海南暗罗属植物与藜芦抗肿瘤作用研究

摘要

第一章海南暗罗属植物化学成分和体外抗肿瘤活性
　　目的：以肿瘤细胞抑制率作为评价指标，指导五种海南暗罗属植物系统的分离，力求在海南暗罗属植物中寻找到新的对肿瘤细胞具有高度选择性的活性成分或部位。
　　方法：本研究应用天然药物有机化学相关方法和细胞生物学相关方法对五种海南暗罗属植物进行抗肿瘤活性物质基础研究。
　　1、浓缩提取液所得浸膏以系统溶剂分离法进行部位分离，利用大孔吸附树脂法、硅胶柱色谱法、葡聚糖凝胶柱色谱法和重结晶法对石油醚、氯仿、乙酸乙酯部位进行分离纯化，运用NMR、UV、IR、MS等光谱波谱方法结合对各单体化合物文献研究进行结构鉴定。
　　2、用细胞生物学中MTT体外实验的方法，选取四种临床常见人肿瘤细胞株人肺腺癌细胞（SPC-A-1）、人肝癌细胞（BEL-7402）、人胃癌细胞（SGC-7901）和人白血病细胞（K562），对样品进行抗肿瘤活性测试。
　　结果：
　　1、本研究从海南暗罗根和香花暗罗茎中分离得到24个化合物，其中化合物9、化合物12和化合物16为新化合物，分别命名为polyalimide A、rumphiin、polyalthurea，其他21个化合物均为已知化合物，首次从该植物中分离得到。
　　2、对五种海南暗罗属植物的根、茎、叶不同药物部位进行抗肿瘤活性筛选实验，结果显示，海南暗罗根、香花暗罗茎、香花暗罗叶、香花暗罗根四个部位对四种肿瘤细胞均有较强的生长抑制活性，半数抑制浓度均小于100μg/mL。提示下一步的分离工作可以围绕这四个药物部位开展。
　　3、对海南暗罗根和香花暗罗茎乙酸乙酯部位、氯仿部位、石油醚部位的体外抗肿瘤活性实验结果可以看出，其对肿瘤细胞的生长抑制作用不局限在某一个特定的部位，提示后期对化合物的分离应对三个部位分别开展。
　　4、本课题从海南暗罗根氯仿部位中分离出的新化合物9（polyalimide A），对人肝癌细胞（BEL-7402）未检测出活性，对人肺腺癌细胞（SPC-A-1）、人胃癌细胞（SGC-7901）和人白血病细胞（K562）显示出一定的生长抑制活性，半数抑制浓度（IC50）分别为94.5μg/mL、96.76μg/mL和62.73μg/mL；本课题从香花暗罗茎中分离出2个新化合物，从氯仿部位分离得到的新化合物11（rumphiin）对人肺腺癌细胞（SPC-A-1）和人白血病细胞（K562）显示出一定的生长抑制活性，半数抑制浓度（IC50）分别为187.6μg/mL、63.2μg/mL。从石油醚部位分离的新化合物15（polyalthurea）对四种细胞均无生长抑制活性。
　　5、本课题对分离得到的21个已知化合物也进行了抗肿瘤活性实验。结果显示，从海南暗罗石油醚部位分离出的化合物5（Kolavenic acid）、化合物6（2-oxo-kolavenic acid）对四种肿瘤细胞体外生长抑制活性较强，半数抑制浓度（IC50）均小于50μg/mL；从香花暗罗乙酸乙酯部位分离出的化合物15（oxostephanine）对人肺腺癌细胞（SPC-A-1）、人肝癌细胞（BEL-7402）显示出极强的生长抑制活性，半数抑制浓度（IC50）分别为1.47μg/mL、1.73μg/mL。
　　结论：本课题从单体化合物水平阐明了海南暗罗和香花暗罗的抗肿瘤活性的物质基础，对这些化合物的体内抗肿瘤作用和作用机制还有待进一步的深入研究。同时，本课题从海南暗罗和香花暗罗中分离得到了3个新化合物，提示暗罗属植物的化学成分研究有很大的空间。
　　第二章藜芦提取物体内抗肿瘤活性实验
　　目的：研究藜芦提取物体内对人胰腺癌SW1990细胞的生长抑制活性。
　　方法：建立人胰腺癌裸鼠移植瘤模型，并随机分为对照组、5-FU组、藜芦提取物高、中、低剂量组。以瘤重抑瘤率和相对肿瘤体积抑瘤率为评价指标观察藜芦提取物对胰腺癌肿瘤增殖的抑制作用。
　　结果：和对照组相比，藜芦提取物在3.75、7.5、15mg/kg剂量下，连续灌胃给药14天的肿瘤增殖抑制率为14.79％、32.02%、32.96%；5-FU在15mg/kg剂量时，连续腹腔给药7次肿瘤抑瘤率为41.73%；动物的体重除阳性对照组外，其他组并无显著性差异。在三个给药剂量下，肿瘤体积增长速度均明显放缓，相对肿瘤体积抑瘤率在第17天分别达到46.85%、53.43%和47.40%；而5-FU在15mg/kg剂量时，连续腹腔给药7次相对肿瘤体积抑瘤率为61.92%。
　　结论：藜芦提取物对胰腺癌肿瘤增殖具有一定的抑制作用，其内在作用机制有待进一步阐明。

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主要英文缩写词对照

第一章海南暗罗属植物化学成分和体外抗肿瘤活性 1

1引言

2 实验技术路线图

3 五种海南暗罗属植物化学成分分离和结构鉴定

4 海南暗罗属植物抗肿瘤活性实验

5 小结

参考文献

第二章 藜芦提取物体内抗肿瘤活性实验

1. 藜芦的研究现状

2. 课题选题思路

3 藜芦体内抗肿瘤活性实验

4 小结

参考文献

创新与特色

1 首次从海南暗罗根和香花暗罗茎中分离的 3 个新化合物及其抗肿瘤活性

2 首次从海南暗罗根和香花暗罗茎中分离的 21个已知化合物及其抗肿瘤活性

3 首次发现藜芦水提物体内对人胰腺癌肿瘤增殖具有一定抑制作用

问题与展望

综述一 : 暗罗属植物研究综述

综述二 : 中药抗肿瘤作用机制研究概况

致谢

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