml)含量均较模型组高，分别为1.549±0.25、1.681±0.21，P均＜0.05。
　　6.七味姜黄方组小鼠的血清ALT(U/L)、AST(U/L)、ALP(U/L)的活性较模型组显著降低，分别为75.25±17.77、181±20.52、121±4.96，P均＜0.05。
　　7.七味姜黄方组小鼠肝组织匀浆TNF-α(ng/l)、IL-8(pg/ml)水平，MDA(nmol/ml)含量均较模型组低，分别为1.1354±0.225、0.2836±0.02、3.08±1.3，P均＜0.05。
　　8.七味姜黄方组小鼠因酒精中毒所致的肝损伤较模型组显著减轻，X2=11.719,P=0.001,P＜0.01。
　　结论
　　1、七味姜黄方有较好的“解酒”作用:可显著延长酒精中毒导致的小鼠“醉酒”时间，显著缩短小鼠由“醉酒”状态到“清醒”状态的“醒酒”时间，显著提高小鼠的24h生存率。其机制可能与降低血中乙醇浓度;诱导小鼠肝组织ADH、ALDH、P450活性的增强，从而加速酒精的代谢;降低脑组织β-EP、LENK活性，从而减轻乙醇对中枢神经的抑制有关。
　　2、七味姜黄方具有良好的保肝作用:可显著降低急性酒精中毒模型小鼠血清ALT、AST、ALP活性。其作用机制可能与抑制小鼠肝组织TNF-α、IL-8、MDA的活性，增强SOD含量，从而减轻酒精所致肝脏自由基损伤及减少炎性介质的产生有关。

目录

摘要

英文缩略词表

引言

1．实验研究

1．1 实验一 七味姜黄方对急性酒精中毒小鼠解酒作用的观察

1．1．1 实验材料

1．1．2 实验方法

1．1．3 实验结果

1．1．4 结果

1．2 实验二 七味姜黄方对急性酒精中毒小鼠解酒机制的初步探讨

1．2．1 实验材料

1．2．2 实验方法

1．2．3 实验结果

1．2．4 结果

1．3 实验三 七味姜黄方对急性酒精中毒小鼠保肝机制的初步探讨

1．3．1 实验材料

1．3．2 实验方法

1．3．3 实验结果

1．3．4 结果

2．分析与讨论

2．1 实验设计

2．1．1 实验动物的选择

2．1．2 动物模型的建立

2．1．3 阳性药物的选择

2．2 七味姜黄方对急性酒精中毒小鼠解酒机制的初步探讨

2．2．1 七味姜黄方可改善急性酒精中毒小鼠一般情况

2．2．2 七味姜黄方可缩短急性酒精中毒小曩醉酒时间

2．2．3 七味姜黄方可降低急性酒精中毒小鼠血中乙醇浓度

2．2．4 七味姜黄方可提高急性酒糟中毒小鼠肝组织匀浆ADH、ALDH活性

2．2．5 七味姜黄方可提高急性酒精中毒小鼠肝组织匀浆P450活性

2．2．6 七味姜黄方可降低急性酒精中毒小鼠脑组织匀浆β-EP、LENK的水平

2．3 七味姜黄方对急性酒精中毒小鼠保肝作用机制的初步探讨

2．3．1 七味姜黄方可降低急性酒精中毒小鼠肝酶活性

2．3．2 七味姜黄方可提高急性酒糟中毒小鼠肝组织匀浆SOD活性、降低MDA含量

2．3．3 七味姜黄方可降低急性酒糟中毒小鼠肝组织匀浆TNF-α、IL-8的活性

3 结论

存在问题与展望

参考文献

附录：综述研究 急性酒精中毒的中西医研究现状

致谢

附录一：在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果

声明

附图1 造模1h后小鼠的醉酒情况

附图2 急性酒精中毒小鼠肝脏病理(HE染色200×)