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河北省第五届实验动物学术交流会

召开年：2017
召开地：河北张家口
出版时间： 2017-07

主办单位：河北省实验动物学会

会议文集：河北省第五届实验动物学术交流会论文集

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1.实验动物生产管理系统初建
- 耿琦;王瑜;王莉;蔡月花;冯旭
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：目的：利用计算机技术构建信息管理系统(MIS,Management Information System),以实现对实验动物生产数据的自动化管理,改善实验动物生产设施内部工作和管理水平,提高养殖生产效率. 方法：本系统基于Visual Studio.NET2008平台进行开发,采用客户端/服务器(C/S)两层结构,以VB.NET作为系统开发语言,采用Microsoft SQL Server2005作为数据库系统. 结果：通过本系统对实验动物生产、供应数据进行统计分析,利用数据分析结果指导制定科学的饲养计划、合理安排动物生产. 结论：实现了大数据的有效管理分析,提高了饲养管理水平,简化了工作流程,提高了工作效率.
2.DNFB柱前衍生RP-HPLC测定大鼠脑组织20种氨基酸
- 王小琴;邹玉安;郭春燕;高圆圆
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：本文探讨了柱前衍生RP-HLC法测定大鼠脑组织中20种氨基酸含量的方法.以2,4-二硝基氟苯(DNFB)为衍生化试剂,采用Hypersil BDS C18 (4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,以甲醇作为流动相A,0.015 mol/L醋酸钠缓冲液(PH=6.0)作为流动相B,梯度洗脱,柱温30℃,流速为1ml/min,检测波长360nm.结果在30min内大鼠脑组织中的20种氨基酸可以得到完全分离,且各氨基酸浓度与峰面积之间具有良好的线性关系,回收率在88.3％-110％之间.该方法简便、快捷、灵敏、准确,有高度的稳定性和很好的重复性.可以为其他生物样品氨基酸测定提供参考.
3.PTZ诱导下SD大鼠与KM小鼠水迷宫结果的比较分析
- 曹福源;张静;张双
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：目的：通过比较SD大鼠和KM小鼠的水迷宫结果,为癫痫实验中的动物选择提供实验依据.方法：通过应用戊四氮(PTZ)腹腔注射SD大鼠和KM小鼠连续21天,进行癫痫点燃模型制作,成模后进行Morris水迷宫试验,并对数据进行统计分析.结果：PTZ诱导的癫痫模型中KM小鼠比较SD大鼠更适合进行认知功能中的记忆方向的研究,而SD大鼠可能更适合与进行环境探索方向的研究.
4.MT大鼠4周重复给药毒性试验肾脏和肠道毒性的病理表现
- MENG Xue-qiang;孟学强;WANG Xiao-ya;王晓雅;ZHANG Yan-fen;张彦芬;LIU Ke-jian;刘克剑;WANG Hong-tao;王宏涛
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：目的：观察SD大鼠尾静脉注射给予MT4周及停药恢复6周后可能出现的毒理学反应,确定毒性靶器官及其形态学特征. 方法：SD大鼠,MT设0.5、1.5、2.5mg/kg3个剂量组,另设赋形剂对照组(羟丙基-β-环糊精)和溶媒对照组(生理盐水),每组雌雄各16只.尾静脉注射给药,每周1次,共给药4次,恢复期6周.末次给药后每组每性别剖检动物各10只,剩余动物恢复期结束后剖检,做病理相关检查. 结果：MT1.5mg/kg组、2.5mg/kg组给药后动物出现厌食、消瘦、毛色无光、竖毛、倦怠等异常临床体征;心脏、肺、气管、肾、膀胱、唾液腺、胰腺、肝脏、食管、胃肠道、脾、胸腺、淋巴结、睾丸、前列腺、卵巢、子宫、造血及血液系统、骨均出现实质细胞坏死、矿化等毒性反应,各组各组织器官病变程度均呈现剂量依赖性.肾(1.5mg、2.5mg/kg组)和肠道(0.5mg、1.5mg、2.5mg/kg组)在恢复期病变程度加重,其余组织器官恢复正常. 结论：MT0.5mg、1.5mg、2.5mg/kg重复给药可导致SD大鼠出现严重的不可逆性肠道毒性.MT1.5mg、2.5mg/kg重复给药可导致SD大鼠有严重的不可逆性肾脏毒性.
5.浅议实验动物福利
- 刁立琴;高保栓;康莉;常秀玲;刘英绵;付钊
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：随着生物医学研究的快速发展,实验动物福利已经被越来越多的人关注.本文阐述了实验动物福利的内涵,从实验动物的运输、设施及环境条件、动物实验三个方面论述了重视实验动物福利的关注点,结合我国现状提出了建议.
6.脑缺血再灌注损伤模型的制备及其在中药多糖作用研究中应用的研究进展
- 刘爽;李江曼;肖光旭;张凯;李炜
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：近年来众多学者对小鼠脑缺血再灌注损伤模型的制备方法及中药多糖的保护作用进行了研究.模型多采用线栓法建立局灶性脑缺血再灌注模型.多糖成分可通过抑制神经细胞发生凋亡;自由基连锁反应;减少炎症因子的合成及分泌、炎症介质的释放,缓解氨基酸兴奋毒性及减轻能量代谢障碍等机制而发挥其对脑缺血再灌注损伤的保护作用.
7.注射用蜂毒过敏反应检查方法学研究
- 刘继锋;白玉;林立新;刘建芬
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：目的：建立注射用蜂毒过敏反应检查法.方法：以临床最大给药剂量0.008mg/kg及其的2倍、5倍、50倍剂量皮下给药,分别以其皮下给药的2倍剂量快速静脉注射,确定蜂毒对豚鼠的毒性反应剂量;以临床最大给药剂量及其的1/10、2倍剂量致敏、致敏的2倍剂量激发,确定蜂毒对豚鼠的过敏反应检查的限值.结果：蜂毒对豚鼠的无毒性反应剂量为0.017mg/kg;蜂毒对豚鼠的过敏反应限值为0.008mg/kg.结论：蜂毒的过敏反应检查可用氯化钠注射液制成每1mL中含0.005mg蜂毒的溶液,依《中国药典》2015版通则1147检查,应符合规定.
8.高脂血症动物模型的研究概况
- 张会欣;王宏涛;刘丽杰;金鑫
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：高脂血症及其并发症所引发的的危害越来越得到世界的关注.本文旨在对历年常用的高脂动物模型及其造模方法进行归纳、总结.选择理想的实验动物是开展相关实验的重要基础，研究者应该根据具体的实验条件、实验方法、实验目的、实验经费等各个方面来综合考虑选择适合的动物模型。在高脂血症动物模型中，大鼠、小鼠造模技术方法成熟，应用比较广泛;金黄地鼠、豚鼠和人类比较相似且来源广泛，是较好的实验动物选择;转基因动物具有明确的脂代谢紊乱遗传背景和人类相似，应用前景十分广阔。在造模方法方面，高脂饮食法和高脂乳剂灌胃法最为常用。应根据实验的具体情况，选择合适的高脂血症动物和造模方法，以期达到好的实验效果。
9.GLP动物实验室中的标识应用
- 马明峰
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：河北医科大学新药安全评价研究中心是河北省首家通过GLP认证的国家级实验室,笔者从2008年至今己多次参与GLP实验室的认证与复查工作,在CFDA认证与复查的过程中,深刻地体会到GLP实验室在医药领域的重要性和必要性,也积累了一些相关经验.笔者发现影响动物管理质量的因素很多，其中主要是设施设备、人员、物品、动物、环境、实验过程、资料信息等。但有一个细节往往被很多实验室忽视，就是实验室中的标识管理。各种标识的运用是否合理，不仅是动物实验能否顺利开展的一个重要因素，也能体现一个实验室的质量管理水平。在GLP认证现场核查中，各种标识的应用也是认证专家检查的重点内容之一，该中心根据本实验室的实际情况，针对设施、人员、动物、物品、仪器设备、安全等制定了相应的标识管理的标准规范。
10.高能氙光传递窗的杀菌效果研究
- BAI Bing;白冰;WANG Xin-hua;王西华;KANG Sheng;康生;ZHAO Yong;赵勇;ZHANG Cai-qin;张彩勤;ZHANG Hai;张海;SHI Chang-hong;师长宏
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：传递窗是屏障设施内用于传递物品的通道,其杀菌主要是通过紫外灯进行照射消毒,通常需要时间长,且消毒效果不稳定.氙光传递窗是利用脉冲氙气灯极化发光的原理,通过产生强烈的脉冲紫外光线,高效、快速对物品表面和空气中的各类微生物灭活,杀菌率达到95％以上.氙光传递窗有可能成为常规传递窗的替代品.
11.肉蔻五味中间体对慢性不可预知性轻度应激模型大鼠的影响
- WANG Jin;王金;ZHAO Yong-ming;赵永明;HEN Li-xia;沈丽霞;SHI Qing-wen;史清文
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：目的：观察自制肉蔻五味中间体对慢性不可预知性轻度应激模型大鼠的影响. 方法：SD大鼠60只,随机分为正常组、CUMS模型组、肉蔻五味高剂量组(200mg/kg)、肉蔻五味中剂量组(100mg/kg)、肉蔻五味低剂量组(50mg/kg)、阳性药物氟西汀组,给予慢性不可预知性轻度应激建立抑郁大鼠模型,同时给予药物.4周后进行强迫游泳实验、新奇抑制摄食等行为学实验,同时检测血清皮质酮水平. 结果：模型组大鼠强迫游泳实验总不动时间、新奇抑制摄食潜伏时间较正常组明显延长(P＜0.01),血清皮质酮含量升高(P＜0.01);与模型组相比,氟西汀组、肉蔻五味高、中、低剂量组强迫游泳实验总不动时间、新奇抑制摄食潜伏时间缩短(P＜0.01,P＜0.05),血清皮质酮水平降低(P＜0.01). 结论：肉蔻五味中间体具有抗抑郁作用.
12.小鼠诺如病毒抗体间接ELISA检测方法的建立
- Na Zhao;赵娜;Xinyi Zhao;赵歆伊;Fuyuan Cao;曹福源;Song Chen;陈松;Yanshu Zhang;张艳淑;Lin Yao;姚林;Shuang Li;李爽
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：目的：建立快速检测小鼠诺如病毒(murine norovirus,MNV)的血清学方法. 方法：本研究利用纯化的MNV毒株(HBTS-1509-CHN)作为包被抗原,建立了检测MNV血清抗体的间接ELISA方法,并且对各种检测条件进行了优化. 结果：优化后确定的抗原最适包被浓度为0.6μg/mL;血清的最佳稀释度为1∶200,作用时间为60min;酶标抗体最适稀释度为1∶2000,作用时间为30min;封闭液为5％脱脂奶.在优化条件下,阴阳性临界值判定标准为0.334.建立的间接ELISA方法对仙台病毒(SV40)、鼠痘病毒(ECTV)、小鼠呼肠孤病毒(Reo-3)、小鼠肝炎病毒(MHV)及小鼠脑脊髓炎病毒(TMEV)均无交叉反应,表明该方法具有良好的特异性.5份血清重复试验批内变异系数(CV％)和批间变异系数(CV％)最大为6.3％和6.41％,显示该方法具有很好的稳定性. 结论：本研究为MNV诊断试剂盒的研制奠定了基础,并为该病的诊断与流行病学调查提供有效的技术方法.
13.氨苄青霉素残留的免疫学检测方法分析
- Zhang Yanyu;张岩蔚;Li Hui;栗慧;Jin Yandan;金艳丹;He Kuo;何扩;Wei Dong;魏东
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：氨苄青霉素是畜牧养殖过程中常用的β-内酰胺类抗生素类药物之一,由于其可能被作为饲料添加剂使用,导致牲畜中抗生素残留超过最大残留允许量,因此,抗生素滥用的问题引起了广大人民的关注.为了检测抗生素残留量,目前已经研发持几类检测方法.本文主要对氨苄青霉素残留现象的近况及其检测方法的分析进行了综述.目前，国内外用于检测氨苄青霉素残留的方法有很多，主要有理化检测法、微生物检测法和免疫分析法。其中高效液相色谱法(HPLC)是一项快速、高效、准确、灵敏的检测技术，可用于分离高沸点、相对分子质量大、热稳定性差的有机化合物，也用于各种离子的分离分析，但是该方法前处理较复杂，所用仪器也较昂贵，需要专业的检测人员进行操作，不易进行普及；高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS)既可以进行准确的定性分析又可以进行精确定量，灵敏度也高，适用于残留药物的确证，但是难以实现大量样品的快速检测；微生物分析法虽然原理和操作过程简单，适合于药物的快速筛选，但是时间长、检测限过高、特异性差、灵敏度过低；免疫分析法操作简便、速度快、通量高，具有一定的灵敏度和特异性，适合于现场大量样品的快速筛选，因此被广泛应用。
14.淡豆豉与栀子配伍降低栀子肝毒性的作用机制研究
- 任艳青;甄亚钦;牛丽颖;王鑫国
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：目的：从动物及细胞水平观察淡豆豉与栀子配伍后对栀子肝毒性的影响,并探讨其可能的减毒机制. 方法：大鼠随机分为正常对照组、栀子组、淡豆豉栀子配伍组(1∶1)、栀子苷组,灌胃给予相应药物,每天1次,连续7天,测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)活性、总胆红素(TBIL)含量;计算肝脏系数,HE染色观察肝组织结构变化.取各组含药血清孵育人肝癌HepG2细胞,检测细胞存活率及氧化应激水平：胞内锰-超氧化物歧化酶(Mn-SOD)活性、活性氧(ROS)及丙二醛(MDA)含量. 结果：与正常对照组相比,栀子组及等量栀子苷组大鼠体重增长缓慢(P＜0.01),并伴有个别动物死亡;血清ALT、AST、ALP、TBIL水平显著升高(P＜0.01);肝脏系数明显上升(P＜0.01),HE染色可见明显的肝细胞肿胀坏死及炎细胞浸润;细胞存活率、Mn-SOD活性显著下降(P＜0.01);ROS水平、MDA含量显著上升(P＜0.01).与栀子组比较,淡豆豉栀子配伍组大鼠体重增长较快(P＜0.01);ALT、AST、ALP、TBIL水平及肝脏系数均显著下降(P＜0.05或P＜0.01),肝组织病理也未见明显异常;细胞存活率、Mn-SOD活性显著增高(P＜0.05或P＜0.01),ROS、MDA含量明显下降(P＜0.01). 结论：栀子大剂量应用具有明显的肝脏毒性,淡豆豉可通过降低肝细胞的氧化应激水平明显拮抗栀子引起的肝脏损伤.
15.一种新型空气除臭装置的研制
- WANG Wen-liang;王文良;LI Bai-long;李百龙;CHANG Bao-song;常宝松;KANG Sheng;康生;LI Qiao-ling;李巧伶;LI Xue-yong;李学勇
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：目的：研发一种新型空气除臭装置,以减少实验动物设施排气中的恶臭物质对周围环境的影响.方法：通过水喷淋与空气扰流技术的结合,研制出新型空气除臭装置.通过检测除臭前、后排气和水中的恶臭物质含量,评价空气除臭装置是否成功.结果：与除臭前相比,除臭后排气中的氨和硫化氢含量明显降低,而水中氨氮和硫化物的含量明显升高.结论：新型空气除臭装置可有效减少实验动物设施排气中的恶臭物质含量,具有高效、节能、环保、成本低和维护简单的优点,可以推广应用于实验动物设施建设之中.
16.ω3多不饱和脂肪酸减轻失血休克大鼠肾组织损伤与细胞自噬的作用
- 郑杰;刘家琪;陈柯桦;高向向;王雪;张帅;郭亚雄;张玉平;赵自刚
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：目的：探讨ω3多不饱和脂肪酸(ω-3PUFAs)对失血性休克肾组织损伤与细胞自噬的作用. 方法：常规方法建立失血性休克大鼠模型,引流休克肠淋巴液(PHSML);48只大鼠随机均分为8组：假手术组(sham)、Sham+ω-3PuFAs组、Shock组、Shock+ω-3PuFAs组、Shock+PHSML+ω-3PuFAs组、Shock+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组、Shock+ω-3PUFAs+雷帕霉素(RAPA)组,Shock+ω-3PUFAs+3-MA+PHSML组.Shock组、Shock+ω-3PuFAs组、Shock+PHSML+ω-3PuFAs组、Shock+3-MA组、Shock+ω-3PUFAs+RAPA组、Shock+ω-3PUFAs+PHSML+3-MA组建立清醒失血性休克模型,维持低血压60min后按照不同的方式行液体复苏.在液体复苏结束后3h或相应时间点,留取全血、肾组织标本,检测反映肾损伤的生化指标,观察肾组织形态,免疫组织化学染色检测自噬标志物微管相关蛋白轻链3(LC3II)表达. 结果：失血性休克可导致大鼠肾脏出现明显的组织形态学损伤;ω-3PUFAs和3-MA治疗均可显著改善失血性休克导致的肾脏组织形态学损伤;静脉输注PHSML以及RAPA干预均可显著降低ω-3PUFAs对失血性休克大鼠肾组织结构的保护作用.失血性休克导致大鼠与肾损伤相关的指标血浆Urea、Cre、Cys-c、NGAL水平显著高于Sham组与Sham+ω-3PUFAs组;ω-3PUFAs治疗降低了失血性休克大鼠血浆Urea、Cre、Cys-c、NGAL水平;3-MA治疗降低了失血性休克大鼠血浆Urea、Cys-c、NGAL水平;静脉输入PHSML以及RAPA干预废除了ω-3PUFAs降低失血性休克大鼠血浆Urea、Cre、Cys-c、NGAL水平的作用;3-MA治疗进一步抑制了静脉输入PHSML对提高大鼠浆NGAL水平的负性作用.免疫组化染色结果显示,失血性休克导致大鼠肾脏组织中LC3II表达显著增加;ω-3PUFAs和3-MA治疗均可显著抑制失血性休克导致的肾小管上皮细胞LC3II阳性表达.静脉输注PHSML和RAPA干预均可显著降低ω-3PUFAs对失血性休克大鼠肾组织细胞自噬的抑制效应. 结论：ω-3PUFAs减轻了失血性休克后大鼠的肾组织损伤,其作用机制可能与降低细胞自噬以及PHSML回流有关.
17.红灵粉增强免疫力的实验研究
- LI Xingqin;李兴琴;Zhang Jungang;张俊刚;XU ying;徐颖;Hong Lihua;洪丽华;YANG Weichao;杨卫超;ZUO Paixin;左派欣
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：目的：研究红灵粉对小鼠免疫功能的影响.方法：经口给予KM小鼠0.5、1.0、1.5g/kg.bw剂量的红灵粉30d后,检测抗体生成细胞数、碳廓清能力、ConA诱导的脾淋巴细胞转化能力,NK细胞活性指标.结果：红灵粉对小鼠的碳廓清能力无影响,能增强小鼠淋巴细胞转化功能,能提高小鼠脾脏抗体生成细胞数,能增强小鼠NK细胞活性.结论：红灵粉能增强小鼠免疫力.
18.贞芝片遗传毒性研究
- ZHANG Jungang;张俊刚;XU Ying;除颖;HU Yawei;呼亚伟;GUO Jinming;郭金铭
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：目的：研究贞芝片的遗传毒性,为贞芝片的开发利用提供实验依据.方法：按常规方法完成Ames试验、小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验.结果：Ames试验,贞芝片各剂量组的回变菌落数未超过阴性对照组自发回变菌落数的1倍以上。结论：Ames试验是应用最广泛的基因突变检测方法，可以反映遗传物质受损伤的情况。小鼠嗜多染红细胞微核试验结果可以显示染色体损伤变化的简便有效的方法，而小鼠精子畸形试验检测化合物对雄性生殖细胞的的遗传毒性。
19.姜黄素对人胃癌移植瘤裸鼠肿瘤生长及FasmRNA表达的影响
- Wang Guang-liang;王光亮;Zhang Jun-hui;张俊会
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：目的：研究姜黄素对人胃癌移植瘤裸鼠肿瘤生长和FasmRNA表达的影响.方法：以SGC-7901胃癌细胞株建立胃癌裸鼠原位移植瘤模型,将裸鼠随机分为0.9％氯化钠溶液组(对照组)及姜黄素组.观察裸小鼠胃癌种植后肿瘤生长情况,用原位杂交法检测肿瘤组织中FasmRNA表达的变化.结果：所有荷瘤鼠胃壁均有肿瘤生长,荷瘤率100％,姜黄素组瘤重(2.67±0.85)g,对照组瘤重(4.13±1.07)g,P＜0.05,抑瘤率为35.35％;姜黄素治疗组肿瘤组织中FasmRNA表达的阳性率明显高于对照组.结论：姜黄素具有抑制人胃癌裸鼠原位移植瘤生长的作用,其作用机制可能与上调FasmRNA的表达有关.
20.大肠杆菌分子分型方法研究进展
- Jin Xiaoci;靳晓次;高志嵩;Gao Zhisong;An Wenting;安雯婷;Guo Lina;郭丽娜;Jiang Le;姜乐;Xu Shan;徐珊;张朝军;Zhang Chaojun;Yu Fengxue;于风雪
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：大肠杆菌是一种条件致病菌,既是家禽体内正常的肠道菌群又是致病菌,不同类型的大肠杆菌其致病力不同.大肠杆菌能引起家禽局部或全身感染,给养殖户带来巨大的经济损失.分子分型方法对于确定感染来源和途径,检测交叉污染和流行菌株方面非常有效.本文对大肠杆菌分子分型方法的研究进行综述.分子分型方法能够弥补表型分型的不足，理想的分型方法需要具备以下的特征:100%的分型能力;高分辨能力;良好的重复性;操作简便、节约时间，并且费用低。然而，所有的分子分型方法都存在一个很大的局限性。总之，低成本化、自动化、标准化的分子分型方法是细菌分型研究的发展方向。
21.高效液相色谱法测定大鼠血浆中吴茱萸碱含量的研究
- 张季;侯勇;薛贵平;王树
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：目的：建立高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定小鼠血浆中吴茱萸碱含量. 方法：固定相为色谱柱(diamonsil C18250×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水(90∶10),流速为1.0ml·min-1,内标为大黄酚,检测波长为225nm,柱温为30C,在以上色谱条件下测定吴茱萸碱在小鼠体内的药物浓度. 结果：吴茱萸碱在0.02～0.5μg·ml-1范围内线性关系良好,线性回归方程为Y=19.977X+0.1402(R2=0.9978,n=7),平均回收率为101.03％,平均相对标准偏差(RSD)为1.78％. 结论：本方法操作简便、快速、准确、灵敏度高,专属性强,稳定性好,适用于小鼠血浆中吴茱萸碱的含量测定.
22.慢性神经退行性疾病转基因小鼠模型的研究进展
- Gao Zhisong;高志嵩;靳晓次;Jin Xiaoci;An Wenting;安雯婷;Guo Lina;郭丽娜;Jiang Le;姜乐;Xu Shan;徐珊;张朝军;Zhang Chaojun;Yu Fengxue;于风雪
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：慢性神经退行性疾病以神经元变性缺失为主要病理特征,最终表现出运动和功能障碍.其发病机制尚不清楚,无有效治疗药物.慢性神经退行性疾病转基因小鼠模型为这类疾病的机制研究和治疗药物筛选提供了依据,本文将介绍几种主要的慢性神经退行性疾病转基因小鼠模型在国内外的研究现状.目前应用最火热的CRISPR-Cas9技术更是为人们打开了通往基因编辑世界的大门。与传统的实验动物模型相比，转基因动物模型具有不可比拟的优势，为疾病机制研究和治疗药物筛选提供了大量的实验数据。
23.阿尔茨海默病动物模型研究进展
- LIU Hong-bin;刘红彬;WU Hai-xia;武海霞;SHEN Li-xia;沈丽霞
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：阿尔茨海默病(Alzheimer's Disease,AD)是一种慢性中枢神经系统退行性疾病.AD的病因不明、发病机制复杂,因此动物模型的建立对探索其发病机制及寻找防治阿尔茨海默病的药物具有重要作用.研究人员从模拟阿尔茨海默病的症状和病理变化等方面制作动物模型,其中转基因模型已成为研究热点.本文就阿尔茨海默病动物模型的研究现状进行简要综述.
24.产生人源化Alu RNA工程菌的构建和表达
- 王秀芳;张焕铃;刘超;刘树锋;尹舒贤;赵月华;吕占军
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：目的：外源RNA导入细胞特异性上调或下调基因表达,目前外源RNA的制备方法主要有化学合成,体外转录,细胞提取.Alu DNA和Alu RNA是人基因组和转录组中最重要的成分,参与基因表达调节.建立工程菌制备基因工程人源Alu RNA(Alu RNA)的技术,所提取的RNA满足一般生物学实验要求. 方法和结果：将人Alu序列插入pET-28α质粒(pET),转化BL-21菌,探讨不同条件对Alu RNA产生的影响.用pET-Alu×8质粒转化BMBL-21(DE3)感受态细胞(简称DE3),异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导减弱细菌生长;用IPTG诱导2,4,6,8,10,12,14和16小时,用northern杂交检测Alu RNA的量,发现诱导4小时RNA产量最高;1,2,4,8,14拷贝的Alu序列插入pET,转化DE3菌,随拷贝数增加Alu RNA产量上升;pET-Alu×8DE3菌液,不加IPTG诱导,没有Alu RNA产生,0.1-0.4mg/ml IPTG诱导时,Alu RNA产量没有区别,偏离该浓度时,RNA产量略下降;34℃,37℃和40℃培养pET-Alu×8DE3菌液,IPTG诱导4小时,在37℃培养条件下,RNA产量最高;将pET-Alu×8质粒转化3种BL-21感受态细胞,包括DE3,BMBL21-DE3-pLysS(简称pLysS)和Trans BL21(简称TransBL),发现转化DE3感受态细胞后Alu RNA产量最高. 结论：本文中建立了基因工程制备Alu RNA的技术：pET-Alu×14质粒转化DE3菌,37℃培养至600nm OD1.0时,加入终浓度为0.2mg/ml IPTG诱导4小时,获得最高Alu RNA产量,纯Alu RNA在提取的RNA中的含量达15.8％,每100ml菌液纯Alu RNA产量平均为0.46mg.
25.脑缺血预处理对大鼠脑组织及血清氨基酸含量的影响
- 王小琴;邹玉安;薛茜;田莉;魏孟琳
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：目的：通过观察脑缺血预处理(cerebral ischemic preconditioning,CIP)后大鼠脑组织及血清中天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、γ-氨基丁酸(GABA)、甘氨酸(Gly)含量的变化,来探讨Glu、Asp、GABA、Gly、TNF-α在脑缺血耐受诱导中的作用. 方法：将90只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为正常对照组,假手术组,CIP组,各组又分别分为1h、3h、6h、12h、24h5个亚组,采用高效液相色谱法测定不同时间点脑组织及血清中Glu、Asp、GABA、Gly的含量. 结果：与假手术组比较,CIP组脑组织与血清中Glu、Asp、GABA、Gly含量1h开始增高(P＜0.05或P＜0.01),1h或3h达高峰,3h或6h后开始逐渐下降,24h恢复正常水平. 结论：CIP后引起适度升高的Glu、Asp、GABA、Gly可能是早期脑缺血耐受机制的启动物质.
26.大黄酚对LPS诱导的神经炎症小鼠学习记忆的影响
- 吴苗苗;田园;张丹参
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：目的：探讨大黄酚对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠神经炎症的影响. 方法：健康昆明种小鼠30只,随机分为正常组,模型组,大黄酚治疗组(10.0、1.0、0.1mg·kg-1)共5组,每组6只.模型组和大黄酚治疗组小鼠通过单次腹腔注射LPS(1.0mg·kg-1)建立小鼠神经炎症模型.1d后,大黄酚治疗组的小鼠分别腹腔注射给予10.0、1.0、0.1mg·kg-1的大黄酚.正常组和模型组给予相应剂量的生理盐水.7d后进行Morris水迷宫实验,结束后检测海马中TNF-α含量及血清中NO含量. 结果：模型组小鼠逃避潜伏时间比正常组显著增多,大黄酚治疗组小鼠逃避潜伏时间比模型组显著减少.模型组的小鼠海马TNF-α含量明显增高,而大黄酚治疗组的TNF-α含量则有不同程度的降低,含量降低程度随大黄酚剂量的增加而增加.模型组小鼠血清中NO水平明显升高,大黄酚治疗组血清中NO水平则有不同程度的降低. 结论：大黄酚对LPS诱导的神经炎症小鼠学习记忆损伤具有改善作用,可能与抑制TNF-α及NO水平相关.
27.聚酯/铝/流延聚丙烯药用复合膜的异常毒性试验研究
- 康莉;高保栓;刁立琴;付钊;刘英绵;常秀玲
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：目的：测试国内不同厂家生产的聚酯/铝/流延聚丙烯药用复合膜是否有异常毒性.方法：以KM小鼠为实验动物,采用静脉注射法,经尾静脉分别给予动物样品供试液0.5mL.在给药后48小时内观察全部小鼠出现的死亡情况.结果：8批样品在试验期内,所有小鼠均未出现死亡.结论：在本试验条件下,8批聚酯/铝/流延聚丙烯药用复合膜均未发现异常毒性;表明该产品无毒、安全,在其生产工艺过程中污染外源性毒性物质及可能存在意外的不安全因素的风险较低.
28.刍议药包材的异常毒性检查和实验动物福利
- 高保栓;刁立琴;康莉;常秀玲;刘英绵;付钊
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：目的：研究2015版YBB标准中异常毒性试验的变化,旨在关注保障实验动物福利.方法：比较新旧YBB标准.结果：发现2015版YBB标准除了滴眼剂瓶和聚乙烯/铝/聚乙烯复合药用软膏管外,其他塑料瓶和复合膜类均新增加了空白对照,而药用铝箔和硬片类、药用低密度聚乙烯膜、袋均未增加空白对照.结论：药包材的异常毒性检查应按非生物制品试验,认为不需要设立空白对照.建议在相关的药包材标准修订、更新时考虑舍去异常毒性试验的空白对照.
29.原花青素对SD大鼠体重的影响
- 陈则永;陈松;李卫红;曹福源;赵娜;李爽;姚林;陈贵良
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：目的：探讨服用原花青素对于大鼠体重的影响. 方法：选取40只雄性SD大鼠随机分为对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组10只,正常饲料喂养,低剂量组、中剂量组和高剂量组同时加用原花青素按50mg/kg·d/只、100mg/kg·d/只、200mg/kg·d/只给予葡萄籽原花青素,对照组给予等容蒸馏水,连续给药30天,记录大鼠日进食量,观察各组大鼠体重变化,实验结束后经腹主动脉取血进行甘油三酯的检验. 结果：中剂量组和高剂量组大鼠30天间平均日日进食量明显低于对照组和低剂量组,差异显著.中剂量组和高剂量组大鼠30天后甘油三酯与对照组和低剂量组比较,差异显著.中剂量组和高剂量组大鼠30天后体重明显低于对照组和低剂量组,差异显著. 结论：原花青素能够通过减少大鼠的日进食量来有效降低甘油三酯的含量同时降低大鼠体重增长.
30.兔疥螨病的分析防治
- 李卫红;陈贵良;姚林
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：兔是一种常用的实验动物之一,在医学试验、教学和科研过程中被广泛使用.在兔的饲养过程中,疥螨病是一种常见、常发的寄生虫病,常发生在兔的头部、四肢等处,引起兔皮肤发痒,兔表现为摩擦,烦躁不安,影响正常采食和休息,并使胃肠消化、吸收机能降低,病兔消瘦,严重者死亡.影响教学、科研及试验结果,所以本文就兔疥螨病的相关内容进行介绍.对症状不明显的，需要用采取健康与患部交界处的痴皮，在皮肤患部和健康部交界处，用手术刀向皮肤深处刮取皮屑，直到稍微出血为止，检查有无虫体的方法做出诊断。治疗疥瞒病时坚持彻底检查，洗浴去痴，重复用药，环境消毒的措施。
31.雾霾对冬季大学校园空气微生物浓度的影响
- 张宏馨;化轶男;刘欢
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：目的：了解雾霾对校园环境空气中微生物分布的影响,为校园环境卫生治理、疾病防控及个人对雾霾的防护提供理论依据. 方法：随机抽取河北大学医学部室外(医苑广场、医苑路、操场)和室内(食堂、教室、学生宿舍)等6个人员主要活动场所,在无雾霾、轻度雾霾、中度雾霾及重度雾霾天气状况下按自然沉降法分别采样,测定空气中细菌和霉菌菌落总数. 结果：随着雾霾程度的加重,室外空气中细菌、霉菌菌落总数均显著高于室内(P＜0.05);室外各采样点细菌、霉菌浓度均随雾霾程度加重而升高,其中医苑路升高最为显著(P＜0.05),室内各采样点除学生宿舍内细菌、霉菌浓度在重度雾霾天明显高于其他天气状况外,食堂、教室随天气变化不明显(P＞0.05). 结论：雾霾程度加重时校园室外空气中细菌、霉菌浓度均随之升高,而室内空气微生物浓度与雾霾程度无关.
32.野生大鼠球虫分离及人工接种大鼠感染球虫模型的建立
- 苏利波;伍美;刘超;张力;谢英;张焕铃;徐增年;刘树锋
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：在大鼠、小鼠、地鼠、豚鼠及家兔实验动物中,艾美耳球虫种类繁多.寄生频度又高,有些具有明显的病原性,危害相当大.所列的实验小动物中,除家兔艾美球虫曾有过较为详细的报道外,其它实验动物研究的甚少.近几年各地区都在不断进行实验动物质量检测,但很少涉及到大鼠的球虫.可以说大鼠的球虫分布和感染状况目前还不是特别清楚.本实验从野生大鼠体内分离球虫并通过接种两只健康清洁级实验大鼠进行扩繁,待排卵后收集卵囊,孢子化后,计算卵囊数,达到足够量时,统计卵囊排出量计数并通过卵囊的形态,大小,颜色等指标初步判定感染球虫的种类.
33.多杀巴氏杆菌、支气管鲍特杆菌、支原体和肺炎克雷伯杆菌多重PCR方法的建立与应用
- Zhu Yan-bo;祝岩波;徐增年;Xu Zeng-nian;Wei Shi-jin;魏世锦;Zheng Long;郑龙;You Hong-yu;尤红煜;Meng Yu-rong;孟钰榕;Liu Fu-ying;刘福英;梁晓亮;Liang Xiao-liang;Wang Jun-xia;王俊霞
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：目的：建立快速检测多杀巴氏杆菌、支气管鲍特杆菌、支原体和肺炎克雷伯杆菌4种实验动物病原体的多重PCR方法. 方法：根据Genebank基因设计出特异性引物;经过多重PCR的优化,特异性和敏感性的检测,建立多重PCR体系.应用该PCR体系检测人工感染样本和实验动物的气管分泌物,并与传统方法做对比. 结果：多重PCR扩增出多杀巴氏杆菌(356bp)、支气管鲍特杆菌(237bp)、支原体(266bp)和肺炎克雷伯杆菌(142bp)的目的条带.肺炎克雷伯杆菌敏感性为10pg,多杀巴氏杆菌、支气管鲍特杆菌、支原体敏感性为1pg,特异性检测未从其他病原菌中检测出目的条带.应用建立的多重PCR体系检测人工感染样本的不同组合,45只实验动物气管检测出15只多杀巴氏杆菌阳性,9只肺支原体阳性,但传统培养方法和血清学方法未检测出阳性标本. 结论：本文建立的多重PCR方法操作简单、快速、特异性强、灵敏度高,能够实现对多杀巴氏杆菌、支气管鲍特杆菌、支原体和肺炎克雷伯杆菌4种实验动物病原体的快速检测.
34.大黄酚对脑缺血/再灌注小鼠脑组织NO的影响和断头抗缺氧作用
- WANG Shu;王树;ZHANG Hai-hong;张海红;ZHANG Ji;张季;XUE Gui-ping;薛贵平;HOU Yong;侯勇
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：目的：研究大黄酚(chrysophanol,Chry)对脑缺血/再灌注损伤后小鼠脑组织内NO的影响及其断头抗缺氧作用,对大黄酚在脑缺血-再灌注损伤时分子生物学的保护作用机制作进一步探讨. 方法：通过改良后的Himori法对小鼠两侧颈总动脉作短暂性阻断,制作小鼠脑缺血-再灌注损伤实验模型,测定脑内NO的含量;并进行断头耐缺氧实验. 结果：大黄酚能明显减少脑缺血/再灌注小鼠脑内NO含量(Chry10.0mg.kg-1P＜0.05,Chry1.0mg.kg-1P＜0.01);明显延长脑缺血/再灌注小鼠断头耐缺氧的喘息时间(Chry10.0,1.0mg.kg-1P＜0.01,Chry0.1mg.kg-1P＜0.05). 结论：大黄酚可通过减少脑内NO含量和抗缺氧作用对脑缺血/再灌注损伤起到保护效应.
35.牡荆苷对脑缺血再灌注大鼠脑损伤保护作用及其机制研究
- DU Yun-guang;杜云广;CAO Xin-xin;曹欣欣;WANG Xiao-ru;王晓茹;WANG Shu-hua;王书华
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：目的：本研究旨在探讨牡荆苷对脑缺血再灌注大鼠脑损伤的保护作用及其作用机制. 方法：采用Longa改良线栓法建立大鼠脑缺血再灌注(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型.实验随机分为假手术组,模型组,模型+依达拉奉阳性对照组(3.24μmol·kg-1),模型+牡荆苷(1.62,3.24,6.48μmol·kg-1)不同剂量组,大鼠缺血2h再灌注1h后腹腔注射给药,连续给药时间为1d和3d.2,3,5-氯化三苯基四氮唑(Triphenyltetrazolium chloride,TTC)测大鼠脑梗死体积,干湿重法测脑组织含水量,相应试剂盒法检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、活性氧(reactive oxygen species,ROS)和丙二醛(methane dicarboxylic aldehyde,MDA)产量,免疫组化检测水孔通道蛋白-4(Aquaporin-4,AQP-4)阳性细胞表达,RT-qPCR检测Toll样受体4(toll-like receptor4,TLR-4)和核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)mRNA表达水平,ELISA测定肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量,HE染色观察大鼠神经细胞的形态. 结果：与假手术组相比,模型组大鼠再灌注后缺血侧脑组织出现明显的梗死灶,含水量明显增多,SOD活性明显降低,ROS和MDA含量明显升高(P＜0.01,P＜0.05);与模型组相比,给药组大鼠脑组织含水量降低,抗氧化酶活性升高,抗炎作用显著,显著改善脑缺血再灌注大鼠细胞病理形态,在一定剂量范围内,呈剂量依赖性;与依达拉奉对照组相比,牡荆苷中、低剂量组作用较弱(P＜0.01,P＜0.05);牡荆苷高剂量组与依达拉奉作用相当,无显著性差异. 结论：牡荆苷对脑缺血再灌注大鼠脑损伤的保护作用可能是通过抗氧化应激和抗炎作用实现的.
36.杏渣和米糠混合青贮饲料感官品质的研究
- JIN Ling-pin;靳玲品;LI Xiu-hua;李秀花
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：目的：试验通过感官品质评分研究杏渣和米糠混合青贮的效果.方法：试验设杏渣单独青贮、90％杏渣+10％米糠、80％杏渣+20％米糠和70％杏渣+30％米糠4个处理组,青贮后第60d打开青贮袋取样,评定青贮饲料发酵品质.结果：杏渣单独青贮发酵质量一般.添加米糠后混合青贮料的干物质含量显著提高(P＜0.05),pH值显著降低(P＜0.05).结论：建议以80％杏渣与20％米糠混合青贮较为适宜.
37.养阴活血方药对糖尿病大鼠肾脏线粒体氧化应激损伤的影响
- LIANG Jinhuan;梁金环;YANG Xiaohui;杨晓晖;ZHAO Lina;赵利娜;MENG Chenyang;孟晨阳;CUI Yunpeng;崔云鹏;LIU Boling;刘伯玲
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：目的：探讨养阴活血方药对糖尿病大鼠肾脏线粒体氧化应激损伤的影响及相关机制. 方法：SD大鼠随机分为3组,正常对照组(NC组)、糖尿病对照组(DM组)和养阴活血方药治疗组(BYPBR组),后两组应用链脲佐菌素(STZ)制造糖尿病大鼠模型.NYPBR组大鼠给予养阴活血方药防治.10周末,测定各组大鼠血糖、体重、肾重、血肌酐(Scr)、24h尿蛋白,检测肾脏线粒体丙二醛(MDA)含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、一氧化氮合酶(NOS)、Na+K+-ATP酶、Ca2+Mg2+-ATP酶和琥珀酸脱氢酶(SDH)的活性,透射电镜观察肾组织超微结构变化. 结果：与NC组相比,DM组大鼠肾脏线粒体MDA(1.34±0.24nmol/mgprot)、GSH-PX(57.63±4.91活力单位)及NOS(0.81±0.07U/mgprot)明显升高(均P＜0.01),Na-K--ATP酶(1.40±0.10μmolPi/mgprot/hour)、Ca2-Mg2--ATP酶(1.43±0.10μmolPi/mgprot/hour)和SDH(24.33±2.31U/mgprot)显著降低(均P＜0.01),肾功能减退,肾脏组织发生病理性改变,线粒体出现损伤.养阴活血方药可显著改善上述变化,NYPBR组的MDA(0.81±0.08nmol/mgprot)、GSH-Px(50.55±5.86活力单位)及NOS(0.72土0.07U/mgprot)均低于DM组(P＜0.01,P＜0.05,P＜0.05),Na+K+-ATP酶(1.66±0.18μmolPi/mgprot/hour)、Ca2+Mg2+-ATP酶(1.76±0.20μmolPi/mgprot/hour)和SDH(40.92±3.77U/mgprot)明显上升(P＜0.05,P＜0.05,P＜0.01). 结论：糖尿病大鼠肾脏线粒体存在明显的氧化应激损伤,NYPBR可显著减轻糖尿病大鼠肾脏线粒体损伤,此作用可能与降低NOS活性,提高SDH、Na+K+-ATP酶和Ca2+Mg2+-ATP酶活性有关.
38.端粒酶逆转录酶对神经系统疾病调控的研究进展
- LI Shuang;李爽;CAO Fuyuan;曹福源;CHEN Song;陈松;CHEN Guiliang;陈贵良;YAO Lin;姚林;ZHAO Na;赵娜
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：端粒酶逆转录酶(Telomerase reverse transcriptase,TERT)作为端粒酶的核心组分之一,具有逆转录酶活性,是最重要的调节因子并调节端粒酶活性.同时,TERT具有神经保护效应,如在老年痴呆、脑缺血缺氧损伤、抑郁症、脑肿瘤等疾病中发挥调节作用.本文对TERT在几种神经系统疾病中的调控作用及机制进行阐述,并为探讨神经系统发病机制及寻找药物靶标提供新的方向.
39.医学实验中的动物福利问题探讨
- Shuling Yang;杨树玲;Pengfei Wang;王鹏飞;Zhuo Liu;刘卓;Yan Qu;曲雁
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：实验动物为人类的科学工作和医学研究做出了巨大贡献,但有些人在实验过程中无视其痛苦与需求,实验过程中不能按照正确的方法抓捕保定、麻醉药应用不合理、处死方法无视动物痛苦,不仅影响实验动物自身的身心健康,同时影响到实验结果的准确性与科学性.针对存在的问题,建议通过加强动物伦理教育、加大宣传力度、增加专业训练等方式,增强实验动物福利意识,保证动物权益.
40.杆菌肽锌对塞北兔生产性能的影响
- HAN Yu;韩昱
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：为探讨杆菌肽锌对塞北兔生产性能的影响,本试验选取30日龄塞北兔断奶幼兔40只,体重相近、公母各半,随机分成4组,每组10只,即试验A组、B组、C组,对照D组,在试验组A、B、C的基础日粮中分别添加40mg/kg、80mg/kg、 120mg/kg杆菌肽锌,测定兔生产性能,并对其发病率和死亡率进行统计.结果表明,与对照组相比,试验组增重提高,C组相对D组增重率提高最多(8.3％),B组次之(8.2％),A组增重率最小(2.7％),B组、C组与D组差异极显著(P＜0.01),A组与D组差异不显著(P＞0.05),B组和C组差异不显著(P＞0.05);另外,与对照组相比,B组料重比降低最多(5.20％),C组次之(4.80％),A组最小(0.08％):另外发现基础日粮中添加杆菌肽锌可降低幼兔发病率和死亡率,尤其试验B组效果最好.综上分析,日粮中添加杆菌肽锌可以提高塞北兔的生产性能,其中80mg/kg添加量效果最好.
41.冠心宁注射液安全性实验研究
- Liang Yanjie;梁彦杰;Dong Yazhong;董亚中;Fan Caixuan;范彩绚
- 《河北省第五届实验动物学术交流会》 | 2017年
摘要：目的：对冠心宁注射液进行肌肉刺激性、血管刺激性、全身过敏性及溶血性实验,以评价其用药的安全性. 方法：在肌肉刺激性实验中,主要观察2只家兔注射冠心宁注射液后48h的变化.在血管刺激性实验中,主要观察3只家兔分别连续5d注射冠心宁注射液及0.9％氯化钠注射液的变化.在全身过敏实验中,6只豚鼠隔日3次腹腔注射冠心宁注射液,于首次致敏后第14d和第21d分别静脉注射冠心宁注射液,观察30mi n内动物的变化.在溶血性实验中,观察本品在4h内有无溶血和聚集现象. 结果：冠心宁注射液对家兔股四头肌无刺激作用,对家兔耳缘静脉无刺激作用,对豚鼠未见过敏反应,家兔无溶血现象. 结论：冠心宁注射液的动物实验结果表明其安全可靠.