针刺对糖尿病抑郁大鼠血糖、情绪昼夜节律及Per1mRNA、Per2mRNA表达的影响

摘要

目的：
　　本实验应用行为学观察、时间生物学研究方法及分子生物学技术等，研究糖尿病抑郁大鼠的血糖-HPA轴-情绪昼夜节律的改变特点，并且探讨针刺对Per1mRNA、Per2mRNA的基因表达的影响，揭示针刺调节糖尿病抑郁的血糖-HPA轴-情绪昼夜节律紊乱的相关分子生物机理。
　　方法：
　　将32只雄性SD大鼠，随机分为空白组、糖尿病组、糖尿病抑郁组及针刺组，每组8只。空白组给予普通喂养；糖尿病组给予高脂喂养及STZ试剂腹腔注射造模；糖尿病抑郁组给予高脂喂养、STZ试剂腹腔注射及慢性应激造糖尿病抑郁模型；针刺组在糖尿病抑郁组造模基础上针刺后三里、三阴交及百会穴，留针15分钟，连续治疗7天。针刺治疗后，采用股动脉取血及断颈取脑法取出各组大鼠的血清及下丘脑组织，采用酶联免疫吸附法测定皮质醇水平，采用实时定量PCR技术对大鼠SCN内的的per1mRNA、per2mRNA基因的表达量进行检测。
　　结果：
　　1.糖尿病组血糖及情绪：（1）与空白组比较，糖尿病组大鼠的血糖值升高（P<0.05），旷场实验数据值下降（P<0.05）。（2）与空白组比较，糖尿病组大鼠的24小时内的血糖谷峰值差异大（P<0.05）；且其24小时内的血糖值及旷场实验数据的峰值出现时间延后。
　　2.糖尿病抑郁组血糖及情绪：（1）与空白组大鼠及糖尿病组大鼠比较，糖尿病抑郁组大鼠的血糖值升高（P<0.05），旷场实验数据值下降（P<0.05）。（2）与空白组比较，糖尿病抑郁组大鼠24小时内血糖的谷峰值差异大（P<0.05），糖尿病抑郁组大鼠24小时内的血糖峰值出现时间延后，其24小时内的旷场实验数据值改变趋势与空白组大鼠相反。
　　3.针刺组血糖及情绪：（1）与糖尿病抑郁组比较，针刺组大鼠的血糖值下降（P<0.05），其旷场实验数据值上升（P<0.05）。（2）针刺组大鼠的血糖谷峰值差异大（P<0.05），针刺组大鼠血糖值的次高峰与次低谷的出现时间与空白组相同，其峰谷值出现时间有向空白组移位的趋势，且10:00-22:00的最大值与最小值无统计学意义（P>0.05）；针刺组大鼠旷场实验数据与空白组均呈现双峰双谷的节律变化。
　　4.各组的皮质醇水平：与空白组比较，糖尿病组大鼠、糖尿病抑郁组大鼠及针刺组大鼠的皮质醇水平升高（P<0.05）；且三组的皮质醇比较：糖尿病抑郁组>糖尿病组>针刺组（P<0.05）。
　　5.各组的Per1mRNA、Per2mRAN基因表达：与空白组比较，糖尿病组大鼠、糖尿病抑郁组大鼠及针刺组大鼠的Per2mRNA的表达量升高（P<0.05）；与糖尿病抑郁组及糖尿病组大鼠比较，针刺组大鼠的Per2mRNA的表达量下降；各组大鼠的Per1mRNA的表达量比较：空白组<针刺组<糖尿病组<糖尿病抑郁组(P>0.05)。
　　结论：
　　1、针刺具有改善糖尿病抑郁大鼠的血糖、抑郁情绪及调节其血糖、情绪节律的作用。
　　2、针刺具有降低糖尿病抑郁大鼠的皮质醇水平的作用。
　　3、针刺具有调节糖尿病抑郁大鼠的Per2mRNA的表达的作用；针刺可能是通过调节Per2mRNA基因的表达，从而调节血糖及情绪节律紊乱，以治疗糖尿病抑郁的。

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英文摘要

主要英文缩略词表

目录

第一章 前言

第二章 实验研究

1.实验方案线路图

2.动物及实验准备

3.实验方法及结果

第三章 讨论

1.糖尿病抑郁的西医认识

2.中医对于糖尿病抑郁的认识

3.糖尿病抑郁大鼠模型制作评价

4.检测指标的选择

5.针刺调节糖尿病抑郁大鼠的血糖及情绪的作用

6.针刺对糖尿病抑郁大鼠昼夜节律的影响及其机制的探讨

第四章 结论

第五章 问题与展望

致谢

参考文献

附件1：文献综述: 近五年针刺在生物节律中的应用研究概况

附件2：在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果

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