二氧化氯对杭白菜采后软腐病的抑制效果及其贮藏品质的研究

摘要

以杭白菜软腐病果胶杆菌（pectobacterium）为供试菌，分别采用二氧化氯气体与液体两种方式在离体条件下对果胶杆菌进行处理。用LB液体培养基进行摇床培养，并测定其在600 nm波长下的吸光度值，绘制果胶杆菌生长曲线；通过对果胶杆菌进行LB平板培养，观察并记录其存活率；采用处理后的果胶杆菌，分别测定二氧化氯处理对果胶杆菌细胞膜透性以及细胞渗出可溶性蛋白质含量的影响；采用细胞壁降解酶诱导培养基对果胶杆菌进行摇床培养，研究不同处理方式以及不同浓度的二氧化氯抑菌活性以及相关机理的研究；通过活体接种实验，研究二氧化氯对果胶杆菌致病力的影响；经过二氧化氯处理的杭白菜，贮藏期间发病情况及贮藏品质研究。研究结果如下：
　　1、二氧化氯处理可显著抑制果胶杆菌的生长速度，降低存活率，使果胶杆菌的细胞膜透性增大，细胞渗出的可溶性蛋白质含量增加，且处理效果与浓度呈正相关。采用LB液体培养基培养20 h后，1.50 mg/L二氧化氯气体处理的细菌浓度最小，抑制率为70.10％，1.00 mg/L二氧化氯液体处理的抑制率为66.6%。其中，采用1.50 mg/L二氧化氯气体处理对果胶杆菌的抑制效果最好，存活率为11.96%。二氧化氯处理的浓度越高，果胶杆菌的细胞膜透性增大，膜渗透率升高，细菌细胞膜渗透率的变化主要在前30 min，30 min以后对照组、0.25 mg/L、0.5 mg/L、0.75 mg/L处理组的细菌细胞膜渗透率趋于稳定。而1.00 mg/L处理组的细胞膜渗透率继续增加，于120 min后趋于稳定。采用考马斯亮蓝染色法测定果胶杆菌的细胞渗出可溶性蛋白含量，发现其可溶性蛋白含量与二氧化氯处理浓度呈正相关，其中，1.50 mg/L气体处理、1.00 mg/L液体处理的可溶性蛋白含量与对照组有极显著性差异（P<0.01），表明二氧化氯处理能够作用于果胶杆菌的细胞膜，破坏其选择渗透性，影响细胞内外的物质交换，使细胞内营养物质渗漏，从而抑制其生长。
　　2、二氧化氯处理能够抑制人工接种果胶杆菌的杭白菜茎段的发病情况，抑制病斑直径，降低发病率。在接种后20 h，对照组的杭白菜茎段已全部发病，0.14 mg/L、0.57 mg/L、1.00 mg/L和1.50 mg/L处理组的病情指数分别为45%、25%、15%、5%。另一方面，二氧化氯处理能够有效抑制果胶杆菌的细胞壁降解酶活性，二氧化氯气体处理后的果胶酶、聚甲基半乳糖醛酸酶、羧甲基纤维素酶和β-葡萄糖苷酶活性峰值比二氧化氯液体处理的峰值延迟一天。实验研究发现，果胶酶系活性较纤维素酶系的活性高，且峰值出现较早，说明果胶酶是果胶杆菌侵染杭白菜的主要致病酶。
　　3、杭白菜为绿叶蔬菜，采用二氧化氯液体处理会导致水分残留，给后续贮藏造成较严重影响，所以，实验采用二氧化氯气体处理，研究其对杭白菜贮藏品质的影响，首先取浓度为1.01 mg/mL、4.03 mg/mL和7.02 mg/mL的二氧化氯溶液各10.00 mL，分别喷洒于三个70.00 L的密闭保鲜箱中，迅速放入5.00 kg杭白菜，密闭处理30 min，实验最终的二氧化氯气体浓度为0.14 mg/mL、0.57 mg/mL和1.00 mg/L，以蒸馏水作对照。二氧化氯处理后，置于2±1℃、湿度85.00-95.00%冷库中贮藏，同时测定其贮藏过程中生理生化指标的变化规律。实验发现，0.57 mg/L的二氧化氯处理杭白菜30 min是本实验中的最佳处理组，该处理条件对杭白菜的失水有明显的抑制作用；可有效延缓可溶性固形物、叶绿素和维生素 C含量的降低；减轻细胞膜脂过氧化作用；抑制多酚氧化酶（PPO）与过氧化物酶（POD）活性的升高。该处理可以使杭白菜贮藏20 d后仍保持较高品质。

目录

主要符号表

第一章 绪论

1.1杭白菜的营养价值

1.2杭白菜产业的现状及面临的问题

1.3杭白菜采后主要病害

1.4软腐病的发生及危害

1.5软腐病的防治技术

1.6蔬菜采后软腐病防治试剂研究现状

1.7二氧化氯

1.8 讨论和总结

1.9 本课题研究的目的和内容

第二章 二氧化氯处理对果胶杆菌的抑菌活性研究

2.1 试验材料与方法

2.2 结果与讨论

2.3 讨论

2.4结论

第三章二氧化氯处理对果胶杆菌致病力及相关致病酶活性影响

3.1 试验材料与方法

3.2 结果与分析

3.3 讨论

3.4 结论

第四章 二氧化氯气体处理对杭白菜贮藏品质的影响

4.1材料和方法

4.2 结果与分析

4.3讨 论

4.4结论

第五章 结论

5.1主要结论

5.2本文创新点

5.3问题与展望

参考文献

在读期间公开发表的论文和承担科研项目及取得成果

致谢

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