甘草酸降低乌头碱致神经元毒性作用机制的研究

摘要

目的：研究揭示甘草酸与乌头碱成分配伍，降低神经元毒性的作用机制。
　　方法：采用细胞培养技术体外培养大鼠大脑皮质神经元，应用MTT法测定乌头碱与甘草酸分别以1︰1、1︰2、1︰0.5配伍给药后对原代培养的神经元存活率的影响；运用比浊法、细胞酶学方法、ELISA等考察甘草酸与乌头碱配伍给药后对原代培养的神经元内环境、细胞生物膜、能量代谢以及神经递质的影响，研究甘草酸拮抗乌头碱所致的神经元毒性的机制。
　　结果：乌头碱与甘草酸分别以1︰1、1︰2、1︰0.5配伍后能不同程度的拮抗乌头碱所引起的神经元死亡,降低细胞内 Na+、Mg2+含量以及Ca2+-Mg2+ATPase活力，升高细胞内K+、Ca2+含量和Na+-K+ATPase活力；增加培养液中LDH的释放量，升高细胞内ACP、MDA的活力，降低SOD的活力；降低细胞色素C氧化酶活力；降低神经递质乙酰胆碱释放量，增多GABA释放量。
　　结论：甘草酸与乌头碱以1∶1、1∶2、1∶0.5配伍作用神经元30min后，能不同程度的拮抗乌头碱所引起的神经元毒性，表明甘草酸对神经元有一定的保护作用。甘草酸拮抗乌头碱所致神经元毒性的机制主要表现在：抑制乌头碱所引起的内环境的紊乱，尤其是细胞内的Ca2+超载、保护生物膜、改善神经元能量代谢障碍、抗氧化损伤，并且能够调节神经递质释放。乌头碱与甘草酸以1∶2配伍，降低其神经元毒性的作用最佳。

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缩略词表

前言

实验研究

1 实验材料

1.1 实验药物

1.2 实验动物

1.3 实验试剂

1.4 实验仪器

2 实验方法与结果

2.1 SD大鼠乳鼠大脑皮质神经元的原代培养和鉴定

2.2 乌头碱、甘草酸及两者配伍对神经元存活率的影响

2.3 乌头碱、甘草酸及两者配伍对神经元内环境的影响

2.4 乌头碱、甘草酸及两者配伍对神经元生物膜的影响

2.5 乌头碱、甘草酸及两者配伍对神经元能量代谢的影响

2.6 乌头碱、甘草酸及两者配伍对神经递质释放量的影响

讨论

1 附子

2 甘草

3 附子与甘草配伍

4 乌头碱与甘草酸配伍

5 乌头碱、甘草酸及两者配伍对神经元作用机制

5.1 神经元的原代培养和鉴定

5.2 乌头碱、甘草酸及两者配伍对神经元存活率的影响

5.3 乌头碱、甘草酸及两者配伍对神经元内环境的影响

5.4 乌头碱、甘草酸及两者配伍对神经元生物膜的影响

5.5 乌头碱、甘草酸及两者配伍对神经元能量代谢的影响

5.6 乌头碱、甘草酸及两者配伍对神经递质释放的影响

结论

致谢

参考文献

附件1 综述:甘草酸的药理研究进展

附件2：

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