亲水性处理粗糙钛表面对成骨细胞黏附的影响

摘要

【目的】对比研究人牙槽成骨细胞(AOBs)在喷砂酸蚀钛（SLA）表面和亲水性喷砂酸蚀钛（modSLA）表面的黏附、铺展行为。探索亲水性处理对喷砂酸蚀钛表面成骨细胞黏附行为的影响。 【材料和方法】（1）扫描电镜和激光共聚焦显微镜观测SLA及modSLA钛片表面形貌。组织块法培养人牙槽骨成骨细胞，鉴定为成骨细胞后，选择第2代成骨细胞用于黏附实验。（2）将成骨细胞分别接种于SLA和modSLA处理的钛片表面。①在接种后1h、3h、6h、12h和24h利用细胞计数法测定细胞黏附率。②在接种后1h、3h、6h应用扫描电镜观察成骨细胞形态。③在接种后1h、3h、6h、12h和24h使用激光共聚焦显微镜观测细胞骨架铺展情况并作荧光积分强度(IOD)定量检测。④使用IPP软件测定各时间点细胞形状因子。⑤接种后6h、24h使用免疫荧光技术检测粘着斑激酶（FAK）的分布和表达,逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测FAK基因表达。所有数据用SAS6.0统计软件包进行统计分析。 【结果】（1）modSLA及SLA材料表面有横径为20～40μm及1～3μm的微米级孔隙，两表面形貌相似:（2）①细胞黏附率：细胞接种后1h、3hmodSLA组表面细胞黏附率高于SLA组(P<0.05)，6h、12h、24h各材料组和时间组之间差异无统计学意义(P>0.05)。②扫描电镜观察成骨细胞形态：细胞接种1 h、3h、6h后，两种材料表面细胞形态相似。接种1h细胞呈圆形；接种3h、6h，细胞逐渐伸展，并形成丝状伪足与材料表面相连。③细胞骨架：细胞接种12h，与SLA相比，modSLA表面细胞可以观察到较清晰的肌动蛋白结构、细胞铺展更充分。细胞接种后3h、6h、12h、24h modSLA组IOD均值显著高于 SLA组(P<0.05)。随时间延长，两种材料表面细胞的IOD值均显著增加（P<0.05)。④细胞形状因子：3h、6h、12hmodSLA组细胞形状因子均值显著小于 SLA组(P<0.05)。随时间延长，两种材料表面细胞的形状因子均显著减小(P<0.05)。⑤FAK：6h、24h两材料表面细胞内FAK均有表达，6h时FAK集中于细胞胞质内边缘区域；24h FAK表达遍布于整个胞质内，细胞核的部位可见免疫荧光强表达。6hmodSLA组细胞FAK的荧光强度和基因表达都高于SLA组(P<0.05)，24h两组材料表面细胞内FAK表达无显著差异（P>0.05）。 【结论】亲水性化学处理能显著促进人牙槽成骨细胞在喷砂酸蚀钛表面的黏附、铺展。亲水性材料可能通过增强成骨细胞中FAK的早期表达，促进细胞的黏附。