艾灸对实验性RA家兔滑膜HIF-1α/VEGF的调节作用研究

摘要

目的：
　　观察艾灸对实验性RA家兔滑膜中细胞因子白细胞介素-6（IL-6），白细胞介素-1β（IL-1β），肿瘤坏死因子-α（TNF-α），缺氧诱导因子1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子（VEGF）含量的影响；观察艾灸对HIF-1α/VEGF通路的调控；探讨艾灸治疗RA机理。
　　方法：
　　健康日本大耳白兔（以下简称“家兔”）30只，雌雄各半，体重2.5±0.25kg。造模前适应性驯养一周。随机分为空白对照组（以下简称“空白组”），RA模型组（以下简称“模型组”）和艾灸治疗组（以下简称“艾灸组”），每组10只。模型组和艾灸组用弗氏完全佐剂法造模，剂量0.5mL/kg。空白组不做任何处理。艾灸组家兔于造模后第7天开始，艾炷灸双侧“肾俞”(BL23)“足三里”(ST36)各5壮，每日1次，6天为1个疗程，共治疗3个疗程，疗程间休息一天。模型组和空白组家兔不做治疗。分别于造模前后及每个疗程结束后测量家兔双侧后膝关节周长。治疗后21天，处死动物，取膝关节滑膜组织和滑膜液，采用HE染色法，切片光镜下观察滑膜组织病理形态变化，并根据滑膜组织病变程度分级标准对滑膜组织进行病理评分。采用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）法，检测三组家兔滑膜组织中HIF-1α，VEGF蛋白基因表达。酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测各组家兔滑膜液IL-6，IL-1β，TNF-α含量。
　　结果：
　　1.与空白组比较，造模后模型组和艾灸组家兔膝关节周长显著增加（P<0.01）；艾灸治疗后，艾灸组家兔膝关节周长较模型组有明显下降（P<0.01）。
　　2.与空白组比较，模型组家兔滑膜组织水肿，充血，滑膜细胞增生呈多层，小血管增生，可见许多血管翳，较多炎性细胞浸润。滑膜病理评分显著升高；艾灸组相对于模型组，水肿程度下降，小血管增生减少，血管翳生成减少，滑膜细胞增生有所缓解。病理评分下降。
　　3.与空白组比较，模型组和艾灸组家兔滑膜液IL-6、IL-1β、TNF-α的含量显著增加（P<0.01）；艾灸治疗后，艾灸组家兔滑膜液IL-6、IL-1β、TNF-α的含量较模型组显著降低（P<0.05）。
　　4.与空白组比较，模型组和艾灸组家兔滑膜组织HIF-1α、VEGF蛋白基因表达显著增高（P<0.01）艾灸治疗后，艾灸组家兔滑膜组织HIF-1α、VEGF蛋白基因含量较模型组显著下降（P<0.05）。
　　结论：
　　1.艾灸“肾俞”“足三里”能明显减轻家兔膝关节肿胀度，降低家兔膝关节周长，降低滑膜组织炎性细胞的表达，减轻滑膜细胞炎性增生，减轻组织水肿，能缓解滑膜炎症。
　　2.艾灸能降低细胞因子IL-6、IL-1β、TNF-α含量，表明艾灸对RA具有抗炎效应。
　　3.细胞因子IL-6、IL-1β、TNF-α在HIF-1α/VEGF通路中扮演重要角色。
　　4.艾灸可通过降低家兔滑膜中HIF-1α和VEGF含量，抑制HIF-1α/VEGF通路活性，抑制血管新生及血管翳形成，从而减轻滑膜的炎症反应。

目录

封面

中文摘要

英文摘要

中英文缩略词表

目录

引言

研究内容一 艾灸对实验性RA家兔抗炎效应

1实验材料

2.实验方法

3.实验结果

研究内容二 艾灸对实验性 RA 家兔滑膜组织HIF-1α/VEGF通路的影响

1实验材料

2实验方法

3实验结果与分析

讨论

1中医对RA的认识

2现代医学对RA的认识

3关于灸法

4 穴位的选择

5 动物模型的选择

6艾灸治疗实验性RA家兔的抗炎效应

7艾灸对实验性RA家兔HIF-1α/VEGF通路的影响

结论

问题与展望

致谢

参考文献

附件

附件一：综述:艾灸“肾俞” “足三里”在类风湿关节炎治疗中的作用机制研究进展

附件二：在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果

附件三：实验附图

声明