人参环氧炔醇对人肝癌细胞株HepG2、SMMC-7721的诱导分化作用

摘要

目的:探讨人参环氧炔醇对人肝癌细胞株HepG2、SMMC-7721的生长抑制及诱导分化作用。
　　方法:(1)以MTT法、光镜、透射电镜观察人参环氧炔醇对HepG2、SMMC-7721人肝癌细胞增殖、形态及超微结构的影响。
　　(2)用ELISA法检测细胞质中甲胎蛋白含量、溴甲酚绿比色法测定白蛋白含量、重氮反应比色法测定γ-谷氨酰转肽酶活力、比色法测定碱性磷酸酶活性的变化。
　　(3)流式细胞仪检测用人参环氧炔醇处理前后的细胞周期变化。
　　(4)RT-PCR法检测不同浓度人参环氧炔醇处理上述肝癌细胞株后Id1、Id2、p21基因表达水平的变化。
　　(5)Western-blot法检测用药前后p21、Rb蛋白表达水平的变化。
　　结果:人参环氧炔醇以时间和剂量依赖性方式抑制人肝癌细胞株HepG2、SMMC-7721的细胞增殖;6μmol/L人参环氧炔醇作用4天,能有效改变肝癌细胞恶性形态和超微结构特征;4～8μmol/L人参环氧炔醇处理后HepG2、SMMC-7721细胞AFP分泌量和γ-GT活性明显降低,白蛋白分泌量及碱性磷酸酶活性上升。细胞周期分析结果显示G0/G1期细胞数增加,S期减少,提示人参环氧炔醇可将细胞周期阻滞于G1期。人参环氧炔醇还使细胞周期正调节因子IdmRNA表达减弱,使负调节因子p21和抑癌基因Rb的基因和蛋白水平表达均增加。
　　结论:低剂量人参环氧炔醇能有效诱导肝癌细胞HepG2、SMMC-7721向正常细胞分化,其机制可能与通过上调抑癌基因p21及Rb的表达、下调细胞分化抑制因子Id基因的表达以及阻滞细胞周期而实现的。

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