白术内酯Ⅰ对MyD88+人卵巢癌细胞分泌的免疫抑制因子TGF-β1、IL-17A、IL-10和IL-4的影响

摘要

目的：
　　本研究旨在观察白术内酯Ⅰ对 MyD88+人卵巢癌细胞（SKOV-3）中过表达的免疫抑制因子 TGF-β1、IL-17A、IL-10和IL-4分泌的影响,了解白术内酯Ⅰ能否降低这些免疫抑制因子在 SKOV-3细胞株中的分泌，从而降低它们在卵巢癌患者体内的免疫抑制作用，激活机体对肿瘤的免疫应答。
　　方法：
　　用不同浓度的白术内酯Ⅰ（10μmol/L、50μmol/L、100μmol/L）、脂多糖（1mg/L）和不加药诱导相同密度的SKOV-3细胞株培养24小时后，提取细胞上清液。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定各组细胞上清中TGF-β1、IL-17A、IL-10和IL-4的含量。以不同浓度的白术内酯Ⅰ诱导SKOV-3细胞株组为实验组，LPS诱导SKOV-3细胞株组为阳性对照组，不加药诱导SKOV-3细胞株组为阴性对照组。
　　结果：
　　1、SKOV-3细胞株能够自分泌 TGF-β1、IL-17A、IL-10和IL-4，它们的含量分别为（1196±18.81）pg/ml、（125.39±3.18） pg/ml、（48.88±1.54） pg/ml和（12.56±1.23） pg/ml。
　　2、白术内酯Ⅰ低浓度（10μmol/L）时对 SKOV-3细胞株分泌 TGF-β1和IL-17A无明显抑制作用（P>0.05），但其浓度为50μmol/L、100μmol/L时均能降低 IL-17A和TGF-β1的分泌（P<0.05），且白术内酯Ⅰ浓度越大，对 TGF-β1和IL-17A分泌的抑制作用越明显。脂多糖（1mg/L）能够诱导 SKOV-3细胞株分泌TGF-β1和IL-17A增加（P<0.05）。
　　3、白术内酯Ⅰ（10μmol/L、50μmol/L和100μmol/L）和脂多糖（1mg/L）均对 SKOV-3细胞株分泌的 IL-10和IL-4无影响，实验各组间比较均无明显差异（P>0.05）。
　　结论：
　　本实验证实了SKOV-3细胞株能够自分泌 TGF-β1、IL-17A、IL-10和IL-4。TGF-β1和IL-17A在 SKOV-3细胞株中也可能是 My88+信号通路介导分泌的；IL-10和IL-4在 SKOV-3细胞株中可能不是 My88+信号通路介导分泌的。白术内酯Ⅰ在一定的浓度范围内能够降低SKOV-3细胞株分泌的免疫抑制因子TGF-β1、IL-17A、IL-6和VEGF等，从而降低了它们在卵巢癌患者体内的免疫抑制作用，激活了机体对肿瘤的免疫应答。故白术内酯Ⅰ有望成为卵巢癌免疫治疗的一种新型有效的抗肿瘤药物，并在临床上能够得到推广应用。

目录

封面

中文摘要

英文摘要

中英文缩写词对照表

目录

1. 引言

2.1 材料

2.1.1 细胞

2.1.2 实验试剂

2.1.3 主要器材与仪器

2.1.4 主要溶液配制

2.2 实验方法及技术路线

2.2.1 实验流程图

2.2.2 细胞复苏、培养、传代和接种

2.2.3 药物配制

2.2.4 不同浓度的白术内酯-Ⅰ和脂多糖分别诱导人卵巢癌 SKOV-3 细胞 24 小时后 TGF-β1、IL-17A、IL-10 和 IL-4的测定

2.3 统计学方法

2.4 结果

2.4.1 白术内酯Ⅰ以浓度依赖方式下调人卵巢癌 SKOV-3 细胞分泌的 TGF-β1

2.4.2 白术内酯Ⅰ以浓度依赖方式下调人卵巢癌 SKOV-3 细胞分泌的 IL-17A

2.4.3 白术内酯Ⅰ对人卵巢癌 SKOV-3 细胞分泌的 IL-10无影响

2.4.4 白术内酯Ⅰ对人卵巢癌 SKOV-3 细胞分泌的 IL-4 也无影响

2.5 讨论

2.5.1 TGF-β1、IL-17A、IL-10 和 IL-4 在肿瘤微环境中发挥免疫抑制作用

2.5.2 TGF-β1、IL-17A、IL-10 和 IL-4 在卵巢癌中的过表达情况

2.5.3 卵巢癌微环境中形成一个细胞因子网络发生免疫抑制作用

2.5.4 MyD88 信号传导通路介导细胞因子产生

2.5.5 白术内脂Ⅰ与 MyD88 信号通路的联系

2.6 结论

2.7 问题与展望

致谢

参考文献

综述: 卵巢癌相关细胞因子的过表达及其在肿瘤微环境中作用的研究进展

附 件

声明