电针调整慢性疲劳大鼠体温及HPAA昼夜节律的中枢机制研究

摘要

目的：观察电针对慢性疲劳大鼠体温、血浆CORT及CRH昼夜节律的影响,探索电针调节CFS体温及HPAA昼夜节律的中枢机制。
　　方法：将健康SD大鼠随机分为8个组：空白组、模型组、模针组、假注射组、CRF组、CRF电针组、CRFA组、CRFA电针组。选用白天强迫冷水游泳和夜间慢性束缚的方法建模。采用力竭游泳、水迷宫实验检验模型，次日对假注射组、CRF组、CRF电针组、CRFA组、CRFA电针组大鼠侧脑室微量注射。微量注射次日对模针组、CRF电针组、CRFA电针组进行电针治疗。电针治疗结束次日检测行为学指标并按0:00、2:00、4:00、6:00、8:00、10:00、12:00、14:00、16:00、18:00、20:00、22:00十二个不同时间点检测各组大鼠24小时动态体温变化，治疗后体温检测结束次日分别按0:00、4:00、8：00、12:00、16:00、20:00六个不同时间点检测大鼠血浆CORT及下丘脑室旁核CRH阳性细胞表达昼夜节律变化。
　　结果：①行为学指标：造模后，模型组、模针组、假注射组、CRF组、CRF电针组、CRFA组、CRFA电针组力竭游泳时间较空白组缩短（P＜0.05），水迷宫潜伏期时间较空白组延长（P＜0.05）；治疗后，模针组、CRF组、CRF电针组力竭游泳时间较模型组延长（P＜0.05），水迷宫潜伏期时间较模型组缩短（P＜0.05）；CRF组与CRFA组比较力竭游泳时间延长（P＜0.05），水迷宫潜伏期时间缩短（P＜0.05）；CRF电针组与CRFA电针组比较力竭游泳时间延长（P＜0.05），潜伏期时间缩短（P＜0.05）。
　　②体温昼夜节律检测结果：治疗后模针组、CRF电针组、空白组、模型组、假注射组、CRF组体温明显存在昼夜节律（P＜0.05）；CRFA电针组、CRFA组体温昼夜节律消失（P＞0.05）；大鼠休眠期体温波动幅度较大，大鼠清醒期体温波动幅度较小。
　　③血浆CORT昼夜节律检测结果：治疗后模针组、CRF电针组、空白组、CRF组血浆CORT存在明显昼夜节律（P＜0.05）；CRFA电针组、模型组、假注射组、CRFA组血浆CORT昼夜节律消失（P＞0.05）；大鼠清醒期血浆CORT波动幅度较大，大鼠休眠期血浆CORT波动幅度较小。
　　④下丘脑室旁核CRH阳性表达光密度昼夜节律检测结果：治疗后模针组、CRF电针组、空白组、CRF组下丘脑CRH光密度存在明显昼夜节律（P＜0.05）；CRFA电针组、模型组、假注射组、CRFA组下丘脑CRH光密度昼夜节律消失（P＞0.05）；
　　各组下丘脑室旁核CRH阳性表达光密度在不同时间点无明显差异，无统计学意义。
　　结论：多因素造模使慢性疲劳大鼠体温及HPAA昼夜节律紊乱。表现为体温中值升高、振幅明显减小、峰值时间明显后移；血浆CORT、下丘脑室旁核CRH昼夜节律消失。电针肾俞、足三里对慢性疲劳大鼠异常的体温及HPAA昼夜节律具有良好调整作用。表现为恢复丧失的下丘脑CRH阳性细胞表达、血浆CORT昼夜节律,调整体温昼夜节律中值、振幅、峰相位。下丘脑室旁核CRH是电针调整慢性疲劳大鼠体温、HPAA昼夜节律的关键物质。下丘脑CRH含量增加，有助于电针对慢性疲劳大鼠体温及HPAA昼夜节律的调整作用；下丘脑CRH功能抑制则阻碍电针对慢性疲劳大鼠体温及HPAA昼夜节律的调整作用。

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缩略词表

引言

实验研究

1 实验材料

1.1 实验动物

1.2 主要药品与试剂

1.3 主要器械与仪器

2 实验方法

2.1 实验设计

2.2 动物饲养条件

2.3动物筛选

2.4 实验分组

2.5 动物造模

2.6 侧脑室注射

2.7 电针治疗

2.8 检测指标及测定方法

2.9 动物死亡及剔除情况

3 统计处理

4 结果

4.1 各组基线比较

4.2 造模后各组指标观察

4.3 治疗后行为学检测结果

4.4 治疗后24h动态体温检测结果

4.5 治疗后血浆CORT含量检测结果

4.6 治疗后下丘脑室旁核CRH检测结果

5 讨论

5.1 祖国医学对慢性疲劳的认识

5.2 现代医学对CFS发病机制的认识

5.3 慢性疲劳大鼠模型选择与检验

5.4 观察指标的选择

5.5 侧脑室注射的目的

5.6 治疗方法的选择

5.7 昼夜节律分析方法

5.8 电针治疗对慢性疲劳大鼠昼夜节律的影响

5.9 电针调整慢性疲劳大鼠体温及HPAA昼夜节律的中枢机制

结论

问题与展望

参考文献

致谢

附件1：慢性疲劳综合征动物造模方法研究概况

附件2：免疫组化图

在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果

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