修饰链霉亲和素的核壳型磁性纳米粒子在RNA分离中的研究

摘要

氧化铁磁性纳米粒子可以通过多种方法制备得到，通过表面化学修饰可以得到无机Si 02包覆的核壳结构的复合磁性纳米粒子。其壳结构既具有生物适应性，又具有可键合生物分子(如细胞、蛋白质、酶和抗体等)的活性基团，其核具有超强顺磁性。本文通过对氧化铁磁性纳米粒子的制备，修饰和分离的研究，使磁性纳米粒子分离器有了更好的应用。 (1)首先采用共沉淀的方法，在碱性条件下共沉淀Fe<'2+>和Fe<'3+>离子混合物，通过调节pH值和介质粒子强度防止粒子沉聚，并将粒子尺寸控制在一个标准内。 (2)采用反相微乳液的方法，利用正硅酸乙酯在碱性条件下水解，在γ-Fe<,2>O<,3>的表面包裹一层SiO<,2>。实验结果表明在磁核γ-Fe<,2>O<,3>的表面成功地包裹了SiO<,2>层，形成了核壳型磁性纳米粒子；而且在合适的条件下，合成的核壳型磁性纳米粒子具有均匀的粒径和良好的单分散性。 (3)再在包覆SiO<,2>的颗粒上修饰[N-(2-氨基乙基)-3-氨基丙基三甲氧基硅烷](AEAPS)，再通过链霉亲和素将生物素标记的Oligo(dT)修饰在纳米颗粒的表面，构建了一种具超顺磁性的。RNA纳米分离器，此探针可特异性地结合目标RNA，从而可实现其对互补的RNA片段的高效快速分离和富集。

目录

声明

摘要

第一章文献综述

1.1研究意义

1.2研究进展

1.2.1磁性纳米粒子的合成

1.2.2核壳型磁性纳米粒子的合成及分类

1.2.3核壳型磁性纳米粒子在分离中的应用

1.2.4核壳型磁性纳米粒子在分析检测中的应用

1.2.5核壳型磁性纳米粒子在生物医学中的应用

1.3实验方法和表征手段

1.3.1反相微乳液法

1.3.2穆斯堡尔谱

1.3.3表面增强拉曼光谱(SERS)

1.3.4凝胶电泳法

1.3.5聚合酶链式反应(PCR)

1.3.6原子力显微镜(AFM)

1.3.7电子显微镜

1.4其他

1.5本论文的研究目的及内容

第二章磁性纳米粒子的制备及其性能

2.1实验部分

2.1.1原料与设备

2.1.2实验原理

2.1.3 γ-Fe2O3粒子的制备

2.2试验结果与讨论

2.2.1 X-射线衍射结果

2.2.2透射电镜结果

2.2.3 γ-Fe2O3纳米粒子的磁性能分析

2.3结论

第三章磁性γ-Fe2O3/SiO2复合纳米粒子的制备和性能

3.1实验部分

3.1.1仪器

3.1.2药品

3.1.3实验原理

3.2结果与讨论

3.2.1反应条件对磁性纳米γ-Fe2O3/SiO2复合粒子性能的影响

3.2.2磁性纳米γ-Fe2O3/SiO2复合粒子的性能表征

3.3结论

第四章修饰链霉亲和素的核壳型磁性纳米粒子在RNA分离中的研究

4.1试验部分

4.1.1试剂与仪器

4.1.2包裹SiO2的超顺磁性纳米粒子的制备

4.1.3用[N-(2-氨基乙基)-3-氨基丙基三甲氧基硅烷]（AEAPS)磁性纳米粒子表面

4.1.4在表面包覆SiO2的磁性纳米粒子上连接链酶亲和素

4.1.5超顺磁RNA纳米粒子对目标RNA的分离

4.1.6分离产物RT-PCR扩增及电泳表征

4.2结果和讨论

4.2.1核壳结构的磁纳米颗粒的表征

4.2.2修饰链霉亲和素的复合体的表征

4.2.3超顺磁性RNA纳米分离器对目标RNA的分离富集

4.3总结

参考文献

致谢